本发明的降低SPP1基因表达的小干扰RNA序列如SEQ ID NO:1‑2所示;本发明的突变型克隆载体针对前述降低SPP1基因表达的RNAi的靶序列构建。本发明的方法通过RNAi沉默基因观察功能变化情况,回复突变的载体与RNAi同时感染或转染目的细胞,沉默内源目的基因,通过外源突变型载体表达与内源相同功能的蛋白,经过这样组合处理细胞功能不发生改变;或者将突变型载体导入RNAi沉默后,功能得到回复,证明功能表型是由此基因引起的,为基因功能研究提供了一种新的模型和方法。
本发明属于分子生物学、基因工程技术领域,具体为一种在蝴蝶兰中表达的AGAMOUS-like基因家族的PhAGCu基因的核苷酸编码序列及其在改变花发育,成花转变和形态构建方面的应用。本发明涉及的蝴蝶兰PhAGCu基因具有特定序列的DNA分子,全长950bp,包括一个717bp开放读框,其核苷酸序列为SEQ ID NO.1。本发明还包含上述基因的重组表达载体,转基因植株,获得此基因的核苷酸引物系列,用于检测内源表达模式的寡核苷酸探针序列,以及对蝴蝶兰此内源基因的表达模式进行分析鉴定的方法。将本发明所说基因转入烟草,所获得的转基因植株的花的形状及结的种子都发生明显变化,表明该基因可影响植株有性器官的发育。
本发明属于植物基因工程技术领域。具体涉及二化螟[Chilo suppressalis(Walker)]内源小RNA在水稻抗虫改良中的应用。本发明对所获得的二化螟内源小RNA序列进行了功能验证和应用研究。利用高通量小RNA测序和生物信息学分析的手段,得到一条二化螟内源的小RNA csu-15的DNA序列,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。离体茎秆接虫试验表明,转基因水稻能显著抑制二化螟幼虫的生长。
本发明公开了一种香菇半胱氨酰亚砜裂解酶基因及应用,所述的香菇半胱氨酰亚砜裂解酶基因的序列为SEQ ID NO.1所示,编码的蛋白质为SEQ ID NO.2所示。利用本发明提供的基因序列,构建了含有该基因的原核表达载体,并通过大肠杆菌外源表达获得了具有酶活力的重组香菇半胱氨酰亚砜裂解酶。本发明克隆出的香菇半胱氨酰亚砜裂解酶基因与目前报道的其它半胱氨酰亚砜裂解酶基因具有明显差异性,是一种新的半胱氨酰亚砜裂解酶基因,为进一步研究该基因家族进化关系提供条件。本发明为利用基因工程技术调控香菇内源甲醛产生提供了更多的基因资源,也为研究生物内源甲醛带来的食品安全问题提供更开阔的思路。