[发明专利]CRISPR Cas9条件性基因敲除鼠、建立方法在审
| 申请号： | 202010830374.1 | 申请日： | 2020-08-18 |
| 公开（公告）号： | CN111961685A | 公开（公告）日： | 2020-11-20 |
| 发明（设计）人： | 马广强;牛玲;韩飞;艾志福;黄小英;杨明 | 申请（专利权）人： | 江西中医药大学 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;C12N15/89;A01K67/027 |
| 代理公司： | 重庆市信立达专利代理事务所(普通合伙) 50230 | 代理人： | 陈炳萍 |
| 地址： | 330004 江西*** | 国省代码： | 江西;36 |
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| 摘要： | 本发明属于基因敲除技术领域，公开了一种CRISPR Cas9条件性基因敲除鼠、建立方法，通过载体设计和构建，及gRNA和Cas9蛋白的制备；设计gRNA序列和打靶载体；利用In‑Fusion技术构建打靶载体，通过酶切、PCR及测序对打靶载体进行验证；同时制备gRNA和Cas9蛋白；显微注射及F0鼠鉴定；将得到的Donor载体、gRNA和Cas9蛋白共注射到受精卵；将显微注射后的受精卵送回到代孕鼠输卵管中；鼠出生后进行PCR和测序鉴定，获得阳性F0鼠；F1代鼠的繁殖和鉴定；将性成熟的阳性F0鼠分别与野生型鼠配繁一代，成果获得了多囊肾基因PKD1基因敲除小鼠。 | ||
| 搜索关键词： | crispr cas9 条件 基因 建立 方法 | ||
【主权项】：
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