[发明专利]Nrf2/ARE在低氧时表达及与黄芪多糖保护作用测定方法在审
| 申请号： | 201910084960.3 | 申请日： | 2019-01-29 |
| 公开（公告）号： | CN109797129A | 公开（公告）日： | 2019-05-24 |
| 发明（设计）人： | 张甲翠;俞登虎;刘静;李守玺;张新栋;焦克平 | 申请（专利权）人： | 兰州大学第一医院 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071;C12Q1/02;C12Q1/686;G01N33/68;G01N33/573 |
| 代理公司： | 重庆市信立达专利代理事务所(普通合伙) 50230 | 代理人： | 包晓静 |
| 地址： | 730000 甘*** | 国省代码： | 甘肃;62 |
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| 摘要： | 本发明属于Nrf2/ARE信号通路调控作用检测技术领域，公开了一种Nrf2/ARE在低氧时表达及与黄芪多糖保护作用测定方法；釆用贴壁法培养HPAECs，建立HPAECs的缺氧模型，测定不同组间HPAECs上清液中Nrf2、SOD、GSH的浓度；RT‑PCR检测内皮细胞Nrf2mRNA、SODmRNA、GSH‑PXmRNA的表达；免疫印迹法测定Nrf2、SOD、GSH‑PX蛋白含量。本发明通过测定机体自身抗氧化应激信号通路Nrf2/ARE在低氧时HPAECs的表达，推测Nrf2蛋白在肺动脉内皮细胞中高表达，而且黄芪多糖可以通过增强Nrf2蛋白的高表达发挥抗氧化应激作用，其作用效果具有时间和浓度依赖性。 | ||
| 搜索关键词： | 黄芪多糖 低氧 抗氧化应激 蛋白 信号通路 高表达 肺动脉内皮细胞 免疫印迹法测定 检测技术领域 浓度依赖性 调控作用 内皮细胞 缺氧模型 上清液 贴壁 | ||
【主权项】：
1.一种Nrf2/ARE在低氧时表达及与黄芪多糖保护作用测定方法，其特征在于，所述Nrf2/ARE在低氧时表达及与黄芪多糖保护作用测定方法包括：第一步，釆用贴壁法培养HPAECs，建立HPAECs的缺氧模型，测定不同组间HPAECs上清液中Nrf2、SOD、GSH‑PX的浓度；第二步，RT‑PCR检测内皮细胞Nrf2mRNA、SOD mRNA、GSH‑PXmRNA、的表达；第三步，免疫印迹法测定Nrf2、SOD、GSH‑PX蛋白含量。
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