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[发明专利]一种快速测定细胞培养上清液中多种化合物含量变化的方法-CN201610888146.3有效
发明人：刘巧霞;郝红元;黄涛宏 -专利权人：岛津企业管理（中国）有限公司
申请日： 2016-10-11 - 公布日： 2018-11-30 - 主分类号： G01N30/88 文献下载
摘要：本发明公开了一种快速测定细胞培养上清液中多种化合物含量变化的方法，步骤为：(1)选取不同时间点的细胞培养上清液，分别平行加入内标并进行前处理，得到不同时间点进样样品；(2)将所得进样样品采用超高效液相色谱和三重四级杆质谱联用仪进行分析，得到不同时间点的色谱图；(3)根据所得不同时间点的色谱图，绘制得到每种化合物在细胞培养过程中随时间的含量变化趋势图。本发明仅用一套仪器系统即可同时测定细胞培养上清液中多种化合物的含量变化，一个样品分析仅需17min，并且前处理方便，分析效率高、操作简单，适用性强，可用于不同细胞培养上清液中多种化合物的快速检测，包括微生物细胞
一种快速测定细胞培养上清液中多种化合物含量变化方法

[发明专利]一种螺旋藻生物裂解的方法及在细菌培养基中的应用-CN202310143374.8在审
发明人：周益装;李晓雯;黄宝霖;赵家伟;葛静怡;李焱钊;潘莹莹;卢海兰;陈美煐 -专利权人：桂林医学院
申请日： 2023-02-21 - 公布日： 2023-06-23 - 主分类号： C12N1/06 文献下载
摘要：本发明涉及一种螺旋藻生物裂解的方法及在细菌培养基中的应用，涉及微生物技术领域，包括如下步骤：S1：培养枯草芽孢杆菌至平台期，离心，获得所述枯草芽孢杆菌的培养上清；S2：将所述枯草芽孢杆菌的培养上清加入灭菌后的螺旋藻的溶液中，裂解，得到所述螺旋藻的裂解液Ⅰ；S3:检测、调节所述螺旋藻的裂解液Ⅰ的pH，后依次加入pH缓冲剂、所述枯草芽孢杆菌的培养上清，再次裂解，得到所述螺旋藻的裂解液Ⅱ；S4:将所述螺旋藻的裂解液Ⅱ重复进行S3和再次裂解3～7次，获取所述螺旋藻的裂解液Ⅱ的上清。本发明螺旋藻生物裂解的效率高，细菌培养效果佳，成本便宜，可推广到工业上进行大规模螺旋藻的裂解，用于细菌培养基的制作。
一种螺旋藻生物裂解方法细菌培养基中的应用

[发明专利]未分化细胞检测方法及复合糖检测方法-CN201280053624.9有效
发明人：馆野浩章;平林淳;伊藤弓弦;小沼泰子;浅岛诚;久野敦;藁科雅岐;福田雅和 -专利权人：独立行政法人产业技术综合研究所;和光纯药工业株式会社
申请日： 2012-10-31 - 公布日： 2014-08-13 - 主分类号： C12Q1/04 文献下载
摘要：本发明的目的是提供使用培养了干细胞的培养上清液评价细胞的分化状态的方法。本发明中，能够提供包含“Fucα1-2Galβ1-3GlcNAc”或“Fucα1-2Galβ1-3GalNAc”的糖链结构的“未分化糖链标志物”，其能够使用干细胞的培养上清液以高灵敏度判定干细胞的未分化状态同时，发现能够以高灵敏度识别该“未分化糖链标志物”的BC2LCN凝集素或其变体是能够以培养上清液来判定细胞的未分化状态的、优秀的“未分化糖链标志物检测用探针”。
分化细胞检测方法复合

[发明专利]动物细胞增殖促进剂、动物细胞培养用培养基和动物细胞培养装置-CN201980074375.3在审
发明人：川岛一公;羽生雄毅;福本景太 -专利权人：整合培育株式会社
申请日： 2019-11-07 - 公布日： 2021-06-22 - 主分类号： C12M3/00 文献下载
摘要：具体而言，将鸟类或爬行类的卵的胚膜的培养上清液用作动物细胞增殖促进剂。例如，通过在动物细胞培养用培养基中，添加含有鸟类或爬行类的卵的胚膜的培养上清液作为有效成分的细胞增殖剂，能够促进动物细胞的增殖。
动物细胞增殖促进剂细胞培养培养基装置

[发明专利]一种利用围产期MSC生产活性因子的方法及美容制剂-CN202010496411.X在审
发明人：王东福;陈智聪;卢丽红;黄里;许峻荣 -专利权人：广东壹加再生医学研究院有限公司
申请日： 2020-06-03 - 公布日： 2020-08-25 - 主分类号： A61K8/99 文献下载
摘要：本发明提供一种利用围产期MSC生产活性因子的方法及美容制剂，包括如下步骤：低氧饥饿培养P1代围产期间充质干细胞；低氧饥饿培养P2代围产期间充质干细胞，收集培养上清液后更换为完全培养基传代至P3代；低氧饥饿培养P3代围产期间充质干细胞，收集培养上清液后更换为完全培养基传代至P4代；低氧饥饿培养P4代围产期间充质干细胞，收集培养上清液后更换为完全培养基传代至P5代。本发明的培养方法，可以显著促进MSC分泌更多活性因子，特别是通过低温诱导处理后，可以提高活性因子的产量。其次回收的细胞因子原液经活性炭过滤后能提高美容制剂的效果。
一种利用产期 msc 生产活性因子方法美容制剂

[发明专利]新型贝莱斯芽胞杆菌菌株及其应用-CN202180075238.9在审
发明人：李炳勋;金玟究;殷秀贤;金亨恩;林亚郎;韩致泳;李东勋 -专利权人：日东制药株式会社
申请日： 2021-09-06 - 公布日： 2023-07-18 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明涉及新型贝莱斯芽胞杆菌菌株ID‑A01、ID‑A02、ID‑A03和ID‑A04及其应用，更具体地，涉及新型贝莱斯芽胞杆菌菌株，其具有治疗龋齿和牙周病以及改善口臭的所有功效；以及所述贝莱斯芽胞杆菌菌株的培养基；所述贝莱斯芽胞杆菌菌株的培养上清液；包含所述贝莱斯芽胞杆菌菌株、其培养基或其培养上清液作为活性成分的用于治疗龋齿、牙周病或口臭的药物组合物；以及包含所述贝莱斯芽胞杆菌菌株、其培养基或其培养上清液作为活性成分的用于治疗龋齿
新型贝莱斯芽胞杆菌菌株及其应用

[发明专利]间充质干细胞上清液中外泌体常温保存保护剂的制备方法-CN202211072589.7在审
发明人：王嘉祥;张寒冰;王宏科;郭红斌;张鹏 -专利权人：王嘉祥
申请日： 2022-09-02 - 公布日： 2022-11-29 - 主分类号： A01N1/02 文献下载
摘要：本发明涉及生物与新医药技术领域，尤其涉及间充质干细胞上清液中外泌体常温保存保护剂的制备方法。保护剂的活性成分包括甘油、维生素B、海藻糖和干细胞培养上清液。干细胞培养上清液来源与人源脐带间充质干细胞。本发明将甘油、维生素B、海藻糖、干细胞培养上清液按比例混合。使干细胞外泌体可以在常温(18℃‑26℃)、无菌等环境下存放一年以上，且保持其结构稳定。
间充质干细胞上清液中外常温保存保护制备方法

[发明专利]一种用于培养细胞的试剂盒-CN201510919017.1在审
发明人：郭镭 -专利权人：郭镭;里程;圣释（北京）生物工程有限公司
申请日： 2015-12-11 - 公布日： 2016-03-23 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明公开了一种新型的无血清培养干细胞的试剂盒，该试剂盒包括无血清培养基，该培养基成分包括：所述无血清培养基包含0.05-0.2体积份的β-巯基乙醇、0.5-2体积份的非必需氨基酸水溶液、4-6体积份的人间充质干细胞培养上清浓缩液所述培养上清浓缩液通过以下步骤制得：收集脐带间充质干细胞培养上清液，离心去除细胞、细胞碎片与杂质等，微滤膜过滤，超滤浓缩。利用本发明的试剂盒进行干细胞培养，细胞在长期培养情况下依然保持多向分化潜能及较强的增殖能力。
一种用于培养细胞试剂盒

[发明专利]一种人间充质干细胞培养上清液冻干粉的制备及复苏方法-CN202110267857.X在审
发明人：徐健;李陶;陈思源 -专利权人：浙江圣希澳医学科技有限公司
申请日： 2021-03-11 - 公布日： 2021-06-29 - 主分类号： A61K8/99 文献下载
摘要：本发明公开了一种人间充质干细胞培养上清液冻干粉制备及复苏方法，其中制备方法包括以下步骤，干细胞的培养，用含有自体血清的DMEM培养基培养人间充质干细胞；上清液的收集，收集低传代人间充质干细胞培养上清液；冻干粉的制备，将收集到的上清液离心，在去除离心管上层30％～33％的上清液后，将离心管中剩余的上清液转移至一收集管中，丢弃离心管中的沉淀，再对所述收集管中的上清液低温冻存凝固后，再真空冷冻制得冻干粉。本发明利用离心技术获得高纯度、高活性的人间充质干细胞活性因子浓缩液，低温真空抽干成冻干粉，可以长时间保持细胞因子活性；而采用离心管上层的上清液作为冻干粉复苏液，能够很好的溶解冻干粉，并保持细胞因子活性。
一种人间干细胞培养上清液冻干粉制备复苏方法

[发明专利]人牙髓干细胞培养上清在制备化妆品中的应用-CN201810174632.8在审
发明人：常方圆;杨佳音;李月玲 -专利权人：常方圆
申请日： 2018-03-02 - 公布日： 2018-06-29 - 主分类号： A61K8/99 文献下载
摘要：本发明公开了一种人牙髓干细胞培养上清在制备化妆品中的应用，所述的人牙髓干细胞为从人的牙髓中分离、体外培养得到；所述培养上清为在细胞培养过程中收集得到的含有细胞分泌物的培养基；将人牙髓干细胞培养上清作为对成纤维细胞具有促增殖作用的活性成分在制备化妆品中的应用通过均质工艺将人牙髓干细胞培养上清添加在化妆品中，其中，每克化妆品中人牙髓干细胞培养上清的含量为0.05g‑0.8g。本发明将人牙髓干细胞培养上清作为生物活性成分添加到化妆品中，可以有效维持皮肤弹性、减轻褶皱、预防皱纹，使皮肤保持健康状态。
人牙髓干细胞培养化妆品制备应用细胞培养过程褶皱成纤维细胞促增殖作用细胞分泌物牙髓干细胞成分添加健康状态均质工艺皮肤弹性生物活性体外培养培养基干细胞牙髓皱纹皮肤预防

[发明专利]用于生产b型流感嗜血杆菌抗原的方法-CN201380035582.0有效
发明人： J.勒希尔;P.卢比埃;F.巴比拉托;N.林德利 -专利权人：赛诺菲巴斯德有限公司
申请日： 2013-07-02 - 公布日： 2018-07-10 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明涉及用于在工业规模上生产用于疫苗目的b型流感嗜血杆菌的荚膜多糖(PRP)的方法，根据所述方法，将b型流感嗜血杆菌(Hib)的菌株在培养基中培养，收获该培养上清液，处理该培养上清液以便从其提取荚膜多糖，所述培养基包含至少：–一种碳源，–原卟啉，–盐，–氨基酸，–NAD或NADH，–维生素，–pH调节手段，其特征在于所述培养基是在化学上确定的。
培养基培养上清液荚膜多糖工业规模原卟啉抗原氨基酸菌株维生素疫苗生产收获

[发明专利]一种人脐带间充质干细胞源外泌体制剂-CN201910308693.3在审
发明人：刘瑾;卢明星;刘福京 -专利权人：深圳国科靶点药物有限公司
申请日： 2019-04-17 - 公布日： 2020-10-27 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明公开了一种人脐带间充质干细胞源外泌体制剂，包括以下原料:Lonza UltraCULTURE无血清培养基，PALL UltroserG血清替代物，L‑Glutamine，灵芝多糖。将所培养的细胞消化下来用氯化钠注射液洗涤后加入培养上清液中。上清液放入超低温冰箱中冷冻。将培养上清液取出解冻，高速离心后取上清液用超滤膜浓缩，然后加入透明质酸钠、人血白蛋白、海藻糖制备人脐带间充质干细胞外泌体制剂。该人脐带间充质干细胞源外泌体制剂的制备方法使用无血清培养体系品质稳定、批间差异小，避免引入外源致病因子；添加灵芝多糖能促进脐带间充质干细胞的增殖和促进脐带间充质干细胞分泌外泌体；完全培养基和条件培养基用来获得外泌体，提高产量；细胞冷冻裂解后内容物混入培养上清中，增加活性物质浓度，是一种效果很好的美容抗衰生物制剂。
一种脐带间充质干细胞源外泌体制

[发明专利]人胚胎干细胞定向诱导分化为角膜内皮细胞的方法-CN201610457758.7有效
发明人：陈小鸟;吴玲玲;王丽强;黄一飞 -专利权人：中国人民解放军总医院
申请日： 2016-06-22 - 公布日： 2019-11-19 - 主分类号： C12N5/079 文献下载
摘要：本发明利用原代人角膜基质细胞培养上清液、人角膜内皮细胞培养上清液以及人晶状体细胞培养上清液作为条件培养基，通过向培养基中添加维甲酸和多种重组蛋白，结合三维培养和二维培养方法，模拟角膜内皮细胞发育进程诱导人胚胎干细胞定向诱导分化为人角膜内皮细胞，能够获得形态结构与正常人角膜内皮细胞相似的人角膜内皮细胞，体外传代培养结果显示其增殖能力与正常人角膜内皮细胞一致。
胚胎干细胞定向诱导化为角膜内皮细胞方法

[发明专利]一种含细胞生长因子和牡丹提取物的护肤组合物与应用-CN201810980730.0在审
发明人：杨学义;张延召;冯爱青;郭燕杰;马西亚;张沛 -专利权人：洛阳师范学院
申请日： 2018-08-27 - 公布日： 2018-12-14 - 主分类号： A61K8/99 文献下载
摘要：所述的含细胞生长因子和牡丹提取物的护肤组合物，包含牡丹提取物和成纤维细胞培养上清液。>2超临界流体萃取牡丹花瓣中的花青素等组分，萃取温度低、能有效保护花青素生理活性功能、避免了不饱和脂肪酸的氧化分解，提取率高，且溶剂无残留，作为护肤品添加剂安全性高；本发明备得的成纤维细胞培养上清液包含原代培养上清液，其富含多种细胞生长因子，相对于传代培养上清液，细胞生长因子具有更好的表皮修复功能，更好地显示与皮肤紧密结合，具有更好的抗衰老效果。
细胞生长因子牡丹提取物上清液护肤组合物成纤维细胞培养花青素抗衰老护肤品超临界流体萃取不饱和脂肪酸护肤品添加剂生理活性功能协同促进作用表皮修复超微粉碎传代培养牡丹花瓣氧化分解原代培养组分配比无残留溶剂富含萃取应用皮肤

[发明专利]含有干细胞激活剂的培养基及间充质干细胞的培养方法-CN202010209520.9有效
发明人：梁璐 -专利权人：天津百恩生物科技有限公司
申请日： 2020-03-23 - 公布日： 2022-12-09 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明公开了含有干细胞激活剂的培养基及间充质干细胞的培养方法，培养方法为：1)将间充质干细胞用细胞培养基培养至80％的融合度后，弃去培养基；加入含干细胞激活剂的培养基；培养；清洗；2)加入复方电解质溶液，培养，按半量体积收集培养上清液；3)加入半量体积复方电解质溶液，培养，按半量体积收集培养上清液；4)重复步骤3)4‑8次；5)将收集的培养上清液过滤浓缩，纯化、除菌，获得干细胞因子群。
含有干细胞激活剂培养基间充质培养方法