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[发明专利]一种可调控基因表达的人类胚胎干细胞系及其应用-CN201810036648.2在审
发明人：荣知立;林瑛;马淑凤 -专利权人：南方医科大学
申请日： 2018-01-15 - 公布日： 2018-09-21 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种可调控基因表达的人类胚胎干细胞系及其应用。本发明可调控基因表达的人类胚胎干细胞系包含可控表达外源性融合蛋白系统和至少一种向导RNA，所述可控表达外源性融合蛋白系统包括四环素诱导表达系统和以Cas9蛋白和具有转录激活活性的p300核心结构域构成的融合蛋白本发明可实时控制Cas9‑p300在人类胚胎干细胞中表达，实现在人类胚胎干细胞分化的不同阶段特定基因激活和切割双功能，大大的扩展了人类胚胎干细胞在医学和生命科学领域中的应用。
人类胚胎干细胞系人类胚胎干细胞可调控基因融合蛋白外源性可控四环素诱导表达系统应用生命科学领域转录激活活性核心结构域基因组区域靶向基因基因激活启动子区实时控制长序列短序列双功能切割蛋白分化医学

[发明专利]具有X染色体上纯合雄激素位点的人胚胎干细胞系-CN200910036513.7无效
发明人：孙筱放 -专利权人：广州医学院
申请日： 2009-01-09 - 公布日： 2010-07-14 - 主分类号： C12N5/08 文献下载
摘要：本发明涉及一种具有X染色体上纯合雄激素位点的人胚胎干细胞系，其特征在于：所述胚胎干细胞系的平均群体倍增时间为约32小时；所述胚胎干细胞系的未分化克隆AKP检测为强阳性，具有较高的碱性磷酸酶活性；所述胚胎干细胞系能表达特异性表面抗原SSEA-3、SSEA-4、TRA-1-60和TRA-1-81，不表达表面抗原SSEA-1；所述胚胎干细胞系能表达Oct-4转录因子，保持未分化特性；所述胚胎干细胞系每隔10代进行一次核型分析，具有正常核型；所述胚胎干细胞系具有两条X染色体，X染色体失活分析显示其X染色体上雄激素位点为纯合性；所述胚胎干细胞系具有独特的短串联重复序列。
具有染色体上纯合雄激素胚胎细胞系

[发明专利]克隆人自体基因的胚胎干细胞定向诱导成体细胞分化-CN200410090893.X无效
发明人：李建远;王海燕;刘雪霞;王延伟;刘运祥 -专利权人：李建远;王海燕;刘雪霞
申请日： 2004-11-17 - 公布日： 2006-05-31 - 主分类号： C12N5/08 文献下载
摘要：克隆人自体基因的胚胎干细胞定向诱导成体细胞分化技术涉及采用体细胞核移植技术克隆人自体基因的胚胎，建立胚胎干细胞系和体外定向诱导人成体细胞分化技术。解决人类细胞、组织和器官移植所面临的供体严重缺乏和排斥反应两大难题。采用核移植克隆技术将人体细胞的细胞核转移到健康人或动物的去核卵母细胞中，经融合激活后，培养发育至囊胚。取囊胚内细胞团，可得到与供者同基因的胚胎干细胞。建立胚胎干细胞系，大量扩增的胚胎干细胞在一定条件下可定向诱导分化为人体所需要的，具有相同组织特异性的神经细胞、造血干细胞、成骨细胞、胰岛细胞和心肌细胞等成体细胞，临床移植不会产生移植排斥反应。另外，胚胎干细胞系可用于基因治疗等多种类型研究。
克隆基因胚胎干细胞定向诱导成体细胞分化

[发明专利]小鼠胚胎干细胞培养液及诱导培养两种不同类型的胚胎干细胞系和类囊胚的方法-CN202211681745.X在审
发明人：吴宝江;包斯琴;杨志青;李喜和 -专利权人：内蒙古大学
申请日： 2022-12-26 - 公布日： 2023-04-18 - 主分类号： C12N5/0735 文献下载
摘要：本发明公开了一种小鼠胚胎干细胞培养液、胚胎干细胞体外诱导培养方法、以及利用该培养液和培养方法，首次从3‑4天的小鼠囊胚建立两种不同类型胚胎干细胞系，进一步利用这两种类型的干细胞系，体外诱导获得类囊胚结构这种来源于同一个囊胚的两种细胞系聚合获得的类囊胚排除了不同个体细胞之间的免疫排斥反应，为人类干细胞的临床应用和药物筛选提供理论依据和技术支撑。该方法制备的小鼠两种不同类型的胚胎干细胞和类囊胚能用于基因编辑、动物克隆、医学模型和药物筛选研究等领域。
小鼠胚胎干细胞培养液诱导培养不同类型细胞系囊胚方法

[发明专利]具有非随机失活状态X染色体及特定短串联重复序列的人胚胎干细胞系-CN200810026660.1无效
发明人：孙筱放 -专利权人：广州医学院
申请日： 2008-03-07 - 公布日： 2009-09-09 - 主分类号： C12N5/08 文献下载
摘要：本发明涉及一种具有非随机失活状态X染色体及特定短串联重复序列的人胚胎干细胞系，其特征在于：所述胚胎干细胞系的平均群体倍增时间为约32小时；所述胚胎干细胞系的未分化克隆AKP检测为强阳性，具有较高的碱性磷酸酶活性；所述胚胎干细胞系能表达特异性表面抗原SSEA-3、SSEA-4、TRA-1-60和TRA-1-81，不表达表面抗原SSEA-1；所述胚胎干细胞系能表达Oct-4转录因子，保持未分化特性；所述胚胎干细胞系每隔10代进行一次核型分析，具有正常核型，或者为易位型13三体；所述胚胎干细胞系具有两条X染色体，X染色体失活分析显示其存在非随机失活特性；所述胚胎干细胞系具有独特的短串联重复序列。
具有随机状态染色体特定串联重复序列胚胎细胞系

[发明专利]降低细胞免疫原性的诱导型多能干细胞系及建立方法-CN201910020816.3在审
发明人：陈思锋;王小凯;陆萌 -专利权人：复旦大学
申请日： 2019-01-09 - 公布日： 2020-07-17 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：本发明属干细胞再生医学与转化医学领域，涉及降低细胞免疫原性的诱导型多能干细胞系及其方法。本发明通过人体细胞重编程方法获得敲除β2m基因的人类诱导性多能干细胞系(hiPSCs‑β2M‑/‑)系，和敲除CⅡTA基因的人类诱导性多能干细胞系(hiPSCs‑CⅡTA‑/‑)系，以及同时敲除β2m基因及CⅡTA基因的人类诱导性多能干细胞系(hiPSCs‑β2M‑/‑CⅡTA‑/‑)系；本细胞系为人源性细胞，与人胚胎干细胞有相似的生物学特性，敲除相关免疫基因后可以显著降低人类诱导性多能干细胞的免疫原性；摆脱了围绕人类胚胎干细胞使用问题的政治和伦理争论，为干细胞移植治疗心血管疾病提供了新的思路和方法。
降低细胞免疫原性诱导多能细胞系建立方法

[发明专利]人胚胎干细胞及其培养方法-CN200510026010.3无效
发明人：金颖;孙博文 -专利权人：中国科学院上海生命科学研究院
申请日： 2005-05-20 - 公布日： 2006-11-22 - 主分类号： C12N5/08 文献下载
摘要：本发明提供了一种在体外获得人胚胎干细胞系的方法。本发明还提供了用该方法获得的人胚胎干细胞系，尤其是人胚胎干细胞系SH－HES1，其保藏号为CCTCC－C200503。
胚胎干细胞及其培养方法

[发明专利]衍生自人类多能干细胞的神经干细胞系的生成-CN202080049043.2在审
发明人： J·C·维拉埃斯库萨·拉米雷斯;U·多恩;C·V·贝特尔森 -专利权人：诺和诺德股份有限公司
申请日： 2020-07-01 - 公布日： 2022-03-11 - 主分类号： C12N5/0797 文献下载
摘要：本发明总体上涉及干细胞领域，更具体地涉及高纯度神经干细胞群体、用于获得此类高纯度干细胞衍生的神经干细胞系，如衍生自多能干细胞如人类胚胎干细胞的神经干细胞系的方法。此外，本发明涉及此类高纯度神经干细胞系用作用于治疗神经变性疾病的药物的用途。
衍生人类多能干细胞神经细胞系生成

[发明专利]一种利用人体废弃胚胎建立人胚胎干细胞系的方法-CN201210221563.4无效
发明人：孙莹璞;王芳;孔慧娟;李婧;戴善军;辛志敏;金海霞;宋文妍;姚桂东 -专利权人：郑州大学第一附属医院
申请日： 2012-06-30 - 公布日： 2012-10-03 - 主分类号： C12N5/0735 文献下载
摘要：本发明涉及一种利用人废弃胚胎建立人胚胎干细胞系的方法，可有效解决现有人胚胎干细胞的建立方法操作复杂，需要大量的胚胎，成本高，成功率低，人胚胎干细胞系远不能满足应用的需要的问题。解决的技术方案是，收集并培养废弃胚胎，分别制备小鼠胚胎成纤维细胞和小儿包皮成纤维细胞，按照0.55~0.65×105个/cm2的密度，混合上述细胞制备成混合饲养层，采用机械法分离废弃胚胎的内细胞团，将分离的内细胞团置于混合饲养层上培养，建立人胚胎干细胞系。本发明操作简单，可以有效利用临床上大量废弃的新鲜及冷冻胚胎，并利用最佳铺皿密度，节约了饲养层细胞，大大降低了建立胚胎干细胞系的成本，为将来开发利用胚胎干细胞奠定了基础。
一种利用人体废弃胚胎建立细胞系方法

[发明专利]一种由人胚胎干细胞诱导分化为NK细胞的方法-CN202210413019.3有效
发明人：刘明录;金海锋;强邦明;王立新;张传鹏;冯建海;韩庆梅;许淼 -专利权人：山东兴瑞生物科技有限公司
申请日： 2022-04-20 - 公布日： 2022-07-12 - 主分类号： C12N5/0783 文献下载
摘要：本发明涉及一种由人胚胎干细胞诱导分化为NK细胞的方法，属于遗传工程技术领域；所述方法包括人胚胎干细胞的复苏与传代、诱导得到中胚层细胞、诱导得到CD34+造血干细胞、分离纯化CD34+造血干细胞、诱导得到NK细胞、扩增培养；所述人胚胎干细胞为人胚胎干细胞系H9；所述人胚胎干细胞的复苏与传代，将人胚胎干细胞复苏后进行传代，传至第2代，细胞汇合度为80%以上时，用于诱导得到中胚层细胞；本发明采用人胚胎干细胞诱导分化得到NK细胞，在效靶比为20:1时，对HELA肿瘤细胞系的杀伤率为94.25%，对LOVO肿瘤细胞系的杀伤率为91.24%
一种胚胎干细胞诱导化为 nk 细胞方法

[发明专利]一种AAVS1:Brainbow敲入的人胚胎干细胞系及其构建方法与应用-CN202211324850.8在审
发明人：刘军;郑雯;钟亚丹;杨斌 -专利权人：南方医科大学皮肤病医院（广东省皮肤病医院、广东省皮肤性病防治中心、中国麻风防治研究中心）
申请日： 2022-10-27 - 公布日： 2023-05-05 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：本发明公开了一种AAVS1:Brainbow敲入的人胚胎干细胞系及其构建方法与应用，步骤包括：构建sgRNA表达质粒、打靶Donor载体，将sgRNA质粒、Cas9质粒和打靶Doner载体共同电转H9人胚胎干细胞系，镜下观察并挑选并验证，得到AAVS1:Brainbow敲入的人胚胎干细胞系。本发明优点包括：结合CreERT2/Loxp技术可以在该细胞系上对特定的细胞群进行标记，并在人胚胎干细胞3D培养分化过程中实现对单细胞的谱系追踪，用于在类器官水平研究胚胎干细胞到成体细胞分化和发育过程。
一种 aavs1 brainbow 胚胎细胞系及其构建方法应用

[发明专利]一种胚胎干细胞和肿瘤细胞的杂合细胞系及其构建方法-CN200810202863.1有效
发明人：王欣;姚嘉宜 -专利权人：中国科学院上海生命科学研究院
申请日： 2008-11-18 - 公布日： 2010-06-30 - 主分类号： C12N5/16 文献下载
摘要：本发明提供了一种胚胎干细胞和肿瘤细胞的杂合细胞系，以及该细胞系的构建方法和应用。本发明提供的胚胎干细胞和肿瘤细胞的杂合细胞系通过胚胎干细胞和肿瘤细胞融合获得，其构建方法包括以下步骤：A)分别构建胚胎干细胞和肿瘤细胞的单克隆细胞株；B)胚胎干细胞和肿瘤细胞的单克隆细胞株融合。本发明提供的细胞系可用于构建肿瘤细胞模型。本发明提供的杂合细胞，为进一步研究肿瘤的发生和恶化提供了一种全新的模型，使用本发明提供的方法，可以构建新的杂合细胞模型，从而从全新的角度研究肿瘤表观遗传学，对未来的临床治疗提供理论和应用基础，将会全面推动肿瘤的基础研究
一种胚胎干细胞肿瘤细胞细胞系及其构建方法

[发明专利]一种获得孤雌胚胎干细胞系的方法-CN201010266776.X无效
发明人：卢光琇;林戈;欧阳琦 -专利权人：湖南光琇高新生命科技有限公司
申请日： 2010-08-31 - 公布日： 2010-12-15 - 主分类号： C12N5/0735 文献下载
摘要：本发明涉及一种获得孤雌胚胎干细胞系的方法。该细胞系从IVF废弃的1PN胚胎中分离得到，通过SNP芯片分析发现其基因组99％以上的区域表现为纯合状态，而DNA指纹则证明其遗传物质完全来源于母方，无父方基因组的参与。本发明证明了IVF过程中废弃的1PN胚胎是分离纯合型孤雌胚胎干细胞系的一种来源，由此得到的纯合型孤雌胚胎干细胞系遗传背景简单，HLA位点纯合，不仅能够满足供卵者，而且能够满足更多HLA分型相同人群的器官移植要求，是细胞替代治疗的重要种子细胞来源。此外，该孤雌胚胎干细胞系还是研究单性生殖发育以及印记基因作用的良好工具。
一种获得胚胎细胞系方法

[发明专利]用于产生病毒疫苗的源自鸭胚胎的干细胞系-CN200880013257.3有效
发明人： F·格埃纳克;K·莫罗;M·埃斯诺;M·梅赫泰利 -专利权人：维涡里斯公司
申请日： 2008-04-23 - 公布日： 2010-03-10 - 主分类号： A61K39/145 文献下载
摘要：特别地，本发明涉及病毒载体和疫苗的工业生产的领域，更特别地涉及禽胚胎干细胞，优选为源自鸭胚胎干细胞的EBx细胞系在生产病毒载体和病毒之中的用途。本发明特别用于防止人类和动物病毒感染的病毒疫苗的工业生产。
用于产生病毒疫苗源自胚胎细胞系

[发明专利]一种重组细胞系、其制备方法和应用-CN201410570904.8有效
发明人：王金勇;陈晓梨;耿阳;赵乾浩;黄可 -专利权人：中国科学院广州生物医药与健康研究院
申请日： 2014-10-23 - 公布日： 2015-03-25 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：本发明属于生物技术领域，公开了一种重组细胞系、其制备方法和应用。本发明提供的重组细胞系OP9-lhx2为在骨髓基质细胞OP9中导入表达Lhx2的基因，实现过表达Lhx2，该细胞系为诱导多能干细胞和/或胚胎干细胞定向分化为血液细胞提供了必要的微环境，成功诱导多能干细胞和/或胚胎干细胞分化为血液细胞，显著提高了诱导效率，为诱导多能干细胞和/或胚胎干细胞定向血液细胞分化提供了新的方法。
一种重组细胞系制备方法应用

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