[发明专利]检出准确度鉴定方法、检出准确度鉴定装置、和检出准确度鉴定程序在审
| 申请号： | 201811292252.0 | 申请日： | 2018-10-31 |
| 公开（公告）号： | CN109750057A | 公开（公告）日： | 2019-05-14 |
| 发明（设计）人： | 濑尾学;和泉贤;川岛优大 | 申请（专利权）人： | 株式会社理光 |
| 主分类号： | C12N15/81 | 分类号： | C12N15/81 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人： | 王永伟;赵蓉民 |
| 地址： | 日本*** | 国省代码： | 日本;JP |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明涉及检出准确度鉴定方法、检出准确度鉴定装置、和检出准确度鉴定程序。提供了用于鉴定检出测试目标核酸的检出准确度的检出准确度鉴定方法，该方法包括利用包含已知数量的核酸分子的标准物质和基于检出已知数量的核酸分子的概率，鉴定测试目标核酸的检出准确度能力。 | ||
| 搜索关键词： | 检出 准确度 核酸分子 鉴定程序 鉴定装置 标准物质 测试目标 鉴定测试 目标核酸 核酸 概率 | ||
【主权项】：
1.用于鉴定检出测试目标核酸的检出准确度的检出准确度鉴定方法，所述检出准确度鉴定方法包括利用包括已知数量的核酸分子的标准物质和基于检出所述已知数量的核酸分子的概率，鉴定所述测试目标核酸的检出准确度能力。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于株式会社理光，未经株式会社理光许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201811292252.0/，转载请声明来源钻瓜专利网。
- 同类专利
- 用汉逊酵母表达系统产生HPV58 L1蛋白的方法-201910793381.6
- 于跃;班靖洋;霍烛;陈丹;王贻杰;刘娟;程海;李鼎锋;刘勇 - 北京安百胜生物科技有限公司;江苏瑞科生物技术有限公司
- 2013-04-26 - 2019-11-08 - C12N15/81
- 本发明涉及用汉逊酵母表达系统产生HPV58 L1蛋白的方法。具体地，本发明公开了产生表达HPV58 L1蛋白的重组汉逊酵母细胞的方法以及由所述方法产生的重组汉逊酵母细胞。本发明还公开了利用所述重组汉逊酵母细胞产生HPV58 L1蛋白的方法以及所产生的HPV58 L1蛋白在制备预防性疫苗中的用途。
- 多亚基蛋白质例如抗体在转化的微生物例如巴斯德毕赤酵母中的高纯度产生-201910566412.4
- P·D·麦克尼尔;N·詹森;G·L·莱斯尼基;P·齐;J·A·莱瑟姆;L·F·加西亚-马丁内斯 - 奥尔德生物控股有限责任公司
- 2012-05-08 - 2019-11-05 - C12N15/81
- 本发明公开了用于在转化的细胞中产生异源多亚基蛋白质的方法。具体地，本公开提供了以更高的产率和减少的非所需副产物产量产生多亚基蛋白质的改进方法，所述多亚基蛋白质包括可能会或可能不会被分泌出的抗体和其它多亚基蛋白质。在示例性实施方案中，转化的细胞为酵母，例如甲醇营养型酵母如巴斯德毕赤酵母。
- 一种提高酵母细胞对复合抑制剂耐受能力的方法-201610017548.6
- 元英进;王昕;李炳志;周嗣杰;刘宝利 - 天津大学
- 2016-01-12 - 2019-11-01 - C12N15/81
- 本发明属于发酵技术领域，公开了一种提高酵母细胞对复合抑制剂的方法以及获得酵母菌株。本发明所述提高酵母细胞对复合抑制剂耐受能力的方法通过基因工程技术构建包含PRO1D154N,G220C突变体的重组质粒，转化酵母细胞，通过酵母菌株中的PRO1基因上第154位(D154N)和第220位(G220C)的同时突变，实现对酵母细胞耐受纤维素水解抑制物能力的调控，提高酵母细胞对复合抑制剂耐受性。本发明所述酵母菌株包含重组质粒pRS416‑HXT7p‑PRO1D154N,G220C‑TEF1t，尤其是酵母菌株SyBE_Sc0150012。实验结果表明本发明所述酵母菌株对复合抑制剂耐受性能显著增强。
- 产脂肪酶的毕赤酵母基因工程菌株的构建方法-201610589755.9
- 范立海;王在宇;张子剑;谭天伟 - 北京化工大学
- 2016-07-25 - 2019-10-29 - C12N15/81
- 本发明涉及构建产脂肪酶的毕赤酵母基因工程菌株及其构建方法。脂肪酶在酶催化反应中,反应如在油水界面促进酯水解,而在有机相中可以酶促合成和酯交换。因此可以以地沟油或工业废油和低碳醇为原料用来合成生物柴油。通过将重组脂肪酶Lip14基因转入毕赤酵母X33中从而大量发酵脂肪酶。通过以对硝基苯基棕榈酸酯为底物测定脂肪酶对长链脂类的水解能力,对硝基苯基月桂酸酯和对硝基苯基辛酸酯测定脂肪酶对中链脂类的水解能力,对硝基苯基丁酸酯测定脂肪酶对短链脂肪酶的水解能力。确定其对中长短链脂类的水解活性。为将其在催化生产生物柴油的实验中奠定了基础。
- 一种新型5种抗菌肽串联表达重组工程菌构建方法及其应用-201910589799.5
- 王莲哲;洪军;谢朝晖;柳静;胡建业;刘俊红;时宁;任亚彬;左晓洁 - 河南城建学院
- 2019-07-02 - 2019-10-08 - C12N15/81
- 本发明公开了一种新型5种抗菌肽串联表达重组工程菌构建方法及其应用，通过将5种不同的广谱抗菌肽串联，中间插入甲酸切割位点，构建到酵母分泌性表达载体pPIC9k中，并经酶切线性化后转化毕赤酵母感受态细胞获得。重组工程菌插入氨基酸序列特点，所有氨基酸用毕赤酵母偏好性密码子进行替换，以保证在毕赤酵母中的最优表达。插入序列为5种不同的广谱抗菌肽串联表达，中间插入甲酸切割位点。本发明根据毕赤酵母的密码子偏爱性对5种新型抗菌肽进行优化并串连，然后构建真核重组表达载体，达到5种不同抗菌肽在毕赤酵母中的串联表达，提高发酵产物的表达量及活性。
- 用汉逊酵母表达系统产生HPV45 L1蛋白的方法-201910638184.7
- 刘娟;陈丹;程海 - 北京安百胜生物科技有限公司;江苏瑞科生物技术有限公司
- 2013-05-17 - 2019-10-01 - C12N15/81
- 本发明涉及用汉逊酵母表达系统产生HPV45 L1蛋白的方法。具体地，本发明公开了产生表达HPV45 L1蛋白的重组汉逊酵母细胞的方法以及由所述方法产生的重组汉逊酵母细胞。本发明还公开了利用所述重组汉逊酵母细胞产生HPV45 L1蛋白的方法以及所产生的HPV45 L1蛋白在制备预防性疫苗中的用途。
- 酿酒酵母代谢工程改造提高S-腺苷-L-蛋氨酸生产水平的方法-201510691925.X
- 徐志南;赵伟军;杨修亮;杭宝建;黄磊;李江涛;蔡谨 - 山东金城生物药业有限公司;浙江大学
- 2015-10-23 - 2019-09-20 - C12N15/81
- 本发明公开了一种酿酒酵母代谢工程改造提高S‑腺苷‑L‑蛋氨酸生产水平的方法：利用酵母基因敲除技术，将酿酒酵母染色体上编码腺苷蛋氨酸脱羧酶基因SPE2突变失活，得到SPE2突变菌株。与原始的酿酒酵母菌株相比，突变菌株积累SAM能力增强、生产SAM产量明显提高。特别是，在先敲除糖原支链酶基因GLC3得到酿酒酵母突变株基础上，进一步敲除再进行SPE2敲除，或者先敲除SPE2基因再敲除GLC3基因，对提高酿酒酵母菌株生产腺苷蛋氨酸产量有更明显的提高，可到达55.1%以上。
- 一种用于毕赤酵母的基因编辑载体pHS-AVC-LW1073-201910190241.X
- 黄遵锡;马瑜;丁俊美;韩楠玉;慕跃林;吴倩 - 云南师范大学
- 2019-03-13 - 2019-09-13 - C12N15/81
- 本发明公开了一种用于毕赤酵母的基因编辑载体pHS‑AVC‑LW1073。本发明构建的CRISPR/Cas9基因载体，包括复制起始位点、启动子、筛选标记基因、Cas9蛋白基因、核定位序列和gRNA编码的DNA。本发明构建的CRISPR/Cas9基因载体能够对毕赤酵母基因组进行有效的编辑(包括基因或者DNA序列的敲除、置换、插入等操作)，具有试验周期短、操作简洁和节省成本等优点。
- 细胞表面展示PET分解酶的重组毕赤酵母及构建与应用-201610912589.1
- 王泽方;杨海涛;王雪;童善惟;陈卓芝;程莹莹;侯宇佳 - 天津大学
- 2016-10-20 - 2019-09-10 - C12N15/81
- 本发明公开了细胞表面展示PET分解酶的重组毕赤酵母及构建与应用，其构建为：(1)化学合成SEQ ID No.1所示的改良过的PET分解酶的核苷酸序列；从毕赤酵母GS115基因组中克隆出锚定蛋白基因的核苷酸序列；(2)利用OverlapPCR将锚定蛋白基因的核苷酸序列和改良过的PET分解酶基因的核苷酸序列连接得到融合序列；(3)将融合序列连接到毕赤酵母表达载体上，得到重组表达载体；(4)将重组表达载体转入宿主毕赤酵母中，得到细胞表面展示PET分解酶的重组毕赤酵母。本发明可以将PET分解酶锚定到细胞表面，固定化后的酶可做全细胞催化剂，相比于野生型稳定性高、回收方便、易控制、可反复利用。
- 细胞表面共展示PET分解酶和疏水蛋白的重组毕赤酵母-201610912165.5
- 王泽方;杨海涛;陈卓芝;程莹莹;王雪;童善惟;侯宇佳 - 天津大学
- 2016-10-20 - 2019-09-06 - C12N15/81
- 本发明公开了细胞表面共展示PET分解酶和疏水蛋白的重组毕赤酵母，构建为：(1)从毕赤酵母基因组中克隆出锚定蛋白基因；化学合成疏水蛋白基因和PETase基因；(2)锚定蛋白基因和PETase基因连接得融合序列1；锚定蛋白基因和疏水蛋白基因连接得融合序列2；(3)将融合序列1连接到毕赤酵母表达载体上，得到融合表达载体1；将融合序列2连接到毕赤酵母表达载体上，得到融合表达载体2；(4)融合表达载体1、2转入表达宿主毕赤酵母中，得到本发明的重组毕赤酵母。本发明使酶固着定位于细胞表面。与游离酶相比具有稳定性高、易回收、反复使用、成本低，疏水蛋白与PETase在毕赤酵母中共展示增强重组毕赤酵母的稳定性。
- 用于提高莱鲍迪苷D和莱鲍迪苷M之产生的方法-201480007742.5
- 迈克尔·达尔埃格德·米克尔森;约恩·汉森;埃内斯托·西蒙;费代里科·布里安扎;安格利卡·塞姆莱尔;基姆·奥尔森;西蒙·卡尔森;路易斯·迪林;阿列克谢·乌斯片斯基;保拉·希克斯 - 埃沃尔瓦公司
- 2014-02-06 - 2019-09-06 - C12N15/81
- 本发明提供了用于重组产生甜菊醇糖苷的方法和包含甜菊醇糖苷的组合物。
- 获得用于代谢阿拉伯糖的高效酵母菌株-201880006369.X
- 托马斯·德福热雷;埃米莉·弗里奇;乔治斯·皮尼德;克里斯托夫·拉夫;克莱尔·托雷尔 - 乐斯福公司
- 2018-01-24 - 2019-09-03 - C12N15/81
- 本发明涉及用于获得适于代谢阿拉伯糖的酵母菌株的方法，以及包括在诸如乙酸的抑制剂存在下，在其发酵阿拉伯糖以及木糖和葡萄糖的能力方面具有良好性能的改良菌株。
- 一种游离型非甲醇诱导毕赤酵母表达载体的构建及其应用-201910476834.2
- 吴敬;胡梦凯;夏伟;吴丹 - 江南大学
- 2019-06-03 - 2019-08-30 - C12N15/81
- 本发明涉及一种游离型非甲醇诱导毕赤酵母表达载体的构建及其在酶重组表达中的应用，属于基因工程技术领域。本发明所述非甲醇诱导毕赤酵母表达载体是将乳酸克鲁维酵母自主复制序列PARS2和毕赤酵母启动子PGCW14序列插入载体骨架，属于带自我复制序列的游离型载体构建得到的。利用该载体构建的游离型重组毕赤酵母工程菌相对通用的整合型重组毕赤酵母工程菌，分泌生产重组酶的能力显著提升。此外，其发酵原料来源广泛，生产成本较低。
- 一种在毕赤酵母系统中表达重组人源脯氨酰-4-羟化酶的方法及应用-201910241421.6
- 项琪;黄亚东;肖巧学;肖雪 - 广州暨南大学医药生物技术研究开发中心;广州市暨源生物科技有限公司
- 2019-03-28 - 2019-08-27 - C12N15/81
- 本发明公开了一种在毕赤酵母系统中表达重组人源脯氨酰‑4‑羟化酶(rhP4H)的方法，具体包括重组质粒pPICZαA‑P4Hα2和pHIL‑PDI的构建，P4Hα2和PDI共表达毕赤酵母工程菌GS115的转化和阳性表达菌的筛选，并对表达条件进行优化。所得到的rhP4H酶，无论是在酵母体系内还是分离提纯后均能特异性催化人源胶原蛋白结构单元‑Gly‑X‑Y‑中脯氨酸的羟基化。
- 重组酵母宿主细胞的亚硫酸盐耐受性-201780082178.7
- 阿龙·阿吉罗斯;查尔斯·F·里瑟;特丽莎·巴雷特;米歇尔·厄泽尔;珍妮特·费希尔 - 拉勒曼德匈牙利流动性管理有限责任公司
- 2017-12-22 - 2019-08-27 - C12N15/81
- 本公开涉及使用特异性遗传修饰以改进重组酵母宿主细胞的亚硫酸盐耐受性。所述遗传修饰经过设计以允许表达有利于SSU1多肽的表达的异源转录因子和/或异源SSU1多肽在重组酵母宿主细胞中的表达。
- 用汉逊酵母表达系统产生HPV33L1蛋白的方法-201310183593.5
- 王贻杰;程海;于跃;霍烛;刘娟;陈丹;李鼎锋;刘勇 - 北京安百胜生物科技有限公司;江苏瑞科生物技术有限公司
- 2013-05-17 - 2019-08-23 - C12N15/81
- 本发明涉及用汉逊酵母表达系统产生HPV33L1蛋白的方法。具体地，本发明公开了产生表达HPV33L1蛋白的重组汉逊酵母细胞的方法以及由所述方法产生的重组汉逊酵母细胞。本发明还公开了利用所述重组汉逊酵母细胞产生HPV33L1蛋白的方法以及所产生的HPV33L1蛋白在制备预防性疫苗中的用途。
- 一种汉逊酵母特异性表达载体的构建及在提高乙肝病毒表面抗原在汉逊酵母表达量的方法-201610137206.8
- 黄恩启;吴常伟;李超;王力卫;刘术敏;程英杰;陶立峰;杨世龙 - 安徽智飞龙科马生物制药有限公司;重庆智飞生物制品股份有限公司;北京智飞绿竹生物制药有限公司
- 2016-03-11 - 2019-08-23 - C12N15/81
- 本发明公开一种汉逊酵母特异性表达载体的构建及在提高乙肝病毒表面抗原在汉逊酵母表达量的方法，属于生物工程技术领域，构建：步骤1，从真核汉逊酵母菌株ATCC34438或其衍生菌种基因组DNA，设计特异性引物，PCR扩增，分别调取MOX基因启动子MOXp和终止子MOX‑TT；步骤2，将毕赤酵母表达载体pPICZC上的启动子AOX1和终止子AOX‑TT，分别替换成MOX基因启动子MOXp和终止子MOX‑TT，即得汉逊酵母表达载体pHPZF1.0。采用本发明所述方法，可以获得的乙型肝炎表面抗原汉逊酵母酵母工程菌株能够以甲醇诱导型方式稳定和高效地表达HBsAg重组蛋白，适用于规模化生产HBsAg重组蛋白。
- 用汉逊酵母表达系统产生HPV45 L1蛋白的方法-201310185039.0
- 刘娟;陈丹;程海;王贻杰;于跃;李鼎锋;刘勇 - 北京安百胜生物科技有限公司;江苏瑞科生物技术有限公司
- 2013-05-17 - 2019-08-13 - C12N15/81
- 本发明涉及用汉逊酵母表达系统产生HPV45 L1蛋白的方法。具体地，本发明公开了产生表达HPV45 L1蛋白的重组汉逊酵母细胞的方法以及由所述方法产生的重组汉逊酵母细胞。本发明还公开了利用所述重组汉逊酵母细胞产生HPV45 L1蛋白的方法以及所产生的HPV45 L1蛋白在制备预防性疫苗中的用途。
- 一种利用酿酒酵母合成3-O-葡萄糖基齐墩果酸和纤维二糖齐墩果酸的方法-201610851950.4
- 李春;赵雨佳;刘啸尘;蔚欢;樊婧婧 - 北京理工大学
- 2016-09-26 - 2019-08-09 - C12N15/81
- 本发明提供了一种利用酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)工程菌生产3‑O‑葡萄糖基齐墩果酸和纤维二糖齐墩果酸的方法，属于生物工程领域。本发明通过化学法合成经密码子优化的P450细胞色素单加氧酶基因、细胞色素还原酶基因以及UDP‑葡萄糖转移酶基因，结合酿酒酵母启动子和终止子组建相应的基因表达盒，通过DNA大片段组装方法构建基因表达载体，并将表达载体导入能够生产β‑香树脂醇的酿酒酵母中。首次实现了在酿酒酵母中直接合成植物次生代谢产物3‑O‑葡萄糖基齐墩果酸和纤维二糖齐墩果酸，且合成的这两种化合物能够跨过酿酒酵母工程菌的细胞膜，简化下游分离萃取工艺，这为利用酿酒酵母生产低水溶性难跨膜的五环三萜类化合物提供了新思路。该方法工艺简单可用于发酵生产3‑O‑葡萄糖基齐墩果酸和纤维二糖齐墩果酸。
- 一种重组质粒及重组酵母菌株及其构建方法和应用-201610355056.8
- 肖文海;王瑞钊;王颖;元英进 - 天津大学
- 2016-05-25 - 2019-08-06 - C12N15/81
- 本发明涉及基因工程技术领域，公开了一种重组质粒及重组酵母菌株及其构建方法和应用。本发明所述重组质粒包含如下基因片段：终止子ADH1t、β‑胡萝卜素羟化酶基因crtZ、启动子FBA1p或TEF1p、启动子TDH3p、β‑胡萝卜素酮化酶基因crtW、终止子TDH2t顺次拼接而成的基因片段。本发明通过选择特定的终止子、启动子以及外源crtZ和crtW，组成了可生产虾青素产量的基因片段，由此获得了重组质粒，将其转化至特定的酿酒酵母菌株中，保证了虾青素的较高产量，为虾青素的异源微生物生产提供更加经济、效率、简便的方式。
- 一种基于双分子荧光互补技术的筛选互作蛋白的方法-201610076717.3
- 王建;商立民;贺福初;原艳芝 - 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院
- 2016-02-03 - 2019-08-02 - C12N15/81
- 本发明公开了一种基于双分子荧光互补技术的筛选互作蛋白的方法。该方法包括：1)将YGFP分成N端(序列1第1‑157位)和C端(序列1第158‑238位)；在N端编码基因3’末端通过连接序列(编码序列2所示连接肽)连接目的蛋白A的编码基因，形成融合基因片段A；在C端编码基因5’或3’末端通过所述连接序列连接目的蛋白B的编码基因，形成融合基因片段B；2)将融合基因片段A和B导入受体酵母细胞，培养所得转基因酵母细胞，检测其是否产生绿色荧光，若产生绿色荧光，则目的蛋白A与B互作或候选互作；若不产生绿色荧光，则目的蛋白A与B不互作或候选不互作。本发明建立的BiFC技术具有较高的敏感性和特异性，适合于在酵母中开展高通量蛋白质相互作用筛选。
- 一种抑制PRRS病毒增殖的靶向抗体治疗剂-201910314591.2
- 周恩民;张璐;王立珍 - 西北农林科技大学
- 2019-04-18 - 2019-07-26 - C12N15/81
- 本发明属于生物学领域，具体涉及一种由酵母系统表达的抑制PRRS病毒增殖的靶向抗体治疗剂，所述靶向抗体治疗剂具有SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列。与现有技术相比，本发明的有益效果：本发明通过重叠PCR技术，将抗PRRS病毒nsp9纳米抗体基因与猪IgG1 Fc片段基因串联得到DNA序列，并将该序连接到毕赤酵母表达载体，并转化入毕赤酵母感受态细胞，培养制备得到靶向抗体治疗剂，此靶向抗体治疗剂既具有进入PRRS病毒靶细胞的功能，又可以特异性结合Nsp9，从而实现了靶向抑制PRRS病毒增殖的作用。
- 粘红酵母的活菌生物胶囊在体内传递胰岛素的应用-201810039779.6
- 孙晗笑;汪佳佳;利时雨 - 广州溯原生物科技有限公司
- 2018-01-16 - 2019-07-23 - C12N15/81
- 本发明涉及一种粘红酵母的活菌生物胶囊在体内传递胰岛素的应用，同源重组法构建外源磷酸胞苷胆碱转移酶基因CCT整合表达载体，利用电穿孔技术将多肽转入GM4‑CCT胞内。本发明实现外源了CCT基因在粘红酵母GM4菌株内高表达，使重组菌株GM4‑CCT中的卵磷脂含量较野生菌株提高了1.5倍多；外源多肽被成功转入胞内，并且我们用insulin来验证此方法的可行性，发现insulin进入胞内的含量是初始量的1/2，且多肽成功被包裹进脂滴内；小鼠口服携带insulin的菌株GM4‑CCT‑insulin连续7天，发现小鼠血清和重要器官（肝、肺、脾、肾）中insulin的含量增加，在口服后2h时达到最高，其中肝脏浓度达到5.36，通过构建糖尿病小鼠动物模型，小鼠口服重组菌株GM4‑CCT‑insulin，与标准insulin相比，GM4‑CCT‑insulin作为外源性胰岛素具有显著的降血糖的作用。
- 一种酿酒酵母等位基因高效整合质粒系统及其应用-201610052533.3
- 黄志伟;房志家;沈裕虎;孟晓卿;魏红岩 - 东华大学;中国科学院西北高原生物研究所
- 2016-01-26 - 2019-07-23 - C12N15/81
- 本发明涉及一种酿酒酵母等位基因高效整合质粒系统及其应用，所述系统包括4种酿酒酵母等位基因整合质粒分别为pDH735、pDH818、pDH824和pDH825。所述系统应用于酿酒酵母的等位基因高效整合，整合方法包括：构建4种基于不同用于酿酒酵母等位基因整合的卡盒的酿酒酵母等位基因整合质粒；将待研究的靶向基因及其侧翼克隆到质粒的整合卡盒中；将整合卡盒释放或扩增出来，转入基因敲除背景或者非基因敲除背景的酿酒酵母菌株中，筛选鉴定整合效果。本发明高效、便捷、高通量、适用范围更广的等位基因整合方法；尤其是适用于酿酒酵母基因组的快速、大通量的等位基因整合。
- 酵母表达载体构建及表达外切型纤维素酶的方法与应用-201910267343.7
- 赵向辉;刘婵娟;瞿明仁;潘珂 - 江西农业大学
- 2019-04-03 - 2019-07-19 - C12N15/81
- 本发明公开了一种酵母表达载体构建及表达外切型纤维素酶的方法与应用，利用现代分子技术成功优化了编码香菇外切型纤维素酶的基因序列，构建了能够在酵母体外表达外切型纤维素酶的表达载体pPICZαA‑Cel7A，利用该载体和毕赤酵母能够制备外切型纤维素酶，进而为外切型纤维素酶在生产中的应用提供技术支撑。通过本发明方法获得的重组毕赤酵母菌酶产率高，活性高，效果佳。
- 一种可降低酿酒酵母乙醇产率的重组质粒pY16TEF1-△SPT15及其应用-201610352024.2
- 秦义;杜青;宋育阳;刘延琳 - 西北农林科技大学
- 2016-05-25 - 2019-07-09 - C12N15/81
- 本发明涉及基因工程技术领域，尤其是涉及一种可降低酿酒酵母乙醇产率的重组质粒pY16TEF1‑△SPT15及其应用。本发明重组质粒pY16TEF1‑△SPT15包括重组质粒pY16TEF1‑△SPT15‑409和重组质粒pY16TEF1‑△SPT15‑619；所述的重组质粒pY16TEF1‑△SPT15‑409中的△SPT15‑409是SPT15基因经过突变后获得，△SPT15‑409碱基序列为SEQ ID No.2，其所翻译的转录因子spt15p的氨基酸序列为SEQ ID No.3；所述的重组质粒pY16TEF1‑△SPT15‑615中的△SPT15‑615是SPT15基因经过突变后获得，△SPT15‑615碱基序列为SEQ ID No.4，其所翻译的转录因子spt15p的氨基酸序列为SEQ ID No.5。本发明能降低酿酒酵母乙醇产率。
- 一种可提高酿酒酵母乙醇产率的重组质粒pY16TEF1-△SPT15-125及其应用-201610351632.1
- 秦义;杜青;宋育阳;刘延琳 - 西北农林科技大学
- 2016-05-25 - 2019-07-09 - C12N15/81
- 本发明涉及基因工程技术领域，尤其是涉及一种可提高酿酒酵母乙醇产率的重组质粒pY16TEF1‑△SPT15‑125及其应用。本发明一种重组质粒pY16TEF1‑△SPT15‑125，所述的重组质粒pY16TEF1‑△SPT15‑125中的△SPT15‑125是SPT15基因经过突变后获得，△SPT15‑125碱基序列为SEQ ID No.2，其所翻译的转录因子spt15p的氨基酸序列为SEQ ID No.3；所述的序列SEQ ID No.2中发生突变的碱基分别为39a>g，128 a>g，156a>g、163a>g、247a>g、653a>g；所述的序列SEQ ID No.3中发生突变的氨基酸分别为Glu43Gly，Lys55Glu,Lys83 Glu,Lys218Arg；所述的携带重组质粒pY16TEF1‑△SPT15‑125的酿酒酵母在提高乙醇产率中的应用。本发明可提高酿酒酵母乙醇产率。
- 一种体外蛋白合成体系、试剂盒及其制备方法-201711452033.X
- 郭敏;徐开;陈鉴冰;周子鉴;柴智;章小铃;王海鹏;于雪 - 康码（上海）生物科技有限公司
- 2017-12-28 - 2019-07-05 - C12N15/81
- 本发明提供了一种体外蛋白合成体系、试剂盒及其制备方法，具体地，本发明由特定比例的(a)细胞提取物；和(b)第一反应促进剂混合所形成的无细胞的体外蛋白合成体系可显著提高外源蛋白的合成效率。
- 一种毕赤酵母中异源表达内切葡聚糖酶EGⅡ，EGⅣ，EGⅤ的构建方法-201910230812.8
- 钟成;舒月力;李栋梁 - 天津科技大学
- 2019-03-26 - 2019-07-05 - C12N15/81
- 本发明的目的在于构建一种异源表达EGⅡ，EGⅣ，EGⅤ蛋白的重组毕赤酵母,具体步骤如：(1)里氏木霉RNA和CDNA的获得:固体诱导培养基获得菌丝体，试剂盒提取总RNA和cDNA；(2)目的基因的克隆:用合理引物PCR扩增出目的基因；(3)构建表达载体:以Ppic9k为载体,将目的基因插入启动子AOX1下游,5'和3'端酶切位点分别为EcoRⅠ，NotⅠ；(4)获取重组菌株:以bglⅠ为表达载体的线性化位点,实现表达载体线性化,电转，得到重组酵母；(5)重组菌株的诱导产酶：摇瓶发酵，用适当甲醇诱导产酶；(6)重组蛋白活性检测：利用SDS‑PAGE及刚果红‑CMC检测重组蛋白的表达量及活性。本方法构建的重组菌株能高效表达带his标签的蛋白，能得到高效单酶组分。
- 用于高通量酵母双杂交技术的重组载体及其大规模筛选互作蛋白的方法-201610436290.3
- 曹罡;杨芳;周美玲;雷莹莹;姚琪利;韩以超;朱成航;伍享;戴金霞;宋云峰;陈西;曾思华;傅振芳 - 华中农业大学
- 2016-06-17 - 2019-07-05 - C12N15/81
- 本发明公开了一种用于酵母双杂交的相关重组载体及其利用高通量测序技术大规模筛选互作蛋白的酵母双杂交的方法，该方法依赖于一种整合酶Integrase phiC31(En)的特有整合功能，通过对传统酵母双杂交载体的改造，使其与高通量测序技术有机结合，实现成百上千的Bait蛋白同时对Prey蛋白文库的筛选工作。将整合酶及其特异识别的核苷酸序列插入Matchmaker GAL4系统的载体中，通过酵母双杂交的方法使重组载体进入同一个酵母细胞，整合酶发生作用，将其特异识别的核苷酸序列及其紧邻的核苷酸序列进行特异性定向重排，从而使得两个重组载体融合成一个融合载体，此时猎物和诱饵蛋白序列被定向连接成融合载体上的一段新的序列，通过扩增、高通量测序，从而经济高效地筛选相互作用蛋白质并构建全面的蛋白互作网络图谱。
- 专利分类
