[发明专利]一种能提高耐热脂肪酶产量的重组工程菌及其构建方法和应用有效
| 申请号： | 201711220171.5 | 申请日： | 2017-11-29 |
| 公开（公告）号： | CN108085308B | 公开（公告）日： | 2020-07-03 |
| 发明（设计）人： | 管武太;李力浪;吴炜坤;邓子潇;张世海 | 申请（专利权）人： | 华南农业大学 |
| 主分类号： | C12N9/20 | 分类号： | C12N9/20;C12N15/81;C12N1/19;C12R1/84 |
| 代理公司： | 广州市华学知识产权代理有限公司 44245 | 代理人： | 刘瑜;苏运贞 |
| 地址： | 510642 广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种能提高耐热脂肪酶产量的重组工程菌及其构建方法和应用。该重组工程菌是通过将突变脂肪酶的重组质粒经酶切线性化后转化毕赤酵母GS115感受态细胞，再将线性化的pAO815‑PDI重组质粒二次转化到带有突变脂肪酶基因的毕赤酵母GS115感受态细胞获得；所述的突变脂肪酶为脂肪酶5s或脂肪酶6s；其中，脂肪酶5s的编码核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示；脂肪酶6s的编码核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示。本发明中采取于毕赤酵母GS115中共表达分子伴侣PDI的策略，提供产量优化的耐热脂肪酶表达菌株，以缓解引入多对二硫键导致的表达水平较低的问题，特别适合在工业上进行应用。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 提高 耐热 脂肪酶 产量 重组 工程 及其 构建 方法 应用 | ||
【主权项】：
1.一种能提高耐热脂肪酶产量的重组工程菌，其特征在于：是通过将突变脂肪酶的重组质粒经酶切线性化后转化毕赤酵母GS115感受态细胞，再将线性化的pAO815-PDI重组质粒二次转化到带有突变脂肪酶基因的毕赤酵母GS115感受态细胞获得。
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