[发明专利]棕榈酰辅酶A的生物化学合成及纯化方法在审
| 申请号： | 201810190829.0 | 申请日： | 2018-03-08 |
| 公开（公告）号： | CN108504705A | 公开（公告）日： | 2018-09-07 |
| 发明（设计）人： | 徐建国;施俊伟;叶建峰;熊宁 | 申请（专利权）人： | 北京利德曼生化股份有限公司 |
| 主分类号： | C12P19/32 | 分类号： | C12P19/32;C07H19/207;C07H1/06 |
| 代理公司： | 北京思元知识产权代理事务所(普通合伙) 11598 | 代理人： | 余光军 |
| 地址： | 100176 北*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种棕榈酰辅酶A的生物化学合成及纯化方法。本发明所述棕榈酰辅酶A的生物化学合成方法，包括：在磷酸钾缓冲液中依次加入ATP钠盐、辅酶A、棕榈酸和乙酰辅酶A合成酶，调整pH，定容，进行反应，收集反应产物即得。本发明进一步对反应产物进行纯化，包括：将反应产物过镍柱除去蛋白，将除蛋白后的产物加入乙醚萃取，分离出的水相用离子交换树脂除去无机杂质，所得收集液冻干，得到棕榈酰辅酶A粗品；将该粗品加入到无水乙醇中搅拌，过滤出固体，真空干燥即得。本发明通过体外酶促反应合成棕榈酰辅酶A，只需一步生物化学反应，反应时间短，效率高，对产物纯化步骤简单可控，产品纯度较高，为棕榈酰辅酶A的规模化生产奠定基础。 | ||
| 搜索关键词： | 棕榈酰辅酶A 生物化学 合成 粗品 乙酰辅酶A合成酶 离子交换树脂 磷酸钾缓冲液 生物化学反应 体外酶促反应 反应时间短 规模化生产 产品纯度 产物纯化 无机杂质 无水乙醇 乙醚萃取 除蛋白 收集液 棕榈酸 辅酶A 定容 冻干 可控 镍柱 过滤 蛋白 | ||
【主权项】：
1.一种棕榈酰辅酶A的生物化学合成方法，其特征在于，包括以下步骤：在磷酸钾缓冲液中依次加入ATP钠盐、辅酶A、棕榈酸和乙酰辅酶A合成酶，调整pH，定容，得到反应混合液，进行反应，收集反应产物，即得。
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- 阮传明;黄伟;卢志荣 - 广西浦北制药厂
- 2015-05-28 - 2015-07-29 - C12P19/32
- 本发明公开了一种环保的三磷酸腺苷二钠的生产方法，现有技术中，活性剂的选择是使用甲苯，甲苯是有毒物质，对人有毒害作用，而且甲苯蒸汽能与空气形成爆炸性混合物，对厂房、设备、设施有更高要求，增加额外投入，同时，甲苯不溶于水，增加后期处理难度。而本发明是使用苯扎溴铵作为活性剂，苯扎溴铵是一种消毒剂，无毒无害，且不对后期处理增加难度，是合理的替代物。
- 5’-鸟苷酸的生产方法-201410707725.4
- 深田宽朗;浅原贵之;桥口贤一 - 味之素株式会社
- 2010-08-10 - 2015-04-01 - C12P19/32
- 本发明涉及5’-鸟苷酸的生产方法。使用微生物高效率地生产5’-鸟苷酸(GMP)。使XMP与经过修饰而使得nagD基因无法正常发挥功能、且经过修饰而增大了GMP合成酶的活性的细菌反应来得到GMP。
- 氧化型辅酶I制备方法-201410792996.4
- 郁庆明 - 郁庆明
- 2014-12-20 - 2015-04-01 - C12P19/32
- 本发明涉及一种氧化型辅酶I制备方法，所述方法是将核糖先进行溴代，再和烟酰胺进行偶联，得到烟酰胺核糖；再用基因工程的方法，在大肠杆菌里表达人NRK1和NNMT酶，用镍离子螯合柱纯化得到二个酶；在缓冲体系内，以合成的烟酰胺核糖为底物，加入二种酶和ATP反应，即可制备氧化型辅酶I。本发明是一个低成本的工业化制备氧化型辅酶I的方法。
- 一种利用枯草芽孢杆菌生产环磷腺苷的方法-201310311307.9
- 朱晓宏;朱晓慧;魏薇;单志萍;孟妤;陆茂林;杨晓伟;司竑飞 - 江苏省微生物研究所有限责任公司
- 2013-07-24 - 2015-02-11 - C12P19/32
- 本发明公开了一种生产作为药物和生化试剂有用的环磷腺苷的工业方法，编码具有腺苷酸环化酶活性的蛋白并可用于上诉生产方法的基因，含有该基因的重组DNA，含有该重组DNA的新菌株，和使用该新菌株生产环磷腺苷的方法。
- 一种光可控ATP生物合成体系及其制备方法-201410264588.1
- 李峻柏;冯熙云;蔡鹏;贾怡;费进波;董伟光;李洁龄 - 中国科学院化学研究所
- 2014-06-13 - 2014-09-24 - C12P19/32
- 本发明公开了一种光可控ATP生物合成体系及其制备方法。该方法包括如下步骤：(1)制备光系统Ⅱ微球或光系统Ⅱ胶囊；(2)将所述光系统Ⅱ微球或所述光系统Ⅱ胶囊分散到含有二醛交联剂的2-(N-吗啡啉)乙磺酸缓冲液中进行吸附；然后继续分散于含有光系统Ⅱ的2-(N-吗啡啉)乙磺酸缓冲液中进行吸附；(3)将经步(2)处理后的光系统Ⅱ微球或光系统Ⅱ胶囊分散到含有ATP合成酶的蛋白脂质体溶液中进行吸附，即得到所述光可控ATP生物合成体系。本发明中，光系统II在3D(微纳米球和微纳米胶囊)表面固定，增大作用面积和适用性；尺寸、结构和功能可调控：可根据实际需要，通过选择不同的合成方法任意改变球或胶囊的尺寸、结构并包裹额外的功能性囊壁成分。
- 次黄嘌呤核苷酸的生产方法-201310106699.5
- 应汉杰;曹治;陈勇;陈晓春;吴菁岚;谢婧婧 - 南京工业大学
- 2013-03-28 - 2013-12-18 - C12P19/32
- 本发明提供一种次黄嘌呤核苷酸的生产方法，所述方法包括采用固定于阴离子树脂的腺苷酸脱氨酶催化腺苷酸生成次黄嘌呤核苷酸。该方法以腺苷酸为底物，原料供应充足，而且对设备要求低，分离提取方便，能够实现次黄苷酸的半连续生产，底物方便易得且转化彻底，成本较低。
- 专利分类
