本发明提供了一种同时检测艾伯特埃希氏菌O1‑O7血清型的试剂盒,属于多重PCR检测技术领域。本发明的试剂盒含有分别针对艾伯特埃希氏菌O1‑O7血清型的特异性引物对和一对内参引物,特异性引物对的核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1‑14所示,内参引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.15‑16本发明试剂盒通过设置多重PCR体系,优化反应条件,经单管一次PCR、琼脂糖电泳分析产物长度实现了对艾伯特埃希氏菌O1‑O7血清型的准确检测。本发明的试剂盒具有检测准确,灵敏度高、特异性强,简便快速的优点,适合对临床腹泻样本中艾伯特埃希氏菌的流行病学调查,具有良好的应用前景。