[发明专利]PCV3Cap蛋白抗原多肽、抗PCV3 Cap蛋白的多克隆抗体及其应用在审
| 申请号： | 201811521799.3 | 申请日： | 2018-12-13 |
| 公开（公告）号： | CN109678935A | 公开（公告）日： | 2019-04-26 |
| 发明（设计）人： | 潘艳;贺会利;李军;冯世文;彭昊;胡帅;马春霞;谢永平;庞彬辉;钟舒红;柳锋 | 申请（专利权）人： | 广西壮族自治区兽医研究所 |
| 主分类号： | C07K14/01 | 分类号： | C07K14/01;C07K16/08;G01N33/68 |
| 代理公司： | 重庆市信立达专利代理事务所(普通合伙) 50230 | 代理人： | 包晓静 |
| 地址： | 530001 广西*** | 国省代码： | 广西;45 |
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| 摘要： | 本发明属于基因工程技术领域，公开了一种PCV3 Cap蛋白抗原多肽、抗PCV3 Cap蛋白的多克隆抗体及其应用，所述PCV3 Cap蛋白抗原多肽序列为SEQ ID NO:1。PCV3 Cap蛋白多肽的设计及合成：根据GenBank上的PCV3 Cap蛋白序列获得PCV3 Cap蛋白序列，含有157个氨基酸；用DNAstar软件分析Cap蛋白特性，该蛋白的分子量为16871道尔顿，等电点为6.59，为酸性蛋白；用IEDB软件分析Cap蛋白免疫原性、亲疏水性及表面可及性，结果表明PCV3 Cap蛋白30aa‑45aa有16个氨基酸抗原性、亲水性及表面可及性较强；Cap抗原多肽筛选。 | ||
| 搜索关键词： | 多克隆抗体 抗原多肽 氨基酸 多肽 基因工程技术 蛋白抗原 多肽筛选 免疫原性 亲疏水性 软件分析 酸性蛋白 等电点 抗原性 亲水性 应用 蛋白 合成 分析 | ||
【主权项】：
1.一种PCV3 Cap蛋白抗原多肽，其特征在于，所述PCV3Cap蛋白抗原多肽序列为SEQ ID NO:1。
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- 本发明涉及一种WSSV囊膜蛋白原核表达包涵体的变复性方法。其内容包括：1）向WSSV囊膜蛋白原核表达包涵体中加入8M尿素的10mMTris-HCl，pH8.0，剧烈搅动，25℃下用磁力搅拌器不断搅拌3-4小时，使沉淀缓慢溶解；2）4℃，12000rpm离心12min，弃沉淀；3）在所得上清液中加入pH8.0的磷酸盐缓冲液，以pH8.0的磷酸盐缓冲液透析20-22小时，然后用PEG-20000浓缩得可溶性蛋白。利用本发明，WSSV囊膜蛋白原核表达包涵体的复性效率均达到了95%以上，获得了可溶性蛋白。
- 一种猪圆环病毒2型Cap蛋白基因及其应用-201210315776.3
- 王宏华;于春梅;凌红丽;蒋皓静;张园园 - 青岛康地恩药业股份有限公司;青岛宝依特生物制药有限公司
- 2012-08-30 - 2012-12-19 - C07K14/01
- 本发明涉及一种猪圆环病毒2型Cap蛋白基因及其应用，蛋白的氨基酸序列为SEQ ID NO：1，核苷酸序列为SEQ ID NO：2。本发明的圆环病毒2型Cap蛋白可用于制备猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗。本发明获得的猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗经肌肉接种21日龄PCV2阴性断奶仔猪5头，另取5头作为对照。接种28日后取血测PCV2抗体，免疫组PCV2抗体全部为阳性，有效率达到100%，对照组未检测到抗体。结果显示制备的重组蛋白免疫原性良好，其进一步制备的猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗可以引起仔猪的免疫应答。
- 一种突变多角体蛋白及其制备方法-201110432043.3
- 杜君卿;陈剑清;舒特俊;张耀洲 - 天津耀宇生物技术有限公司
- 2011-12-21 - 2012-06-27 - C07K14/01
- 本发明涉及一种能够提高目的蛋白得率的突变多角体蛋白，属于生物技术领域。本发明主要通过构建重组表达载体pET-28a-polh，然后利用商品化的试剂盒对其进行突变得到完整的含突变位点的重组表达载体，再进行诱导表达，得到能够降低溶解pH的所述突变多角体蛋白。本发明的突变多角体蛋白基因连接上目的蛋白基因后，得到的融合蛋白既能利用多角体的性质通过pH调节和差速离心的方法简化纯化步骤，又能在蛋白酶最佳作用pH条件下进行酶切，得到最大量的目的蛋白，极大地提高了目的蛋白的得率。
- 一种检测基孔肯雅病毒的重组抗原蛋白、试剂盒及其应用-201110304012.X
- 唐博恒;任瑞文;张培;刘建伟;于德宪;洪文艳;方美玉 - 中国人民解放军广州军区疾病预防控制中心
- 2011-09-30 - 2012-05-09 - C07K14/01
- 一种检测基孔肯雅病毒抗体的重组抗原蛋白，所述重组抗原蛋白序列如SEQ ID NO.1所示，其编码基因序列如SEQ ID NO.2所示，该编码基因序列中包括编码重组抗原蛋白柔性臂的延伸区段，柔性臂能够消除表达载体的融合蛋白对多肽表位的掩盖，使表达的重组抗原蛋白正确折叠。本发明还公开了该重组抗原蛋白的制备方法。另外，本发明公开的基孔肯雅病毒的检测试剂盒中包含包被有上述重组抗原蛋白的抗体检测板和ELISA反应液。本发明的重组抗原蛋白具有特异性强、亲和力高的优点，与其它相近的虫媒传播病毒无血清学交叉反应，而与基孔肯雅病毒抗体具有极高亲和力，能够快速、准确地检测基孔肯雅病毒抗体，从而诊断基孔肯雅病毒的感染情况。
- 一种分子改良型凋亡素（30～121）及其制备方法和应用-201110139231.7
- 王剑松;詹辉;杨峻峰;王春晖 - 王剑松
- 2011-05-26 - 2011-11-23 - C07K14/01
- 本发明公开了一种分子改良型凋亡素(30～121)及其制备方法和应用。该凋亡素序列具有SEQ ID № 2所述的氨基酸序列和SEQ ID № 1所述的核苷酸序列。本发明前期通过基因拼接法，据NCBI gene bank中VP3基因序列，设计基因合成所用的寡核苷酸序列(Oligo1-Oligo20)及PCR扩增引物p1、p2，将Oligo1到Oligo20共20条引物，两两重叠，覆盖整个VP3基因编码区。再根据VP3的基因序列设计VP3(30-121)的引物，分别为-N端和-C端引物，据碱基互补配对原则、GC比值和酶切位点相关因素设计引物序列等一系列步骤，得到所需的扩增产物分子改良型凋亡素VP3(30-121)。实验结果显示，所述的分子改良型凋亡素在制备抗肿瘤药物方面具有良好的应用前景。
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