[发明专利]巢式PCR特异性引物对、试剂盒及其制备方法和在辅助鉴定Ln基因编辑材料中的应用在审
| 申请号： | 201910075642.0 | 申请日： | 2019-01-25 |
| 公开（公告）号： | CN109628631A | 公开（公告）日： | 2019-04-16 |
| 发明（设计）人： | 邱丽娟;文静;郭勇;郭兵福 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院作物科学研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京慕达星云知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 11465 | 代理人： | 崔自京 |
| 地址： | 100000 北京市海淀区中关*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种基因编辑创制大豆窄叶型种质的方法及相关鉴定方法，包括向目的大豆中导入大豆基因组编辑的载体，在W82的基因组上对Ln(Glyma.20g25000)基因进行编辑，在Ln基因的编码区敲除了4个碱基，使Ln基因发生隐性突变为ln得到窄叶大豆，将其命名为ZH609；大豆基因组编辑的载体含有Cas蛋白基因、sgRNA编码基因。采用上述方法能够实现对大豆定点基因编辑，获得具有窄叶性状的大豆，具有较高育种价值。本发明还公开了一种巢式PCR特异性引物对和具有其的试剂盒及其制备方法和应用，利用特异性PCR引物扩增的方法，简便快捷地进行鉴定，从而达到了简便易行且经济实用地鉴定Ln基因编辑材料和W82、ZP661等含Ln基因的常规品种，或检测Ln基因编辑材料后代纯杂合情况的目的。 | ||
| 搜索关键词： | 基因 大豆 编辑材料 窄叶 大豆基因组 特异性引物 巢式PCR 试剂盒 制备方法和应用 特异性PCR引物 编码基因 常规品种 蛋白基因 辅助鉴定 经济实用 编码区 基因组 碱基 扩增 性状 杂合 制备 种质 育种 后代 检测 应用 | ||
【主权项】：
1.一种巢式PCR特异性引物对，其特征在于，所述巢式PCR特异性引物对为Ln‑F9/Ln‑R4或Ln‑F4/Ln‑R2；序列为：Ln‑F9：GCCCGATGAGTACTCTAGAG；Ln‑R4：TCCAAACGATCCTGTGCACCTG；Ln‑F4：CCATGCAGCGATTCTCTTCC；Ln‑R2：CCTTGTGCTCTCTCCTCCAA。
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