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[发明专利]一种体外诱导卵原细胞向卵母细胞分化的方法-CN202111018146.5有效
发明人：葛伟;王璐;沈伟 -专利权人：青岛农业大学
申请日： 2021-08-31 - 公布日： 2023-06-09 - 主分类号： C12N5/075 文献下载
摘要：本发明公开一种体外诱导卵原细胞向卵母细胞分化的方法，该诱导方法将雌性胎鼠E11.5时期卵巢组织用琼脂块进行三维培养，在卵巢组织培养液中5～7天后，再置于含有他莫昔芬的培养液中培养5～7天，促进了E11.5时期的卵原细胞在体外条件下形成大量初级卵泡，然后在卵巢组织液中培养5～7天；分离出单个卵泡，将分离出来的卵泡经过体外单卵泡贴壁培养和卵泡体外成熟培养，获得了大量MII期的卵母细胞。通过选取雌性胎鼠E11.5时期卵巢组织，使卵巢组织中只存在处于有丝分裂阶段的卵原细胞，构建了一种研究完整体外卵子发生过程的最佳模型；通过3D琼脂培养、含有他莫昔芬的培养基、以及实验步骤的设计，成功将早期卵原细胞在完全体外条件下诱导形成了MII期的卵母细胞。
一种体外诱导细胞分化方法

[发明专利]多囊卵巢综合征小鼠卵泡形态学评估方法-CN202211371377.9在审
发明人：肖娜;程腊梅;林戈;卢光琇 -专利权人：湖南光琇高新生命科技有限公司
申请日： 2022-11-03 - 公布日： 2023-01-31 - 主分类号： G01N1/06 文献下载
摘要：本申请建立了一种PCOS小鼠卵泡形态学评估的方法，通过取离体卵巢组织后进行连续切片和HE染色比较正常小鼠和DHEA诱导小鼠目标卵泡的最大切面面积、壁层颗粒细胞层面积、壁层颗粒细胞层面积/目标卵泡最大切面面积比值，确定PCOS疾病中卵泡形态关键评估指标的临界值，准确评估PCOS卵泡。
卵巢综合征小鼠卵泡形态学评估方法

[发明专利]一种Rho-ROCK信号通路抑制剂Y27632对小鼠卵泡体外发育影响的研究方法-CN201910301109.1有效
发明人：俞晓丽;蒲静;刘心蕊;罗晓强;邱意开;张樱馨;王翔;裴秀英 -专利权人：宁夏医科大学
申请日： 2019-04-15 - 公布日： 2023-08-01 - 主分类号： C12Q1/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种Rho‑ROCK信号通路抑制剂Y27632对小鼠卵泡体外发育影响的研究方法，取出生后12天的小鼠卵巢，通过不同分离方法获得腔前卵泡，采用微滴的方式进行卵泡生长和卵母细胞体外成熟培养。通过本研究表明，该抑制剂的确可以降低卵泡发育过程中颗粒细胞的凋亡，这为卵泡的继续发育提供了可靠保障。
一种 rho rock 信号通路抑制剂 y27632 小鼠卵泡体外发育影响研究方法

[发明专利]一种通过剖宫产获卵的生育力保存方法-CN202110036708.2在审
发明人：千日成 -专利权人：艾尔斯（浙江）医学科技有限公司
申请日： 2021-01-12 - 公布日： 2021-04-20 - 主分类号： C12N5/075 文献下载
摘要：本发明实施例公开了一种通过剖宫产获卵的生育力保存方法，所述方法包括：在剖宫产过程中，通过卵巢表面可见的卵泡获得卵泡液；通过所述卵泡液，获得未成熟的卵丘细胞‑卵子‑复合体；将未成熟的所述卵丘细胞‑卵子‑复合体进行体外成熟培养，获得体外成熟的卵丘细胞‑卵子‑复合体；去除体外成熟的所述卵丘细胞‑卵子‑复合体周边的卵丘细胞和颗粒细胞，获得体外成熟卵母细胞；将所述体外成熟卵母细胞进行玻璃化冷冻保存，以实现生育力的保存。该方法在剖宫产的同时取出卵巢表面可见卵泡内的未成熟卵进行体外成熟培养和玻璃化冷冻保存，不仅可避免促排药物的刺激和有创手术的副作用，还可进行女性自身生育力的保存，为将来生育提供后备保障。
一种通过剖宫产生育力保方法

[发明专利]一种利用3D打印技术促进人未成熟卵母细胞体外成熟的方法-CN201611004303.6在审
发明人：郑立;赵劲民;靳攀;蒋童蒙;朱永佳 -专利权人：广西医科大学
申请日： 2016-11-15 - 公布日： 2017-04-19 - 主分类号： C12N5/075 文献下载
摘要：本发明涉及生物3D打印技术领域，具体是一种利用3D打印技术促进人未成熟卵母细胞体外成熟的方法；所述方法包括如下步骤(1)处理得当卵巢细胞的裸卵及颗粒细胞；(2)卵巢颗粒细胞体外平衡培养；(3)将卵母细胞放入卵巢颗粒细胞中，继续培养2天；(4)作为3D打印用墨水；(5)制备3D打印用凝胶；(6)采用3D打印技术打印出卵泡，在卵泡内放置卵母细胞和体外成熟培养液，培养一周即得；本发明试图通过模拟出与人体生化环境相仿的卵泡，再依托于3D打印技术将卵母细胞快速准确的置于卵泡中进行人工培育，从而实现人体未成熟的卵母细胞的体外成熟，本发明以3D打印技术为依托，整个过程快捷方便，自动化程度高，有助于降低卵母细胞体外成熟的技术费用。
一种利用打印技术促进未成熟细胞体外成熟方法

[发明专利]一种绵羊卵巢颗粒细胞分离、培养及鉴定方法-CN202110850420.9在审
发明人：周荣艳;宋鹏琰;岳巧娴;张配颖;陈晓勇;刘月琴;付强;陶晨雨 -专利权人：河北农业大学
申请日： 2021-07-27 - 公布日： 2021-10-01 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明公开了一种绵羊卵巢颗粒细胞分离、培养及鉴定方法，属于动物细胞培养技术领域。本申请通过特殊的收集、消毒、切割等处理方式获得卵巢颗粒细胞。本申请的方法具有简便、省力、污染率低、卵泡液获得率高等优点，为卵巢颗粒细胞、卵母细胞及卵泡发育的研究打下基础。
一种绵羊卵巢颗粒细胞分离培养鉴定方法

[发明专利]生产促卵泡激素的细胞克隆-CN200880022358.7有效
发明人： S·阿诺德;N·耶利内克 -专利权人：拜奥吉耐里克斯股份公司
申请日： 2008-06-27 - 公布日： 2010-06-02 - 主分类号： C07K14/59 文献下载
摘要：本发明涉及含有分别编码人促卵泡激素(FSH)的α链和β链的核酸序列的核酸分子，其对核酸序列在CHO细胞中的密码子使用进行了修饰。本发明还涉及含有这样的核酸序列的重组核酸分子、内含这样的重组核酸分子的宿主细胞，以及它们在人促卵泡激素的生产中的用途。最后本发明也涉及了在无血清的情况下将本发明的重组核酸分子转染入悬浮培养的细胞，从而产生表达人促卵泡激素的宿主细胞的方法。
生产卵泡激素细胞克隆

[发明专利]一种与初产母猪乏情相关的miRNA分子及其应用-CN202310363237.5在审
发明人：任巧玲;张家庆;罗玉衡 -专利权人：河南省农业科学院畜牧兽医研究所
申请日： 2023-04-04 - 公布日： 2023-06-23 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：本发明公开了一种与初产母猪乏情相关的miRNA分子的应用，其特征在于，miR‑182在促进猪卵泡颗粒细胞凋亡、抑制颗粒细胞增殖中的应用；miR‑182mature序列：5’‑UUUGGCAAUGGUAGAACUCACACU‑3’反向互补序列：3’‑AGTGTGAGTTCTACCATTGCCAAA‑5’；miR‑182在抑制猪颗粒细胞分泌雌激素中的应用；miR‑182在抑制卵泡发育和成熟中的作用；miR‑182抑制剂在制备促进卵泡发育和成熟药物中的应用；miR‑182激动剂在制备抑制卵泡发育和成熟药物中的应用；本发明发现了miR‑182抑制初产猪卵泡颗粒细胞的增殖，并找到了miR‑182作用的直接靶点，可以设计以miR‑182为靶点的新药，为制备治疗初产母猪乏情提供了新的靶点
一种母猪相关 mirna 分子及其应用

[发明专利]用于使用自体细胞系统从生殖系细胞离体产生有发育能力的卵的方法和组合物-CN201480066902.3在审
发明人： J.L.蒂利;D.C.伍兹 -专利权人：东北大学
申请日： 2014-10-07 - 公布日： 2016-08-31 - 主分类号： C12N5/00 文献下载
摘要：本技术提供用于多潜能细胞、雌性生殖系干细胞或卵原干细胞向卵母细胞、颗粒细胞和/或颗粒前体细胞，即，“人造颗粒细胞”定向分化的方法。所述人造颗粒细胞可用在用于卵泡或卵泡样结构和未成熟卵母细胞的生长和成熟的方法中。另外，所述人造颗粒细胞可用于在有需要的受试者中增加卵巢衍生的激素和生长因子的方法中。
用于使用体细胞系统生殖细胞产生发育能力方法组合

[发明专利]一种激活素A促进原始卵泡库形成的方法-CN201310654177.9在审
发明人：梁桂金;刘京才;赖方秾;秦训思;程顺峰;沈伟 -专利权人：青岛农业大学
申请日： 2013-12-06 - 公布日： 2014-03-26 - 主分类号： C12N5/075 文献下载
摘要：本发明涉及一种激活素A促进原始卵泡库形成的方法，操作步骤如下：1）利用体内和体外实验确定激活素A发挥作用的关键时期是出生前12天到出生后7天；2）利用细胞荧光染色和western blot检测减数分裂相关蛋白的表达情况，确定激活素A促进雌性生殖细胞第一次减数分裂的进程；3）利用免疫荧光组化的方法统计各组中原始卵泡形成情况，激活素A促进原始卵泡库的建立。本发明方法原理可靠，操作简单，激活素A在卵母细胞发生早期起重要作用，它使雌性生殖嵴中保持相对高浓度的视黄酸，视黄酸在雌性生殖细胞中促进了Stra8基因的表达，加速了雌性生殖细胞减数分裂启动及进程，促进了原始卵泡的形成
一种激活促进原始卵泡形成方法

[发明专利]一种牛卵泡颗粒细胞体外培养调节剂及其应用-CN202111253321.9在审
发明人：刘彦;杨婷;许晓玲;白佳桦;冯涛;秦玉圣;宋玉清;肖霖力 -专利权人：北京市农林科学院
申请日： 2021-10-27 - 公布日： 2022-02-08 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明提供了一种牛卵泡颗粒细胞体外培养调节剂及其应用，其调节剂中含有促肾上腺皮质激素(ACTH)。本发明通过采用添加有促肾上腺皮质激素的体外培养液对牛卵泡颗粒细胞培养时，促肾上腺皮质激素能够促进牛卵泡颗粒细胞孕酮的合成，促肾上腺皮质激素能够下调P450arom基因的表达，上调P450scc基因的表达促肾上腺皮质激素作为牛卵巢功能的内分泌调控因子，通过上调类固醇激素的合成，促进颗粒细胞分化。将促肾上腺皮质激素应用在牛卵泡颗粒细胞的增强类固醇合成的制剂中，具有良好的应用价值。
种牛卵泡颗粒细胞体外培养调节剂及其应用

[发明专利]一种利用超声波从母马活体取卵的装置及取卵方法-CN202211214900.7在审
发明人：刘红波;吕培茹;张小欣;王彦涛;尹珊 -专利权人：河南天启生物技术有限公司
申请日： 2022-09-30 - 公布日： 2023-01-06 - 主分类号： A61D19/02 文献下载
摘要：本发明属于生物技术领域，特别涉及一种利用超声波从母马活体取卵的装置，包括取卵针；以及与取卵针相连接的用于把卵母细胞从卵泡上脱落的超声波取卵组件；超声波取卵组件中的超声波振头通过连接部安装在取卵针中；取卵针的端部连接有用于抽出卵母细胞的负压取卵组件本发明主要由取卵针、超声波取卵组件、负压取卵组件等部件构成，将超声波取卵组件、负压取卵组件与取卵针连接在一起，通过取卵针插入到卵泡中，由超声波取卵组件中的超声波振头发出超声波经由取卵针传导至卵泡中，通过超声波来促进卵母细胞从卵泡上脱落，然后通过负压取卵组件抽取卵泡内的液体，将脱落的卵母细胞随同卵泡液一同抽取出来，方便了进行取卵。
一种利用超声波母马活体装置方法

[发明专利]CTNNB1基因在猪卵巢颗粒细胞中的应用-CN202010602465.X有效
发明人：陈赞谋;张哲;李加琪;李丽莹;袁晓龙;张豪 -专利权人：华南农业大学
申请日： 2020-06-29 - 公布日： 2022-06-17 - 主分类号： C12N15/12 文献下载
摘要：本发明公开CTNNB1基因在猪卵巢颗粒细胞中的应用，属于细胞工程和基因工程技术领域。本发明检测了猪不同时期卵巢组织、不同大小卵泡及其颗粒细胞中CTNNB1mRNA的相对表达量，以及超表达和抑制CTNNB1后颗粒细胞的增殖、凋亡及类固醇激素的分泌情况。结果显示，CTNNB1基因参与促进颗粒细胞的增殖和雌二醇的分泌，抑制颗粒细胞的凋亡和睾酮、孕酮的分泌，说明CTNNB1基因参与母猪卵巢卵泡的发育和成熟。本发明为母猪卵巢卵泡发育过程中的分子机制研究积累了材料。
ctnnb1 基因卵巢颗粒细胞中的应用

[发明专利]一种利用人卵泡液源性卵巢上皮细胞分化获得卵母细胞样细胞或体细胞的方法-CN201510091546.7在审
发明人：赖东梅;徐敏骅;张秋婉;李厅;王茜;尧晓芬;卜时夏 -专利权人：中国福利会国际和平妇幼保健院
申请日： 2015-02-28 - 公布日： 2016-10-05 - 主分类号： C12N5/075 文献下载
摘要：本发明涉及一种利用人卵泡液源性卵巢上皮细胞分化获得卵母细胞样细胞或体细胞的方法。本发明首次证实了人卵泡液源性卵巢上皮细胞具有干细胞的特性，体外培养可分化为卵母细胞样细胞、可形成表达干细胞特异性表面标志的细胞克隆、具有向三胚层来源的体细胞分化的能力，可作为干细胞的来源之一，为再生医学如克隆自身卵细胞或体细胞等提供了一种可行的途径
一种利用卵泡液源性卵巢上皮细胞分化获得细胞或体方法

[发明专利]神经多肽Y在提高绵羊体外胚胎质量的应用方法-CN202310676598.5在审
发明人：林嘉鹏;吴阳升;陈莹;汪立芹;黄俊成;王旭光;毋状元;郝耿;史洪才;刘莉;杨楠 -专利权人：新疆畜牧科学院生物技术研究所（新疆畜牧科学院中国-澳大利亚绵羊育种研究中心）
申请日： 2023-06-08 - 公布日： 2023-07-11 - 主分类号： C12N5/073 文献下载
摘要：本发明具体公开了神经肽Y在提高绵羊体外胚胎质量的应用方法，该应用方法包括如下步骤：（1）获取当日宰杀绵羊卵巢；（2）分别抽吸卵巢表面小卵泡（1‑2mm），大卵泡（3‑5mm）卵母细胞进行培养；（3）将体外培养24h卵母细胞吹裸去除卵丘细胞；（4）将卵母细胞加入体外受精液中，继续培养24h；（5）统计受精卵卵裂率，受精卵移至胚胎培养液继续培养，144‑168h统计囊胚率。通过在绵羊小卵泡卵母细胞体外成熟培养液中添加NPY多肽，能显著提高胚胎的囊胚率。
神经多肽提高绵羊体外胚胎质量应用方法