一个能在真菌中产生黄酮类化合物的NRPS‑PKS杂合蛋白及其编码基因与应用,本发明涉及一种NRPS‑PKS杂合蛋白、载体、重组菌及其蛋白和黄酮类化合物的制备方法。该NRPS‑PKS杂合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。该NRPS‑PKS杂合蛋白在异源表达时可以产生黄酮类化合物柚皮素查尔酮和柚皮素。
本发明涉及一种分离玻璃酸钠与杂合硫酸软骨素的方法,包括如下步骤:(1)上样:将玻璃酸钠原料溶解于水,得到样品溶液;将样品溶液上样至Q‑Sepharose fast flow阴离子交换柱中;(2)梯度洗脱:依次用0.4M、0.6M和1.0M的NaCl水溶液进行梯度洗脱,收集0.4M NaCl水溶液的洗脱液,为含有玻璃酸钠的溶液;收集1.0M NaCl水溶液的洗脱液,为含有杂合硫酸软骨素的溶液。本发明实现了一次性去除多个杂合硫酸软骨素杂质并与玻璃酸钠有效分离的目的,所分离出的杂合硫酸软骨素纯度达99.5wt%以上,同时玻璃酸钠得到高效纯化,纯度达99.5wt%以上。