[发明专利]抗鸭传染性浆膜炎兽药的制备方法

摘要

本发明公开一种用于鸭传染性浆膜炎的预防和治疗的抗鸭传染性浆膜炎IgY兽药及其制备方法。它是用鸭传染性浆膜炎病原菌(鸭疫里默氏杆菌)的灭活菌苗免疫产蛋母鸡，从鸡蛋黄中提取的一种蛋白质。它对鸭传染性浆膜炎具有特异性的预防和治疗作用及鸭疫里默氏杆菌不对它产生耐药性。鸭传染性浆膜炎病鸭用抗鸭传染性浆膜炎IgY兽药治疗后，其体内不存在药物残留。该药物药效期长，使用成本低；并且治愈率高，存活数大。

主权项

1.一种抗鸭传染性浆膜炎兽药的制备方法，其特征在于按如下步骤制得：(1)、菌种准备及细菌的增殖将真空冻干保存的鸭疫里默氏杆菌用生理盐水按1∶1稀释，接种巧克力营养琼脂，在含5％二氧化碳，37℃的培养箱中培养36-48小时，经纯度检验合格后，用生理盐水制成菌悬液接种巧克力营养琼脂，扩大培养，收集细菌；(2)、制备灭活菌苗将收集的细菌用生理盐水悬浮成菌悬浮，使每毫升含150-200亿个细菌，用终浓度0.3％甲醛在37℃下灭活24小时，其间振摇3-4次，即为制苗用抗原；把抗原灭活菌悬浮与含矿物油、司本、硬脂酸铝的油佐剂按1∶3混合乳化制成油乳剂灭活菌苗，并进行菌苗的安全检验；(3)、产蛋鸡的免疫选25周龄左右的健康产蛋母鸡用安全检验合格的灭活菌苗进行免疫，免疫程序为：第1次：每只鸡左右脚垫各注射0.15ml，颈部皮下0.2ml；第2次：2周后每只鸡颈部皮下多点注射1.0ml；第3次：2周后，每只鸡颈部皮下多点注射1.5ml；(4)、高免蛋的收集第3次免疫后14天，开始抽样测定高免鸡蛋黄中抗鸭传染性浆膜炎IgY兽药效价，蛋黄与生理盐水按1∶3V/V稀释后，加入等体积三氯甲烷萃提，上清液琼扩效价≥1∶16即为合格，之后收集鸡蛋；(5)、提取抗鸭传染性浆膜炎IgY兽药A、蛋壳消毒：将鸡蛋浸入加热至42℃的0.1％新洁尔灭水溶液中消毒25-35分钟，取出凉干或吹干备用；B、打蛋分离蛋黄：采用手工或机械打蛋，充分除去蛋清，呈白色，胚盘和系带，收集蛋黄；C、萃提：先充分搅拌蛋黄呈均匀膏状，然后加入3倍左右的灭活生理盐水，再次充分搅拌混匀，使成为蛋黄液；在该蛋黄液中加入等体积的三氯甲烷，充分振荡混合，作用60分钟后以3500-4000rpm离心30分钟左右，收集离心管中的上清液；D、加入灭活剂和稳定剂：上清液按终浓度为0.05％加入甲醛，充分搅拌混合，密封30-60分钟后加入终浓度为0.02％左右的稳定剂吐温-20，混匀；E、除菌过滤：用0.2-0.3um微孔滤膜过滤除菌，即为抗鸭传染性浆膜炎IgY兽药；(6)、效价、安全检验，形成产品