[发明专利]一种口蹄疫抗原纯化方法在审

专利信息
申请号: 201811026757.2 申请日: 2018-09-04
公开(公告)号: CN110872580A 公开(公告)日: 2020-03-10
发明(设计)人: 不公告发明人 申请(专利权)人: 无锡拓浦壹生物科技有限公司
主分类号: C12N7/02 分类号: C12N7/02
代理公司: 苏州市中南伟业知识产权代理事务所(普通合伙) 32257 代理人: 冯瑞;张红卫
地址: 214000 江苏省无*** 国省代码: 江苏;32
权利要求书: 查看更多 说明书: 查看更多
摘要: 发明公开了一种口蹄疫抗原纯化方法,包括以下步骤:用聚乙二醇处理灭活抗原;添加助滤剂;初滤;稀释;二次过滤从而得到灭活抗原纯化液,本申请采用PEG处理灭活抗原,由于PEG抓取抗原使其粘合在助滤剂上,在过滤过程中,滤片可对抗原进行拦截,而杂质非目的蛋白则随初滤的清液排出,而后采用PBS缓冲溶液对拦截后的抗原固物稀释,使抗原与助滤剂分离。在二次过滤过程中,抗原则会通过滤片,从而完成对抗原的纯化。
搜索关键词: 一种 口蹄疫 抗原 纯化 方法
【主权项】:
暂无信息
下载完整专利技术内容需要扣除积分,VIP会员可以免费下载。

该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息,商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于无锡拓浦壹生物科技有限公司,未经无锡拓浦壹生物科技有限公司许可,擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作,请联系【客服

本文链接:http://www.vipzhuanli.com/patent/201811026757.2/,转载请声明来源钻瓜专利网。

同类专利
  • 一种戊型肝炎病毒的收集方法-202310757883.X
  • 王艺瑾;王春玲 - 南方科技大学
  • 2023-06-25 - 2023-10-27 - C12N7/02
  • 本发明公开一种戊型肝炎病毒的收集方法,其中,包括:步骤A、培养含有戊型肝炎病毒的慢性感染细胞系,用胰酶消化后,进行第一次离心,去除上清,用细胞培养基重悬,得到第一混合液;步骤B、将所述第一混合液进行冷冻,然后进行解冻;步骤C、重复所述步骤B若干次,得到第二混合液;步骤D、将所述第二混合液进行第二次离心,取上清,进行过滤后,得到第三混合液;步骤E、将所述第三混合液以22000~40000rpm的转速进行第三次离心,得到所述戊型肝炎病毒。本发明提供的收集方法,能够去除细胞在裂解过程中产生的大量细胞碎片,能够快速、简单且高效地提纯细胞中的戊型肝炎病毒粒子,提高戊型肝炎病毒的滴度。
  • 一种KT65-噬菌体的免疫筛选方法-202310901751.X
  • 梁婷;陈静飞;蒋华宁;王怀璋;阎瑞;董强;李江存 - 中国人民解放军陆军防化学院
  • 2023-07-21 - 2023-10-13 - C12N7/02
  • 本发明公开了一种KT65‑噬菌体的免疫筛选方法,包括如下步骤:S1:第一轮筛选噬菌体洗脱液;S2:第一轮噬菌体洗脱液效价检测;S3:第一轮噬菌体洗脱液的扩增;S4:第一轮噬菌体纯化;S5:第二、三轮筛选噬菌体洗脱液;S6:第二、三轮噬菌体洗脱液效价检测;S7:第二、三轮噬菌体洗脱液的扩增、纯化;S8:第二、三轮筛选噬菌体子文库效价检测;S9:单克隆ELISA检测;S10:阳性克隆ELISA二次验证;S11:阳性克隆测序;S12:序列分析。
  • 一种呼肠孤病毒3型的纯化方法及应用-202310467199.8
  • 吴涛;方兴建;赵印印;卢孔鑫;毛馨悦;胡孟军;朱向莹 - 浙江恒驭生物科技有限公司
  • 2023-04-25 - 2023-10-10 - C12N7/02
  • 本发明涉及一种呼肠孤病毒3型的纯化方法及应用,该方法包括如下步骤:S1、将含Reo‑3病毒的上清液通过0.1μmPES滤膜过滤;S2、过滤后的上清液用中空纤维柱切向流浓缩,浓缩液加入全能核酸酶消化;消化后的浓缩液用层析平衡缓冲液进行洗滤置换;中空纤维柱为300‑500KD,切向流的工艺参数为跨膜压为2‑4psi,浓缩倍数为5‑10倍,核酸酶活性60‑80U/ml,洗滤换液体积为浓缩液总体积的2‑10倍;S3、将CaptoQimpres强阴离子填料装入层析柱,控制置换后的病毒上清液进入层析填料的线性流速为30‑70cm/min,然后经线性洗脱得到高纯度的Reo‑3病毒液。
  • 一种快速纯化慢病毒的生产工艺-202311033738.3
  • 刘红;侯国栋;胡国健;刘国庆;李蓓蓓 - 赛奥斯博生物科技(北京)有限公司
  • 2023-08-17 - 2023-09-19 - C12N7/02
  • 本发明公开了一种快速纯化慢病毒的生产工艺,涉及生物技术领域。该生产工艺包括在经核酸酶预处理后的病毒原液中加入病毒保护剂,再依次经过澄清过滤、浓缩换液、复合层析和终浓缩,纯化得到所述慢病毒的步骤;所述澄清过滤、所述浓缩换液和所述终浓缩均采用中空纤维柱进行处理,并且所述澄清过滤、所述浓缩换液和所述终浓缩中的浓缩步骤的压力均控制在大于8Psi并不超过14Psi的范围内。该生产工艺提高了慢病毒的稳定性和回收率,使得在室温条件下,即可生产出高滴度和高回收率的慢病毒,从而为慢病毒的大规模生产奠定了基础。
  • 一种深渊盐单胞菌溶原性噬菌体及其分离方法和应用-202310934245.0
  • 汪岷;纪彦;梁彦韬;邵红兵 - 中国海洋大学
  • 2023-07-28 - 2023-09-01 - C12N7/02
  • 本发明公开了一种深渊盐单胞菌溶原性噬菌体及其分离方法和应用,属于海洋生命科学技术领域。该噬菌体是第一株深渊溶原性噬菌体,保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号为:CGMCC NO.45080,保藏日期为:2022年02月09日,保藏地址为:北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所,分类命名为噬菌体Halomonas phage。本发明分离鉴定了一株来源于深渊马里亚纳海沟8900米处的新型深渊温和性盐单胞菌噬菌体,是深渊中第一株盐单胞菌溶原性噬菌体,本噬菌体未来可用于研究深渊中的细菌与病毒的相互作用,为研究深渊噬菌体及其应用提供了新的实验材料。
  • 一种猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒纯化方法-202310726223.5
  • 胡静雅;周琳;缪芬芳;沈燕 - 江苏南农高科技股份有限公司
  • 2023-06-19 - 2023-08-18 - C12N7/02
  • 本发明公开了一种猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒纯化方法,涉及病毒纯化技术领域,包括以下步骤:(1)收集猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒液,离心,取上清;(2)向猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒液中添加PEG,搅拌,离心处理,得到沉淀物;(3)将沉淀物添加PBS溶液中,搅拌,得到猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒混合液;(4)对猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒混合液进行多级过滤处理,得到过滤液;(5)将过滤液进行层析色谱纯化处理,经过浓缩,收集纯化物,最后进行过滤处理,即可;本发明提供了一种猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒纯化方法,本发明通过对纯化方法进行了一系列的优化,使得纯化处理后的病毒粒子纯度更高,结构完整,具有良好的免疫原性。
  • 一种流感病毒裂解疫苗原液的制备方法-202310283809.9
  • 郭土敬;王雪云;罗姗;徐江波;梁琳琳;刘永娣;刘依润;赖婵丹;周珊玄 - 深圳市卫光生物制品股份有限公司
  • 2023-03-22 - 2023-07-28 - C12N7/02
  • 本发明公开了一种流感病毒裂解疫苗原液的制备方法,包括以下步骤:S1:在鸡胚尿囊收获液中调节收获液的pH为5.5‑6.5;低温孵育后,加入助滤剂,搅拌均匀;过滤,收集滤过液并调节滤液pH至7.0‑8.0,放置于室温搅拌后,浓缩及洗滤,得到浓缩液;S2:浓缩液经超速离心纯化,经超滤洗滤多倍后,除去蔗糖,得到粗纯的病毒液;S3:在粗纯的病毒液中按比例加入灭活剂后,进行分子筛层析,即获得精纯的病毒液;S4:在精纯的病毒液中加入裂解剂裂解处理,在超滤洗滤去除裂解剂并进一步浓缩后,即得到流感病毒裂解疫苗原液。本发明的制备方法解决了流感病毒疫苗原液制备过程中总体回收率过低、杂蛋白透过率低、病毒纯度差的问题。
  • 一种猪伪狂犬病毒双重超滤系统及纯化方法-201910401463.1
  • 肖龙;徐宏军;杨碧涛;李义星;董婷婷;高杰;王麒文;张敏;姜磊;张孝智 - 青岛蔚蓝生物制品有限公司;青岛蔚蓝生物股份有限公司
  • 2019-05-15 - 2023-07-14 - C12N7/02
  • 本发明涉及一种猪伪狂犬病毒双重超滤系统及纯化方法,属于病毒纯化技术领域。上述猪伪狂犬病毒双重超滤系统包括顺次相连的抗原混合罐、第一浓缩罐和第二浓缩罐;所述抗原混合罐与所述第一浓缩罐之间设置有一级澄清过滤器和二级微滤器;所述第一浓缩罐和第二浓缩罐之间设置有一重超滤器;所述第二浓缩罐的出口设置有二重超滤器;所述猪伪狂犬病毒双重超滤系统还包括与所述抗原混合罐、第一浓缩罐和第二浓缩罐连通的PBS储罐和碱罐,用于对系统进行在线清洗和灭菌。本发明系统能显著减少猪伪狂犬病毒液中的不可溶固形物及可溶性杂蛋白、内毒素等,降低免疫副反应,提高病毒抗原纯度及疫苗成品质量,工艺简洁,成本低廉。
  • 腺相关病毒rAAV9的分离纯化方法-202111619661.9
  • 肖胜杰;皮妮;曾凡星;吴阳 - 武汉汇研生物科技股份有限公司
  • 2021-12-27 - 2023-07-04 - C12N7/02
  • 本发明涉及病毒的分离纯化领域,具体涉及一种腺相关病毒rAAV9的分离纯化方法。该方法包括以下步骤:将包含rAAV9的液相组合物,调节pH至中性后过滤,之后采用肝素亲和层析和凝胶过滤层析两步层析法即可达到rAAV9的分离纯化目的,分离后的rAAV9纯度能够达到95%以上,回收率至少能够达到78%以上,当采用汇研生物Heparin Focurose 6FF作为第一步的纯化介质进行纯化时,其收率能达到96%以上。
  • 纯化逆转录病毒的试剂盒及纯化方法-202310059933.7
  • 柯军;黄家妮;王晓韵;李濛;杨嘉明 - 珠海市丽珠单抗生物技术有限公司
  • 2023-01-17 - 2023-04-18 - C12N7/02
  • 本公开涉及一种纯化逆转录病毒的试剂盒及纯化方法,所述试剂盒包括纯化逆转录病毒的试剂组合,其包括第一淋洗液、第二淋洗液、洗脱液和聚阴离子化合物。采用本公开的纯化层析用组合物及方法,可以增加病毒的载量,将逆转录病毒的层析回收率提高2‑3倍,达到80%及以上;同时显著降低病毒洗脱液中的杂质水平,如HCP的残留量可以降低2‑3倍;洗脱得到的逆转录病毒洗脱液在高盐条件下无需添加其他特殊保护试剂即可保存24h而不失去感染活性;洗脱之后可以直接进行下一步超滤透析,无需先稀释后浓缩的步骤,有效简化操作步骤,缩短处理时间。
  • 一种噬菌体发酵液的处理方法和噬菌体制剂-202211720566.2
  • 冯彦淞;谢晓雨;胡欣;蔡刘体;汪汉成 - 厦门昶科生物工程有限公司
  • 2022-12-30 - 2023-04-14 - C12N7/02
  • 本申请涉及生物工程领域,具体公开了一种噬菌体发酵液的处理方法和噬菌体制剂。噬菌体发酵液的处理方法:对待处理的噬菌体发酵液先进行降温处理再进行升温处理;所述降温处理为将待处理的噬菌体发酵液的温度降至0‑25℃,所述升温处理的温度为35‑70℃。本申请的噬菌体发酵液的处理方法,采取巴氏灭菌理念,通过合理工艺,将巴氏灭菌技术应用于噬菌体发酵液的处理上,在不影响噬菌体含量情况下,最高限度去除发酵液中噬菌体宿主菌。
  • 一种鼠白血病病毒的纯化方法-202211677324.X
  • 殷文静;孙莉洁;薛亚芬;陆海燕;王小瑜 - 苏州良辰生物医药科技有限公司
  • 2022-12-26 - 2023-03-31 - C12N7/02
  • 本发明提供一种鼠白血病病毒的纯化方法。包括如下步骤:(1)采用mustang Q膜层析对鼠白血病病毒粗提液进行初步分离得到病毒初步纯化液;(2)采用蔗糖密度梯度离心对所述的病毒初步纯化液进行二次分离得到病毒二次纯化液;(3)对所述的病毒二次纯化液进行超滤浓缩得到鼠白血病病毒浓缩液。本发明针对白血病病毒特点,将mustang Q层析与蔗糖密度梯度离心法结合,并对操作条件进行优化,有效去除培养液中DNA杂质和蛋白杂质。处理条件温和,对鼠白血病病毒无损伤,更利于保持病毒粒子完整性,且相比现有纯化方法,更加简便,成本更低,更适合指示病毒鼠白血病病毒大规模制备。
  • 一种低MDCK细胞残留DNA流感疫苗原液的制备方法-202310064542.4
  • 王斐;赵永强;姜天;滕跃;王福慧 - 辽宁唯森生物技术有限公司
  • 2023-02-06 - 2023-03-28 - C12N7/02
  • 本发明公开了一种低MDCK细胞残留DNA流感疫苗原液的制备方法,在病毒收获后,对病毒液进行玻璃纤维过滤,并通过限定玻璃纤维的特定孔径为0.6~1.0μm,使破碎的细胞碎片得到有效截流过滤;同时,玻璃纤维化学本质为二氧化硅,二氧化硅表面硅烷醇基团与细胞破碎产生的生物质表面基团可形成大量氢键,虽然两者之间形成的氢作用力较弱,但是数量巨大,可以使细胞破裂产生的DNA等生物质杂质在短时间内牢牢的吸附在二氧化硅表面,实现对收获液进行过滤纯化。
  • 一种促进病毒体外分离的组合物-202211205986.7
  • 张丽燕;邱文英;陈奕帆;邢刚;谢建勇;龚文波;李倩;汤笑语;罗文泽 - 华派生物工程集团有限公司
  • 2022-09-30 - 2023-03-14 - C12N7/02
  • 本发明公开了一种促进病毒体外分离的组合物。该组合物包括以体积比为0.5~1:0.5~2配合使用的A液和B液;其中:A液包括基础液Ⅰ,以及终浓度为50~80mg/mL的大豆蛋白胨和终浓度为20~50mg/mL的葡萄糖;B液包括基础液Ⅱ,以及终浓度为1~5mg/mL的多聚‑L‑赖氨酸和终浓度为150~200μg/mL的胰蛋白酶。本申请中A液与B液混合后,既能增加病毒分离液中的营养提供,又能大大加强病毒粒子与细胞之间的相互吸附作用,从而使PEDV进入细胞的几率更大,大大提升病毒在体外的分离成功率。
  • 紫外强化携播性噬菌体控制高水力流态生物膜生长的方法-202211399869.9
  • 朱亮;陈吉;俞卓栋;谭翼潇;成沛金 - 浙江大学
  • 2022-11-09 - 2023-02-03 - C12N7/02
  • 本发明公开了一种紫外强化携播性噬菌体控制高水力流态生物膜生长的方法,属于水与污水处理领域。该方法按照以下步骤进行:(1)噬菌体前处理与浓缩;(2)噬菌体库构建与保存;(3)紫外光照诱发强化;(4)生物膜控制。该方法从污水处理系统中筛选出具有携播性的噬菌体,能够随载体菌侵入生物膜等生物聚集体,在此基础上通过紫外诱发强化的方式提高噬菌体与其载体菌在宿主菌生物膜的定殖率,从而强化噬菌体控制高水力流态环境下宿主菌生物膜生长,有助于在污水处理、管网等系统中缓解因生物膜引发的膜生物污垢、管网损耗和病原菌传播等问题。
  • 一种腺病毒的纯化方法-202211325087.0
  • 李群龙;刘宽;周羽翕;朱均;吴斌;侯文礼;魏鑫;刘晖 - 成都康华生物制品股份有限公司
  • 2022-10-27 - 2023-01-20 - C12N7/02
  • 本发明公开了一种腺病毒的纯化方法,包括裂解、粗纯和精纯步骤,将获得的病毒收获液经裂解、过滤、经阴离子层析法粗纯获得粗纯液,所述阴离子层析法采用的阴离子填料为NanoGel 50Q或者Diamond Q,平衡缓冲液为10~30mM Tris,200~250mM NaCl,2~4mM MgCl2,pH7.5±0.1,洗脱缓冲液为:10~30mM Tris,340‑360mM NaCl,2~4mM MgCl2,pH8.0±0.1;裂解时,加入终浓度10%体积的裂解液和终浓度10‑15U/ml的核酸酶,裂解液为三羟甲基氨基甲烷:50‑70g/L,聚山梨酯20:80‑120g/L,六水氯化镁:2‑6g/L,pH调至8.0±0.1,裂解和粗纯配合提升了病毒活性。本发明通过对裂解和粗纯的巧妙设置,能够更好的保持腺病毒纯化后的活性。
  • 一种简单、快速、高效的抗原纯化方法-202211329472.2
  • 王进产;李自强 - 洛阳赛奥生物工程技术有限公司
  • 2022-10-27 - 2023-01-13 - C12N7/02
  • 本发明涉及纯化技术领域,且公开了一种简单、快速、高效的抗原纯化方法,包括以下步骤:S1:利用细胞(BHK21细胞)或者PK‑15细胞生产病毒液,接毒后于37℃悬浮培养罐中进行培养;利用CHO细胞、293细胞、SF9细胞、SF21细胞、Highfive细胞、BHK21细胞或者PK‑15细胞生产病毒液或重组的亚单位抗原,病毒感染后于悬浮培养罐中进行培养。S2:待细胞病变达到80%,向步骤1所述悬浮培养罐中添加终浓度为0.1‑5mg/L(m/v)的鱼精蛋白和终浓度为1‑10g/L(m/v)的硅藻土,一种简单、快速、高效的抗原纯化方法,通过利用终浓度为0.1‑5mg/L(m/v)的鱼精蛋白和终浓度为1‑10g/L(m/v)的硅藻土实现纯化和浓缩过滤,改善了传统纯化过程工艺步骤较多,且纯化成本相对较高的弊端,进而提高了病毒分离纯化时低残留、高纯度、高滴度的效果。
专利分类
×

专利文献下载

说明:

1、专利原文基于中国国家知识产权局专利说明书;

2、支持发明专利 、实用新型专利、外观设计专利(升级中);

3、专利数据每周两次同步更新,支持Adobe PDF格式;

4、内容包括专利技术的结构示意图流程工艺图技术构造图

5、已全新升级为极速版,下载速度显著提升!欢迎使用!

请您登陆后,进行下载,点击【登陆】 【注册】

关于我们 寻求报道 投稿须知 广告合作 版权声明 网站地图 友情链接 企业标识 联系我们

钻瓜专利网在线咨询

400-8765-105周一至周五 9:00-18:00

咨询在线客服咨询在线客服
tel code back_top