[发明专利]一种检测鸭传染性浆膜炎的RPA-LFD可视化试剂盒及其应用在审
| 申请号： | 201910239540.8 | 申请日： | 2019-03-27 |
| 公开（公告）号： | CN109957622A | 公开（公告）日： | 2019-07-02 |
| 发明（设计）人： | 赵明秋;章洋溢;李晓明;张媛媛;黄允真;陈金顶 | 申请（专利权）人： | 华南农业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/689 | 分类号： | C12Q1/689;C12Q1/6844;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/01 |
| 代理公司： | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人： | 林丽明 |
| 地址： | 510642 广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种检测鸭传染性浆膜炎的RPA‑LFD可视化试剂盒及其应用；所述试剂盒包含RPA‑LFD引物对和探针，所述引物对的上游引物、下游引物，探针序列依次如SEQ ID NO.1～3所示；其中，下游引物5’端用生物素Biotin标记；探针5’端用羧基荧光素FAM标记，3’端用C3‑Spacer修饰，且离5’端第32位碱基被四氢呋喃替代。所述试剂盒将RPA技术结合核酸试纸条技术用于检测鸭疫里氏杆菌，可以在常温等温条件下扩增、试纸条可视化检测，不需要PCR仪、荧光定量PCR仪、电泳仪、电泳槽等复杂的仪器设备，且RPA不需要复杂的样品处理，可以真正实现便携式的现场快速核酸检测。 | ||
| 搜索关键词： | 鸭传染性浆膜炎 可视化试剂盒 下游引物 试剂盒 种检测 探针 引物 荧光定量PCR仪 鸭疫里氏杆菌 核酸试纸条 可视化检测 荧光素FAM 等温条件 核酸检测 技术结合 上游引物 四氢呋喃 探针序列 样品处理 仪器设备 电泳槽 电泳仪 生物素 试纸条 位碱基 扩增 羧基 修饰 应用 检测 替代 | ||
【主权项】：
1.一种用于检测鸭疫里氏杆菌的RPA‑LFD引物对和探针，其特征在于，所述引物对的上游引物、下游引物，探针序列依次如SEQ ID NO.1～3所示；其中，下游引物5’端用生物素Biotin标记；探针5’端用羧基荧光素FAM标记，3’端用C3‑Spacer修饰，且离5’端第32位碱基被四氢呋喃替代。
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- 2019-02-27 - 2019-10-18 - C12Q1/689
- 本发明公开一种甘蔗白叶病植原体和白条黄单胞菌的双重PCR检测方法及其引物组。由甘蔗白叶病植原体引起的甘蔗白叶病和由白条黄单胞菌引起的甘蔗白条病在症状表现上非常相似，目前确诊病害时必须分别检测两种病原。本发明针对甘蔗白叶病植原体tuf基因和白条黄单胞菌rpoD基因分别设计了一对特异性引物，经过条件优化，建立了可以同时检测出甘蔗白叶病植原体和白条黄单胞菌的双重PCR反应体系。应用该方法可以在一次PCR反应中同时检测甘蔗白叶病植原体和白条黄单胞菌，具有快速、特异性、稳定的特点，可用于甘蔗白叶病和甘蔗白条病的快速鉴别诊断，对有效防控这两种病害具有重要意义。
- 一种用于铜绿假单胞菌检测的试剂盒-201910549656.1
- 孙泽玮;陈文静;郑良荣 - 浙江大学
- 2019-06-24 - 2019-10-15 - C12Q1/689
- 本发明提供一种用于铜绿假单胞菌检测的试剂盒，包含一种特异性靶向铜绿假单胞菌rpoB基因的向导RNA、扩增引物对、水化TwistAmp basic kit反应干燥球、LbCas12a蛋白、单链DNA探针(ssDNA)、Ribonuclease Inhibitor和缓冲液。使用该试剂盒进行铜绿假单胞菌检测，检测的特异性高，可以将铜绿假单胞菌与其他假单胞菌，包括荧光假单胞菌、恶臭假单胞菌区分开来。同时，使用本发明所述RNA序列进行检测，耗时在1小时左右，不需要PCR仪，对设备要求低，显著低于传统的细菌培养法或PCR测序法，临床实用价值大。
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