[发明专利]曼氏无针乌贼胚胎整体原位杂交的方法在审
| 申请号： | 201810927830.7 | 申请日： | 2018-08-15 |
| 公开（公告）号： | CN109055497A | 公开（公告）日： | 2018-12-21 |
| 发明（设计）人： | 柳意樊;刘炳舰;张建设;景斐;夏立萍 | 申请（专利权）人： | 浙江海洋大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6841 | 分类号： | C12Q1/6841 |
| 代理公司： | 杭州浙科专利事务所(普通合伙) 33213 | 代理人： | 吴秉中 |
| 地址： | 316000 浙江省*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明公开了曼氏无针乌贼胚胎整体原位杂交的方法，属于头足类胚胎整体原位杂交技术领域，原位杂交的方法包括组织复水、通透处理、固定、预杂交和杂交、杂交后洗涤、封闭、抗体、显色，通透处理步骤为：将复水后的去膜胚胎置于含蛋白酶K和水杨酸溶液中，消化处理胚胎；固定步骤为：将通透处理过的胚胎浸入含有苏氨酸的PFA‑PBS溶液中，室温固定，然后用1×PBST溶液洗涤。有益效果为：本发明原位杂交的方法步骤少，简单易行，能增加探针与靶核酸结合的机会，阻止染色体收缩，提高杂交信号，同时固定渗透效果较佳，能避免RNase污染，提高原位杂交的结果的可靠性。 | ||
| 搜索关键词： | 胚胎 整体原位杂交 原位杂交 通透 曼氏无针乌贼 复水 洗涤 杂交 水杨酸溶液 固定步骤 消化处理 杂交信号 浸入 蛋白酶K 靶核酸 苏氨酸 预杂交 染色体 抗体 去膜 探针 显色 收缩 封闭 污染 | ||
【主权项】：
1.曼氏无针乌贼胚胎整体原位杂交的方法，包括组织复水、通透处理、固定、预杂交和杂交、杂交后洗涤、封闭、抗体、显色，其特征在于：所述通透处理步骤为：将复水后的去膜胚胎置于含蛋白酶K和水杨酸溶液中，消化处理胚胎。
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- 本发明公开了一种用于三维无创肿瘤早筛的试剂盒，涉及诊断试剂技术领域。试剂盒中血样采集模块包括至少三个采血管及采血管插孔；细胞检测模块包括样本密度分离液、第一缓冲液、第一清洗液、抗原修复缓冲液、组织固定液、样本稀释液、第二缓冲液、血细胞分析用稀释液、FISH探针、第二清洗液、荧光标记抗体，荧光标记抗体为荧光标记抗人白细胞表面标示物抗体CD31、CD45、CD54；核酸检测模块包括寡核苷酸双荧光标记Taqman探针、特异性引物、荧光定量qPCR反应体系试剂；蛋白检测模块包括96孔反应板、第三缓冲液、标记混合抗体溶液、微球悬液、微球溶液、终止液、采血管、载玻片。该试剂盒可检测肿瘤细胞类型丰富，检测精度高，癌前病变阶段即可检出游离癌性成分。
- 一种改良的哺乳动物精子mRNA定位方法-201810965027.2
- 高庆华;赵建清;王杰;韩春梅;李娜 - 高庆华;赵建清;王杰;韩春梅;李娜
- 2018-08-20 - 2019-02-19 - C12Q1/6841
- 本发明公开了一种改良的哺乳动物精子mRNA定位方法，特别是涉及一种改良的FISH技术。包括下列步骤：精子标本制备；探针制备；精子FISH，标本杂交前处理，变性，杂交，杂交后洗涤与显色。采用该方法可提高精确性，并且防污染，操作简单，成本较低。
- EBER原位杂交检测用探针及试剂盒-201811313293.3
- 吴丽玲 - 泰普生物科学（中国）有限公司
- 2018-11-06 - 2019-02-15 - C12Q1/6841
- 本发明一种EBER原位杂交检测用探针及试剂盒，其中，EBER原位杂交检测用探针包括检测EBER‑1的原位杂交探针，其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明的EBER原位杂交检测试剂盒具有检测信号强度和灵敏度高的优点。
- 用于荧光原位杂交测序检测SNP的核苷酸分子组合及应用-201811231943.X
- 王鹤尧;孙美娜 - 北京华夏时代生物工程有限公司
- 2018-10-22 - 2019-02-01 - C12Q1/6841
- 本发明公开了一组用于荧光原位杂交测序检测SNP的核苷酸分子组合及在肿瘤药物治疗相关基因UGT1A1、DPYD和XRCC1的SNP检测中应用的方法，所述方法包括提取待测样本的DNA，并以DNA为模板进行单链化衍生，然后同时加入不同荧光标记的第一测序探针和第二测序探针与单链化衍生物进行杂交，最后对杂交结果进行判读。所述方法精准性高，稳定性好，快速，安全，易自动化操作，可在一个单链化衍生和杂交反应循环中完成对单核苷酸多态性的精准分型，从而了解受试者的基因型，能够为预防因危险因素引起的疾病及临床个体化用药提供指导。
- 一种豆科植物根瘤固氮共生体固氮能力的快速评估方法-201410367320.0
- 徐明恺;邹谨;张惠文;李旭;张成刚 - 中国科学院沈阳应用生态研究所
- 2014-07-29 - 2019-01-25 - C12Q1/6841
- 本发明涉及了一种豆科植物根瘤固氮共生体系固氮效率的快速评估方法。主要步骤为：一)植物‑根瘤菌转录本信息共提取；二)固氮酶表达原位检测；三)以固氮酶基因nifH的相对转录丰度来评估大豆根瘤固氮共生体的固氮能力。本发明的优势在于：(1)操作步骤简单、方便；(2)可用于田间快速、实时检测固氮水平。
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