[发明专利]CRISPR/Cas9双靶点靶向敲除目的基因载体构建方法在审
| 申请号： | 202010323098.X | 申请日： | 2020-04-22 |
| 公开（公告）号： | CN111471712A | 公开（公告）日： | 2020-07-31 |
| 发明（设计）人： | 张梦娇;袁奕;唐林香;李昂;何胜祥 | 申请（专利权）人： | 江苏同科医药科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;C12N15/65;C12N15/90 |
| 代理公司： | 上海精晟知识产权代理有限公司 31253 | 代理人： | 辇甲武 |
| 地址： | 215000 江苏省苏州市苏州工*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | CRISPR/Cas9双靶点靶向敲除目的基因载体构建方法，包括以下步骤：通过以pLenti CRISPR‑E载体为基础，通过在线设计工具选择得分较高的靶位点设计引物，通过退火产生双链DNA，再经过连接转化将其构建到pLenti CRISPR‑E载体上，将载体转入受体细胞后，提取细胞DNA测序验证挑选出敲除效率较高的两个靶位点。本发明以pLenti CRISPR‑E载体为骨架，利用同源重组酶的原理，快速构建针对目标基因的双靶点CRISPR表达载体模型，本发明设计的双靶点CRISPR载体系统，可以应用于改造CRISPR单靶点的载体，从而提高打靶效率，实现多基因敲除，有很好的实用价值。 | ||
| 搜索关键词： | crispr cas9 双靶点 靶向 目的 基因 载体 构建 方法 | ||
【主权项】：
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