[发明专利]一种基于CRISPR/Cas9技术敲除miRNA-125a的小鼠模型及构建方法在审
申请号: | 202110252352.6 | 申请日: | 2021-03-08 |
公开(公告)号: | CN112997965A | 公开(公告)日: | 2021-06-22 |
发明(设计)人: | 王瑚;夏红飞;马旭;管纯一;张璐 | 申请(专利权)人: | 国家卫生健康委科学技术研究所 |
主分类号: | A01K67/027 | 分类号: | A01K67/027;C12N15/89;C12N9/22;C12N15/113;C12Q1/6888 |
代理公司: | 北京预立生科知识产权代理有限公司 11736 | 代理人: | 高倩倩;李红伟 |
地址: | 100081 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明公开了一种基于CRISPR/Cas9技术敲除miRNA‑125a的小鼠模型及构建方法,本发明利用CRISPR/Cas9技术,在C57BL/6J小鼠中实现pre‑miRNA‑125a的基因组片段敲除。在小鼠基因组中设计一对用于片段敲除的sgRNA,在体外将两条sgRNA转录,与Cas9核酸酶共注射C57BL/6J小鼠受精卵,移入母体内发育成为原代(F0)小鼠;F0小鼠经鉴定与纯化后获得片段敲除的纯合个体。在纯合敲除小鼠中miRNA‑125a表达量显著降低。本发明提供了一种精确、高效、简便敲除miRNA‑125a的办法,可用于miRNA‑125a功能研究的小鼠模型,对实现其它miRNAs的片段敲除亦有参考价值。 | ||
搜索关键词: | 一种 基于 crispr cas9 技术 mirna 125 小鼠 模型 构建 方法 | ||
【主权项】:
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