[发明专利]结合蒙脱石封闭活性炭的BCAC-EMA-Rti-LAMP的活菌检测方法

摘要

本发明提供一种结合蒙脱石封闭活性炭的EMA‑Rti‑LAMP的活菌检测方法，先以蒙脱石封闭活性炭去除检测样品中干扰PCR聚合酶活性的抑制剂，然后加入叠氮溴化乙锭进行反应，再对经过叠氮溴化乙锭处理的样品提取DNA模板；再进行Rti‑LAMP扩增反应，根据反应结果获取活菌数量。本发明的检测方法通过BCAC消减检测样品中干扰PCR聚合酶活性的抑制剂，结合EMA‑Rti‑LAMP检测方法对非预增菌的经过前处理精制的检测样品，能够在5h内从食品样品中检测低至5CFU/g活的E.coli O157:H7，适用于肉类样品和蔬菜类样品，也可应用于其他类食品样品，具有操作简便、耗时短、快速可靠、灵敏度高。

主权项

1.一种结合蒙脱石封闭活性炭的BCAC‑EMA‑Rti‑LAMP的活菌检测方法，所述方法包括以下步骤：(1)以蒙脱石封闭活性炭去除检测样品中干扰PCR聚合酶活性的抑制剂，得到精制检测样品；(2)向所述精制检测样品中加入叠氮溴化乙锭进行反应；(3)对经过叠氮溴化乙锭处理的样品提取DNA模板；(4)对步骤(3)的DNA模板进行Rti‑LAMP扩增反应，根据反应结果获取活菌数量。