本发明涉及生物技术领域,具体公开了同步鉴别食品中多种动物源性成分的多重RT‑PCR预混试剂冻干球及其制备方法与应用。本发明的制备多重RT‑PCR预混试剂冻干球的方法,其中,所述冻干球包括多重荧光PCR反应体系和保护剂,所述多重荧光PCR反应体系包含5对特异性引物组合,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1‑10所示,所述保护剂包括聚乙二醇本发明方法制备的多重RT‑PCR冻干球,可常温运输和储存,能用于鉴别肉或肉制品中是否含有猪、牛、绵羊、山羊、鸡、鸭、狗、狐、貉9种动物源性成分。具有检测准确,操作简便快速高效的优点。