[发明专利]一种沙门菌菌蜕疫苗的制备方法及应用在审

专利信息
申请号: 202011478059.3 申请日: 2020-12-15
公开(公告)号: CN112587659A 公开(公告)日: 2021-04-02
发明(设计)人: 马喆;左庚亮 申请(专利权)人: 南京农业大学
主分类号: A61K39/112 分类号: A61K39/112;A61K47/42;A61P31/04;C12N1/21;G01N33/68;G01N33/569;C12R1/42
代理公司: 上海创开专利代理事务所(普通合伙) 31374 代理人: 吴海燕
地址: 210095 *** 国省代码: 江苏;32
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摘要: 发明公开了一种沙门菌菌蜕疫苗的制备方法及应用,利用λ‑Red系统制备获得鸡白痢沙门菌pagC基因缺失突变株ΔPagC;取过夜培养的ΔPagC菌液,1:100接种到50ml液体LB培养基中,37℃、180rpm振荡培养至OD值约0.8;4℃,5000rpm离心10min后用无菌的PBS缓冲液洗涤3次,然后用终浓度为50μM的MAP溶液重悬菌体至OD值为0.3,21℃恒温静置16h,4℃、5000rpm离心10min收集菌体,进行灭菌效果检测和核酸残留检测;检测合格后调整剂;与佐剂1:1混合,充分乳化后接种动物。本发明疫苗株接种小鼠后无不良反应,可保护小鼠应对鸡白痢沙门菌CVCC1800、肠炎沙门菌ATCC19585和鼠伤寒沙门菌CVCC542的感染;该疫苗能够能与基于PagC蛋白的沙门菌抗体间接ELISA检测试剂盒联用,实现沙门菌人工免疫和自然感染的鉴别诊断,表现出良好的DIVA特性。
搜索关键词: 一种 沙门 菌菌蜕 疫苗 制备 方法 应用
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