本发明公开了瓜蒌斑驳花叶病毒及其侵染性克隆载体、构建方法和应用,所述瓜蒌斑驳花叶病毒的微生物保藏编号为CGMCC NO:21930,其序列如SEQ ID NO:15所示。该病毒的侵染性克隆载体由瓜蒌斑驳花叶病毒的全序列融合到带35S启动子和核酶Rz的载体pCB301制备得到。通过农杆菌介导转化后在寄主体内转录、复制、侵染,以用于病毒的功能基因组研究。本发明为研究该病毒的基因组结构和功能以及病毒与寄主之间的相互作用提供了成熟的体系。
本发明提供一种重组杆状病毒及其在制备新城疫病毒样颗粒中的应用,所提供的重组杆状病毒,其中包含有编码新城疫病毒HN、F蛋白的核苷酸片段;所述的HN和F蛋白,其氨基酸序列分别为SEQ ID NO:6;SEQ本发明所构建的重组杆状病毒用于在昆虫细胞中制备新城疫病毒的病毒样颗粒;本发明所制备的病毒样颗粒用于制备疫苗。本发明通过对新城疫病毒HN、F蛋白的cDNA全序列进行筛选和分析,选取了其中抗原表位较丰富、能够在昆虫细胞中高效表达的cDNA序列。再对HN和F蛋白进行优化改造后,利用昆虫细胞‑杆状病毒表达系统制备病毒样颗粒,病毒蛋白产量显著高于SPF胚培养的病毒,生产成本明显降低。
本发明公开了一株RSV病毒及其应用,病毒全基因组长15180 bp,其序列如SEQ ID NO:1所示,氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。本发明在中国分离的RSV A13病毒株序列的基础上获得的基因工程疫苗具有良好的免疫原性,其中BR4 F蛋白可以诱导更高水平的抗体免疫反应,对小鼠肺部RSV A2和A13病毒株均具有极好的清除率。