[发明专利]脾氨肽口服冻干粉活力快速测定方法在审
| 申请号： | 201910756975.X | 申请日： | 2019-08-16 |
| 公开（公告）号： | CN110616247A | 公开（公告）日： | 2019-12-27 |
| 发明（设计）人： | 秦伟;刘琦;韩树璘;衣学龙 | 申请（专利权）人： | 大连百利天华制药有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/02 | 分类号： | C12Q1/02;G01N21/31 |
| 代理公司： | 21119 大连科技专利代理有限责任公司 | 代理人： | 佟蕊 |
| 地址： | 116000 辽宁*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种脾氨肽口服冻干粉活力快速测定方法，脾氨肽口服冻干粉与健康小鼠脾淋巴细胞共孵时，可将其免疫活性过继给鼠脾淋巴细胞，使之成为致敏淋巴细胞。该致敏淋巴细胞释放出白细胞粘附抑制因子，使白细胞粘附抑制指数增高。因此，可通过测定白细胞粘附抑制指数来检定成品的活力。本法引入MTT（噻唑蓝），是因为MTT可被活细胞线粒体中琥珀酸脱氢酶还原成蓝紫色化合物（Formazan），此还原产物的多少与细胞数在一定范围内成正比，用二甲基亚砜将沉积在细胞中的Fromazan溶解，用酶联检测仪测定490nm波长的A值，将数值代入公式，即可求出粘附抑制指数。该方法简单，检测数据更准确。 | ||
| 搜索关键词： | 白细胞粘附 淋巴细胞 冻干粉 脾氨肽 致敏 鼠脾淋巴细胞 琥珀酸脱氢酶 二甲基亚砜 脾淋巴细胞 还原产物 检测数据 健康小鼠 快速测定 免疫活性 抑制因子 成正比 活细胞 检测仪 蓝紫色 细胞数 线粒体 噻唑蓝 波长 检定 酶联 粘附 沉积 还原 增高 溶解 细胞 释放 引入 | ||
【主权项】：
1.脾氨肽口服冻干粉活力快速测定方法，其特征在于，/n（1）取小鼠3-5只，雌雄均可，雌鼠无孕，体表消毒后放净化工作台内，无菌操作取出脾脏，在灭菌平皿内置于灭菌尼龙网袋中，加适量RPMI-1640液，用灭菌针芯研磨后吸集于灭菌小试管中，将脾细胞悬液缓缓重层于淋巴细胞分离液上面，在水平离心机上于20秒内使离心力达2000r/min，离心20min，吸取淋巴细胞层，用适量1640培养液悬浮，1500r/min，离心5min，如此洗2次，计数淋巴细胞，并用1640培养液调整浓度为3×106/ml-5×106/ml备用；/n（2）样品2mg/ml ：脾氨肽口服冻干粉1支，加1640培养液制成含多肽2mg/ml 溶液；/n（3）取灭菌的96孔细胞培养板，每份样品设至少三个实验孔和三个对照孔，按下表操作：/n
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- 本发明提供一种筛选装置，该筛选装置能够精确且高效地置换用于收纳微细颗粒的容器内的液体，能够提高分离提取精度。筛选装置(1)具备计测片(60)、计测部(14)和解析部(15)，该计测片(60)由透光性材料形成，其形成有收纳了包含微细颗粒的液体的孔；该计测部(14)对收纳于该计测片中的微细颗粒发出的光信息进行计测；该解析部(15)对该光信息进行解析，提取收纳于孔内的微细颗粒的光信息。计测片(60)的固定部件(120)具有：形成于计测片(60)上的液体保持部(129)、用于排出保持于该液体保持部的液体的排出口(121h)、将液体从该排出口排出至外部的流路(121i)、用于将液体导入液体保持部(129)的导入口(121c)、和用于将液体供给至该导入口的流路(121e)。并且，筛选装置(1)具备控制液体保持部(129)的液面高度的液面控制部(200)。
- 一种应用青海弧菌Q67测试磺胺类抗生素生物毒性的方法-201910787048.4
- 梁延鹏;钱丽;莫凌云;覃礼堂;曾鸿鹄;宋晓红 - 桂林理工大学
- 2019-08-25 - 2019-11-22 - C12Q1/02
- 本发明公开了一种应用青海弧菌Q67测试磺胺类抗生素生物毒性的方法。以磺胺类抗生素为研究对象，以青海弧菌Q67为测试生物，96孔微孔板为载体；通过96孔微孔板分析方法，采用微孔板分光光度计来检测其发光强度；根据实验组与对照组的发光强度来计算发光抑制率，从而判断磺胺类抗生素的生物毒性。本发明方法利用微板法对磺胺类抗生素的毒性进行检测分析，通过计算发光菌的发光抑制率，再利用基于Matlab自编的Logit函数拟合计算出的EC50值的负对数pEC50，以pEC50值判断磺胺类抗生素的综合毒性大小，本发明方法操作简单、方便快捷、重现性好，能够广泛适用于测试环境中实际残留的磺胺类抗生素的毒性。
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