[发明专利]一种真核工程菌株及其制备方法和应用在审
| 申请号： | 201910911559.2 | 申请日： | 2019-09-25 |
| 公开（公告）号： | CN110656055A | 公开（公告）日： | 2020-01-07 |
| 发明（设计）人： | 万霞;陈文超;黄凤洪;邓乾春;朱航志;蒋珊 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院油料作物研究所 |
| 主分类号： | C12N1/19 | 分类号： | C12N1/19;C12N15/54;C12N9/10;C12N15/81;C12P7/62;C12R1/645 |
| 代理公司： | 11138 北京三高永信知识产权代理有限责任公司 | 代理人： | 吕耀萍 |
| 地址： | 430062 湖*** | 国省代码： | 湖北;42 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明公开了一种真核工程菌株及其制备方法和应用，属于生物技术领域。所述真核工程菌株表达的蛋白为甘油二酯乙酰化转移酶，所述甘油二酯乙酰化转移酶的氨基酸序列表中SEQ ID NO:1所示。本发明提供了一种真核工程菌株及其制备方法和应用，该真核工程菌株能够大量合成乙酰化甘油三酯，可以通该真核工程菌株实现乙酰化甘油三酯的大规模生产，本发明实施例提供的制备方法能够获得大量的真核工程菌株，为乙酰化甘油三酯进行大规模生产提供基础，该应用包括将该真核工程菌株用于合成乙酰化甘油三酯。 | ||
| 搜索关键词： | 核工程 菌株 乙酰化 甘油三酯 制备方法和应用 甘油二酯 转移酶 合成 生物技术领域 氨基酸序列 制备 蛋白 应用 | ||
【主权项】：
1.一种真核工程菌株，其特征在于，所述真核工程菌株表达的蛋白为甘油二酯乙酰化转移酶，所述甘油二酯乙酰化转移酶的氨基酸序列表中SEQ ID NO:1所示。/n
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于中国农业科学院油料作物研究所，未经中国农业科学院油料作物研究所许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201910911559.2/，转载请声明来源钻瓜专利网。
- 同类专利
- 一株在酸性条件下发酵速度提高的高产普鲁兰酶的重组巴斯德毕赤酵母突变体-201710825655.6
- 德青美朵;朱新文;解修兵;毛岸;沈微;陈献忠;樊游 - 江南大学
- 2017-09-14 - 2020-02-14 - C12N1/19
- 一株在酸性条件下发酵速度提高的高产普鲁兰酶的重组巴斯德毕赤酵母突变体，属于微生物、酶工程技术领域。本发明获得了一种密码子优化的普鲁兰酶编码基因，并构建了一株高表达上述基因的重组菌巴斯德毕赤酵母GS115/pPICK‑BdP5 W133。通过对上述重组菌的诱变筛选到一株在pH4.0条件下发酵水平提高的突变株WB138。该突变株在pH4.0条件下，在5 L发酵罐上发酵时间缩短24h，发酵酶活一般可以达到1100 U/mL以上。该菌株在普鲁兰酶发酵生产中有减少发酵过程染菌损失的可能。
- 一种毕赤酵母突变菌株及其应用-201810775078.9
- 徐晓东;赵凯;黄亦钧 - 青岛蔚蓝生物集团有限公司
- 2018-07-16 - 2020-01-24 - C12N1/19
- 本发明属于基因工程技术领域，具体提供了一种毕赤酵母突变菌株及其应用。所述毕赤酵母的保藏编号为CCTCC NO:M2018374。所述毕赤酵母突变菌株能高效重组表达木聚糖酶，其发酵液的木聚糖酶酶活高达6744U/mL，比突变前提高了79%，且突变后重组表达的木聚糖酶的酶学性质并未因突变发生变化，最适作用pH均为2.5‑6，最适作用温度均为80℃。所述毕赤酵母突变菌株重组表达的木聚糖酶具有很高的酶活性，可广泛应用于低聚木糖生产领域。
- 一种毕赤酵母菌株及其在木聚糖酶生产中的应用-201810775085.9
- 徐晓东;赵凯;黄亦钧 - 青岛蔚蓝生物集团有限公司
- 2018-07-16 - 2020-01-24 - C12N1/19
- 本发明属于基因工程技术领域，具体提供了一种毕赤酵母突变菌株及其在木聚糖酶生产中的应用。所述毕赤酵母的保藏编号为CCTCC NO:M2018375。所述毕赤酵母突变菌株能高效重组表达木聚糖酶，其摇瓶发酵上清液中木聚糖酶酶活高达146 U/ml，比出发菌提高了67.8%；20L罐发酵上清液中木聚糖酶酶活高达813 U/mL，比出发菌提高了62%，取得了意料不到的技术效果。
- 一株利用木糖高效发酵乙醇的转基因工程酿酒酵母SF4-201611019716.1
- 彭良才;郝勃;夏涛;涂媛媛;王艳婷;涂芬;熊科;魏小洋 - 华中农业大学
- 2016-11-18 - 2020-01-24 - C12N1/19
- 本发明公开了一株利用木糖高效发酵乙醇的转基因工程酿酒酵母SF4，涉及酿酒酵母技术领域。酿酒酵母SF4是通过寡肽链[‑(G4S1)3‑]链接的2个木糖利用酶即木糖还原酶XYL1和木糖醇氧化酶XYL2构成的融合蛋白基因；XYL1的基因序列如SEQ ID NO：1，XYL2的基因序列如SEQ ID NO：2，融合蛋白的基因序列如SEQ ID NO：3。将转基因工程酿酒酵母SF4应用于秸秆水解产物的乙醇发酵中。本发明的SF4菌株生长量比对照提高1.5倍；葡萄糖和木糖共发酵的发酵时，SF4菌株木糖利用率达到53.8%；芒草材料水解液的乙醇发酵中，乙醇产量菌株SF4提高4.5倍左右。
- 降低发酵饮料中的H-201610563151.7
- L·F·比森;A·林德霍姆;K·L·迪策尔 - 加利福尼亚大学董事会
- 2008-03-13 - 2020-01-21 - C12N1/19
- 本发明提供降低发酵饮料中的H
- 一种利用毕赤酵母高效分泌表达转肽酶Sortase A的方法-201610308645.0
- 吴志猛;赵鑫锐;洪皓飞;邓涛 - 江南大学
- 2016-05-11 - 2020-01-21 - C12N1/19
- 本发明公开了一种利用毕赤酵母高效分泌表达转肽酶Sortase A的方法，属于基因工程领域。本发明成功实现了Sortase A在毕赤酵母中的高效分泌表达，解决了目前已有报道中该酶在大肠杆菌胞内表达中存在的产率较低、菌体需要破壁和菌株不稳定的问题。经过表达策略的筛选和发酵条件优化，胞外Sortase A的酶活和浓度分别可达131.9U/mL和97.8mg/L。本发明通过实现Sortase A的高效分泌表达，为该酶的工业化生产及其在蛋白质工程领域的应用打下了基础。
- 一种联用双抗生素进行毕赤酵母转化子维持培养的方法-201910984571.6
- 王婷;屈冠雯;王楚;冯章启 - 东南大学
- 2019-10-16 - 2020-01-17 - C12N1/19
- 本发明涉及一种联用双抗生素进行毕赤酵母转化子维持培养的方法，主要材料为氨苄西林和遗传霉素分别以20~100μg/mL及200~1000μg/mL的浓度加入毕赤酵母培养基中；该方法简单易行，价格低廉，且能够明显抑制非转化子的活力，有利于毕赤酵母转化子生长，可用于毕赤酵母转化子在不同培养基上的固体及液体培养。
- 一种真核工程菌株及其制备方法和应用-201910911559.2
- 万霞;陈文超;黄凤洪;邓乾春;朱航志;蒋珊 - 中国农业科学院油料作物研究所
- 2019-09-25 - 2020-01-07 - C12N1/19
- 本发明公开了一种真核工程菌株及其制备方法和应用，属于生物技术领域。所述真核工程菌株表达的蛋白为甘油二酯乙酰化转移酶，所述甘油二酯乙酰化转移酶的氨基酸序列表中SEQ ID NO:1所示。本发明提供了一种真核工程菌株及其制备方法和应用，该真核工程菌株能够大量合成乙酰化甘油三酯，可以通该真核工程菌株实现乙酰化甘油三酯的大规模生产，本发明实施例提供的制备方法能够获得大量的真核工程菌株，为乙酰化甘油三酯进行大规模生产提供基础，该应用包括将该真核工程菌株用于合成乙酰化甘油三酯。
- 毕赤酵母菌及其发酵的角蛋白酶、角蛋白酶的应用-201910924037.6
- 彭楠;常章兵;田建平;梁运祥 - 华中农业大学;四川润格生物科技有限公司
- 2019-09-27 - 2020-01-03 - C12N1/19
- 本发明公开了一种毕赤酵母菌，其分类命名为巴斯德毕赤酵母菌AN‑PK‑9K‑GS115，保藏号为CCTCC NO：M 2019593，保藏日期为2019年7月30日，保藏单位为中国典型培养物保藏中心，保藏地址为中国.武汉.武汉大学。同时，还公开了该菌的选育方法、由该菌发酵产生的羽毛粉角蛋白酶，以及羽毛粉角蛋白酶的应用，通过选育获得能够高效生产羽毛粉角蛋白酶的毕赤酵母重组菌，并且实现在温和条件下，分解不同种的动物羽毛，使羽毛粉中蛋白被分解成小分子的肽或氨基酸，利于羽毛蛋白饲料的高效吸收利用。
- 一种菌株、其制备方法及应用，以及该菌株的发酵方法-201511000505.9
- 元英进;刘高冈;李炳志 - 天津大学
- 2015-12-25 - 2019-12-31 - C12N1/19
- 本发明涉及微生物领域，特别涉及一种菌株、其制备方法及应用，以及该菌株的发酵方法。本发明在重组木糖利用酿酒酵母菌株中用多拷贝游离型质粒pRS425K以启动子过表达酿酒酵母内源基因ZWF1，得到能够提高木糖、葡萄糖同步共利用中木糖比例的重组酿酒酵母菌株。本发明分子操作简单，无需通过长期的进化过程，就可以初步实现木糖、葡萄糖的同步共利用。
- 一株高效壳聚糖酶产生菌及其发酵方法-201510906780.0
- 苏海榆;孙杉杉;徐志文 - 领先生物农业股份有限公司
- 2015-12-10 - 2019-12-27 - C12N1/19
- 本发明涉及一株高效壳聚糖酶产生菌及其发酵方法。本发明通过基因工程克隆‑构建‑重组获得了一株产壳聚糖酶的基因工程菌巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115‑LX菌株，由该菌株按照本发明的发酵培养方法进行发酵培养获得的发酵液壳聚糖酶酶活可达500～1000U/ml，酶活性很高，无需提纯，可直接用于壳聚糖的降解。在壳寡糖的工业化生产领域具有广阔的应用前景。
- 一种工程菌及其构建方法与在制备藏红花酸中的应用-201610382407.4
- 肖文海;梅雪昂;陈艳;王颖;元英进 - 天津大学
- 2016-06-01 - 2019-12-27 - C12N1/19
- 本发明涉及基因工程领域，尤其涉及一种工程菌及其构建方法与在制备藏红花酸中的应用。本发明提供的工程菌中过表达CrtZ基因和CCD基因。相对于现有技术中的通过组织培养等方法进行藏红花酸的生物合成具有更为环保、成本低廉的优势，为藏红花酸的生产提供了一种可行的方法。且本发明提供的工程菌产藏红花酸的效率较高，发酵108h，藏红花酸的浓度可达1.17mg/L。
- 产甘草次酸的重组酿酒酵母、其构建方法以及用途-201611232871.1
- 陈士林;王彩霞;孙伟;苏新尧;张梦婷;孙梦楚 - 中国中医科学院中药研究所
- 2016-12-28 - 2019-12-27 - C12N1/19
- 本发明涉及产甘草次酸的重组酿酒酵母、其构建方法以及用途。具体地，本发明涉及保藏编号为CGMCC13126的产甘草次酸的重组酿酒酵母、其构建方法以及其在生产甘草次酸中的用途。
- 德氏有孢圆酵母的植酸酶基因多位点突变株及其应用-201510066140.3
- 马忠友;邢素芝;汪建飞;赵建荣;王德生;骆云飞 - 安徽科技学院
- 2015-02-09 - 2019-12-20 - C12N1/19
- 本发明公开了一株德氏有孢圆酵母的植酸酶基因多位点突变株及其应用，涉及生物技术领域。本发明采用紫外线诱变酵母菌对植酸酶基因进行突变，得到有三个氨基酸位点发生了突变的高活性植酸酶基因突变株，在整个酸性环境中都具有极高的植酸水解活性，达到了在胃环境中pH条件下能较好水解植酸的要求。该菌株可用于生产饲用、食用植酸酶，还可以用于生产微生物磷肥和（或）生物有机磷肥，保藏号为：CGMCC No.8738。突变后的植酸酶基因序列可以被克隆到原核和（或）真核生物基因表达载体上，通过基因工程技术构建基因工程菌株和（或）转基因植物，以高效表达植酸酶基因生产植酸酶。
- 一种高产虾青素红酵母工程菌及其构建方法-201510388597.6
- 王士安;李福利 - 中国科学院青岛生物能源与过程研究所
- 2015-07-06 - 2019-12-20 - C12N1/19
- 本发明涉及一种高产虾青素的红酵母工程菌及其构建方法，属于生物技术领域。红酵母工程菌为红发夫酵母菌株SXD，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No.10519，保藏日期为2015年2月4日。本发明通过代谢工程方法获得红发夫酵母工程菌株SXD，显著提高了红发夫酵母虾青素合成途径的代谢通量。所获得的红发夫酵母工程菌株SXD的最高虾青素含量为4.4mg/g细胞干重，经优化培养，该菌株的虾青素含量达到7.1mg/g细胞干重，最大生物量为83.8g/L，具有工业开发前景。并且，SXD菌株未经任何诱变处理，后续借助诱变育种手段继续提高虾青素产量的空间很大，有望继续降低酵母虾青素生产成本。
- 通过调控脯氨酸代谢途径构建的低产高级醇酿酒酵母菌株-201910653601.5
- 肖冬光;胡智慧;孙中贯;张翠英;陈叶福;杜丽平;郭学武 - 天津科技大学
- 2019-07-19 - 2019-12-10 - C12N1/19
- 本发明属于生物工程技术领域，涉及工业微生物的育种，尤其是一种低产高级醇的酿酒酵母菌株。本发明为了解决酿酒酵母在啤酒生产中合成过多高级醇的问题，通过调控酿酒酵母脯氨酸代谢途径，构建一种低产高级醇的酿酒酵母菌株，能够在保持良好发酵性能的前提下，达到了低产高级醇的效果，为酿造风味良好、口感独特的小麦啤酒奠定了理论基础。
- 通过调控细胞壁组成蛋白构建的低产高级醇酿酒酵母菌株-201910653606.8
- 肖冬光;孙中贯;胡智慧;张翠英;陈叶福;杜丽平;郭学武 - 天津科技大学
- 2019-07-19 - 2019-12-10 - C12N1/19
- 本发明属于生物工程技术领域，涉及工业微生物的育种，尤其是一种通过调控细胞壁组成蛋白合成构建的低产高级醇的酿酒酵母菌株及其应用。本发明为了解决酿酒酵母在啤酒生产中合成过多高级醇的问题，通过调控酿酒酵母细胞壁组成蛋白的合成，构建一种低产高级醇的酿酒酵母菌株，能够在保持良好发酵性能的前提下，达到了低产高级醇的效果，为酿造风味良好、口感独特的小麦啤酒奠定了理论基础。
- 萜烯合酶基因GhTPS14在合成橙花叔醇方面的应用-201910729886.6
- 张永军;刘丹凤;寇俊凤;黄欣蒸;张强;孙佩瑶 - 中国农业科学院植物保护研究所
- 2019-08-08 - 2019-12-10 - C12N1/19
- 本发明涉及代谢工程领域，具体涉及萜烯合酶基因GhTPS14在合成橙花叔醇方面的应用。同时，本发明还进一步提供了一种重组酵母菌，可以高产量、高纯度地一步合成橙花叔醇，在SC‑Trp培养基中实时产生橙花叔醇可达约57.8μg/h/L，为生物合成生产橙花叔醇提供理论与技术支持。
- 用于提高莱鲍迪苷D和莱鲍迪苷M之产生的方法-201910741874.5
- 迈克尔·达尔埃格德·米克尔森;约恩·汉森;埃内斯托·西蒙;费代里科·布里安扎;安格利卡·塞姆莱尔;基姆·奥尔森;西蒙·卡尔森;路易斯·迪林;阿列克谢·乌斯片斯基;保拉·希克斯 - 埃沃尔瓦公司
- 2014-02-06 - 2019-12-10 - C12N1/19
- 本发明涉及用于提高莱鲍迪苷D和莱鲍迪苷M之产生的方法。本发明提供了用于重组产生甜菊醇糖苷的方法和包含甜菊醇糖苷的组合物。
- 生产乙醇的重组酿酒酵母菌株、其构建方法以及利用该菌株生产乙醇的方法-201510617297.0
- 李凡;张子剑;安泰;沈乃东;陈博;李文钊;武国庆;王春才;袁敬伟;李春玲;熊强 - 中粮营养健康研究院有限公司;中粮集团有限公司;中粮生化能源(肇东)有限公司
- 2015-09-24 - 2019-12-06 - C12N1/19
- 本发明提供了一种生产乙醇的重组酿酒酵母菌株、构建该菌株的方法、以及利用该菌株生产乙醇的方法。本发明的生产乙醇的重组酿酒酵母菌株以野生型酿酒酵母菌株为出发菌株，向其中引入XI木糖代谢途径并增强PPP途径中四个关键基因的表达，同时敲除醛糖还原酶基因GRE3以及任选敲除硝基苯磷酸酶基因PHO13，并通过膜定位基团的膜定位作用将外源引入的XI蛋白和XK蛋白定位于酵母细胞膜上。本发明的生产乙醇的重组酿酒酵母菌株能够高效地进行木糖代谢，从而实现C5糖和C6糖的共发酵，并由此实现更高的乙醇转化率。
- 一种酿酒酵母菌、其构建方法及其在发酵制备番茄红素中的应用-201810311320.7
- 张根林;李霞;赵金雨 - 石河子大学
- 2018-04-09 - 2019-12-03 - C12N1/19
- 本发明公开了一种酿酒酵母工程菌的构建方法及其在发酵制备番茄红素中的应用。本发明的有益效果为：1、本发明构建的酿酒酵母工程菌，是将多个基因表达盒通过酵母强大的同源重组系统重组至酵母基因组的不同位点，表达遗传更稳定；2、本发明构建的酿酒酵母工程菌为生产番茄红素提供优化的宿主细胞，并且此菌株强化了类异戊二烯合成途径代谢通量,可以作为生产别的萜类化合物的底盘宿主；3、本发明构建的酿酒酵母工程菌合成番茄红素途径受组成型启动子控制，发酵过程无需添加诱导剂，节约了发酵成本，且发酵操作更加简单。
- 酿酒酵母工程菌的构建及桦木酸的制备方法-201810495048.2
- 訾佳辰;黄嘉键;朱建勋;安天悦 - 暨南大学
- 2018-05-22 - 2019-11-29 - C12N1/19
- 本发明提供了一种酿酒酵母工程菌的构建方法及利用该酿酒酵母工程菌制备桦木酸的方法，所述酿酒酵母工程菌为，在酿酒酵母中导入了羽扇豆醇合成酶基因AtLUPs和细胞色素P450酶编码基因RoCYP‑34445、细胞色素P450还原酶编码基因RoCPR，该基因能够编码桦木酸生物合成途径中的关键酶，构建得到的工程菌采用生物合成的方法制备桦木酸，该方法羽扇豆醇转化为桦木酸的转化率高，产量大，且环境友好。
- 通过改善酵母中NADPH相关的生物合成途径增加人参皂苷的生产-201811374831.X
- 金善昌;李珠映;金材应;张仁升;诸葛钟健 - 智能合成生物中心
- 2018-11-19 - 2019-11-26 - C12N1/19
- 本发明涉及通过改变Ald2、Ald6、Zwf1和Zms1而制备的具有增强的人参皂苷生产能力的酵母，制备该酵母的方法以及使用该酵母生产人参皂苷的方法。
- 一株高乙醇耐受性基因工程菌及其构建方法与应用-201610166254.X
- 应汉杰;郑诚;陈勇 - 南京工业大学
- 2016-03-22 - 2019-11-26 - C12N1/19
- 本发明公开了一株高乙醇耐受性基因工程菌，它是过表达转录调控因子Mig1基因的酿酒酵母菌，所述的Mig1基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1中所示，其氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示，所述的酿酒酵母菌为Saccharomyces cerevisiae S288c。本发明还公开了上述高乙醇耐受性基因工程菌的构建方法及应用。本发明构建的高乙醇耐受性基因工程菌在固定化发酵生产乙醇过程中能耐受15％浓度的乙醇，耗糖速率是原始菌株的1.30倍，提高了生物膜反应器中菌体的乙醇耐受性，适宜工业乙醇生产。
- 一种联产丙酮酸和α-酮戊二酸的重组光滑球拟酵母-201611112770.0
- 周景文;陈坚;罗正山;堵国成;刘松;方芳 - 江南大学
- 2016-12-07 - 2019-11-26 - C12N1/19
- 本发明公开了一种联产丙酮酸和α‑酮戊二酸的重组光滑球拟酵母，属于发酵工程技术领域。通过基因工程技术，将来源于酿酒酵母的CDC19整合到pY26‑TEF‑GPD表达载体上，构建酵母重组表达质粒pY26‑CDC19，并将其电转进受体菌TgU‑中获得一株高产丙酮酸的工程菌株TgU‑(pY26‑CDC19)，相对于对照菌，总酸产量(丙酮酸和α‑酮戊二酸)、总酸转化率和总酸生产强度分别提高了112.2％、115.6％和155.6％，最重要的是重组菌TgU‑(pY26‑CDC19)的α‑酮戊二酸产量从其改造之前的0g/L增加到了30.1g/L。
- 一种细胞表面展示果胶酶的酿酒酵母工程菌、用途和催化剂-201910775737.3
- 周火祥;郭葳;张红梅;彭颖;高峰;林爱琴;杨少龙 - 河南省医药科学研究院
- 2019-08-21 - 2019-11-22 - C12N1/19
- 本发明涉及基因工程技术领域，更具体地，涉及一种一种细胞表面展示果胶酶的酿酒酵母工程菌、用途和催化剂。本发明采用基因重组技术将特定的果胶酶基因克隆连接至酿酒酵母表面展示表达载体pYD1，并转化至酿酒酵母菌株EBY100中，得到产酶活性较游离酶酶活更高的重组菌株。同时，实验表明通过优选特定的果胶酶基因并将该基因表面展示在酿酒酵母细胞表面，可以使该酶分泌性能极大提高、酶学性质明显提升，相比较利用本申请以外的果胶酶基因进行细胞表面展示组合来说，采用本发明的方法展示果胶酶显得更加有优势。
- 一种生产B型禽偏肺病毒F蛋白的重组菌株-201610236309.X
- 刘新文;杜元钊;王秀丽;宋新宇;马爽;李陆梅 - 青岛易邦生物工程有限公司
- 2016-04-14 - 2019-11-22 - C12N1/19
- 本发明提供一种生产B型禽偏肺病毒F蛋白的重组菌株及其应用，本发明提供的生产B型禽偏肺病毒F蛋白的基因工程毕赤酵母菌，其保藏编号为CCTCC M 2016097。本发明构建了带有人工设计改造后的B型禽偏肺病毒F蛋白基因的高效表达载体，获得了在毕赤酵母菌中高效表达B型禽偏肺病毒F蛋白的重组菌株，该表达产物为可溶性蛋白。这为工业化生产B型禽偏肺病毒亚单位疫苗奠定了坚实的基础。
- 专利分类
