[发明专利]在丝状真菌宿主细胞中产生多种重组多肽的方法在审
| 申请号： | 201810953356.5 | 申请日： | 2012-08-23 |
| 公开（公告）号： | CN109136114A | 公开（公告）日： | 2019-01-04 |
| 发明（设计）人： | D·亚韦;金绮明 | 申请（专利权）人： | 诺维信股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N1/15 | 分类号： | C12N1/15;C12N15/56;C12N15/80;C12R1/645 |
| 代理公司： | 北京尚诚知识产权代理有限公司 11322 | 代理人： | 顾小曼;周琴 |
| 地址： | 美国加利*** | 国省代码： | 美国;US |
| 权利要求书： | 暂无信息 | 说明书： | 暂无信息 |
| 摘要： | 本发明涉及构建用于产生具有生物活性的多种重组多肽的丝状真菌菌株的方法。本发明还涉及在丝状真菌菌株中产生具有生物活性的多种重组多肽的方法。本发明还涉及表达具有生物活性的多种重组多肽的丝状真菌菌株。 | ||
| 搜索关键词： | 重组多肽 丝状真菌菌株 生物活性 丝状真菌宿主细胞 构建 | ||
【主权项】：
1.一种构建用于产生具有生物活性的多种重组多肽的丝状真菌菌株的方法，其包括：(a)通过向丝状真菌菌株中导入第一串联构建体，通过靶向整合取代内源性第一基因，所述第一串联构建体包含(i)所述第一基因的同源5’区、其同源侧翼区或其组合，(ii)一个或多个第一可选择性标记物，(iii)与第一启动子和第一终止子可操作连接的编码具有生物活性的第一多肽的第一多核苷酸，(iv)与第二启动子和第二终止子可操作连接的编码具有生物活性的第二多肽的第二多核苷酸，和(v)所述第一基因的同源3’区、其同源侧翼区或其组合；(b)通过向所述丝状真菌菌株中导入第二串联构建体，通过靶向整合取代内源性第二基因，所述第二串联构建体包含(i)所述第二基因的同源5’区、其同源侧翼区或其组合，(ii)一个或多个第二可选择性标记物，(iii)与第三启动子和第三终止子可操作连接的编码具有生物活性的第三多肽的第三多核苷酸，(iv)与第四启动子和第四终止子可操作连接的编码具有生物活性的第四多肽的第四多核苷酸，和(v)所述第二基因的同源3’区、其同源侧翼区或其组合；或(c)(a)和(b)的组合。
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- 本发明涉及基因工程领域，具体涉及一种提高里氏木霉纤维素酶酶活的方法。包括在里氏木霉中表达外源的β‑葡萄糖苷酶基因NfBgl3A的步骤。本发明通过在里氏木霉中表达异源β‑葡萄糖苷酶，获得了纤维素酶酶活显著提高的转化子。转化子在MM‑Avicel中培养6天后，其纤维素酶的滤纸酶活0.18U/ml，较出发菌株分别提高了3.7倍。CMC酶活0.40U/ml，较出发菌株分别提高了2.9倍。
- 一种灵芝酸高产工程菌株kmust-VGB-1-201510645175.2
- 徐军伟;张德怀;李焕军;韩李梁 - 昆明理工大学
- 2015-10-09 - 2019-04-12 - C12N1/15
- 本发明公开一种灵芝酸高产工程菌株kmust‑VGB‑1，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为CGMCC NO.11301，本发明提供的灵芝工程菌，是通过选用灵芝强启动子P‑gpd表达透明颤菌血红蛋白VGB基因，得到高产灵芝酸灵芝工程菌kmust‑VGB‑1；通过摇瓶发酵实验表明，该菌在其细胞生长不受影响的情况下，VGB转化子菌株产单体灵芝酸GA‑Me，GA‑T，GA‑Mk，GA‑S分别是WT菌株的3.1，3.2，2.1，3.6倍，因此，本高产菌株可以作为生产灵芝酸的工程菌株，具有广泛的应用前景。
- GSP亚基蛋白在调控里氏木霉胞外蛋白分泌量中的应用-201610212456.3
- 刘刚;马成成;王娟 - 深圳大学
- 2016-04-07 - 2019-04-02 - C12N1/15
- 本发明提供了里氏木霉GSP亚基蛋白过表达在提高里氏木霉胞外蛋白分泌量中的应用。还提供了一种提高里氏木霉胞外蛋白分泌量的方法，所述方法包括构建过表达里氏木霉GSP亚基蛋白的重组里氏木霉的步骤；还进一步提供了一种构建过表达里氏木霉GSP亚基蛋白的重组里氏木霉的方法和由该方法获得的重组里氏木霉。
- 出芽短梗霉alb1基因敲除突变株及其应用-201611121449.9
- 张金华;刘飞;朱希强;张林军;郝荣华;袁超;张祥奎;侯重文;张秀华;凌沛学 - 山东省药学科学院;山东福瑞达医药集团有限公司
- 2016-12-08 - 2019-03-26 - C12N1/15
- 本发明公开了一株出芽短梗霉alb1基因敲除突变株，是将出芽短梗霉菌株中的alb1基因的全部或部分编码基因敲除，替换为潮霉素B抗性基因盒。所述潮霉素B抗性基因盒包含：出芽短梗霉转录延长因子启动子PTEF和潮霉素B抗性基因HygR；所述出芽短梗霉转录延长因子启动子PTEF的序列如序列表中SEQ ID NO.2所示；所述潮霉素B抗性基因序列hygR序列如序列表中SEQ ID NO.3所示。将本发明所述突变株用于微生物多糖发酵生产，该突变株不产生黑色素，可显著提高纯化过程中多糖收率和多糖品质。
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