本发明公开了一种检测禽流感三价DNA疫苗中单个质粒含量的引物和探针组合及试剂盒,包括SEQ ID No.1~SEQ ID No.6所示核苷酸序列的引物及SEQ ID No.7~SEQ ID No.9所示核苷酸序列的TaqMan探针。本发明建立的定量测定和区分禽流感(H5+H7)三价DNA疫苗(pH5‑FJ(H5‑Re13)株+pH5‑SX(H5‑Re14)株+pH7‑YN(H7‑Re4)株)中pH5‑FJ(H5‑Re13)株、pH5‑SX(H5‑Re14)株和pH7‑YN(H7‑Re4)株各组份含量的TaqMan荧光定量PCR方法重复性好,准确性高,对于检测禽流感DNA三价苗中各个质粒的含量监控具有重要的现实意义。
本发明公开了一种禽流感病毒血凝素蛋白,其具有如SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:3和/或SEQ ID NO:5所示的氨基酸序列。本发明还公开了编码上述禽流感病毒血凝素蛋白的基因,所述基因具有如SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:4和/或SEQ ID NO:6所示的序列。所述基因可用于制备针对当前流行的H5和H7型禽流感病毒的DNA疫苗。
编码H5亚型禽流感病毒血凝素蛋白的基因及其应用。本发明公开了一种编码禽流感病毒血凝素蛋白的基因,其具有SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列。所述基因可以用于制备H5亚型禽流感病毒DNA疫苗。所述DNA疫苗不仅对同源HA基因供体毒株的攻击提供100%的免疫保护,还能对异源H5亚型2.3.4.4分支禽流感病毒的致死性攻击提供完全的免疫保护。
本发明提供一种同时表达H5N1亚型禽流感同义血凝素蛋白和同义神经氨酸酶蛋白的重组表达载体,其中所述同义血凝素蛋白的氨基酸序列为SEQ ID NO:1,所述同义神经氨酸酶蛋白的氨基酸序列为SEQ ID NO:2,所述重组表达载体通过将编码SEQ ID NO:1的核苷酸序列和编码SEQ ID NO:2的核苷酸序列插入到同一个表达载体中构建而成。本发明提供包含有效量的上述重组表达载体的DNA疫苗,所述疫苗可以有效预防和/或治疗H5亚型禽流感病毒的感染。本发明同时涉及所述蛋白或其编码核苷酸序列作为H5亚型流感灭活疫苗以及其他基因工程疫苗的免疫原基因的应用。