[发明专利]一种通过诱导不定芽获得大花萱草再生植株的方法

摘要

一种通过诱导不定芽获得大花萱草再生植株的方法，以大花萱草的根茎幼芽为外植体材料，直接诱导产生不定芽，切分成单株进行增殖培养，获得丛生芽，将丛生芽切分成单株，去除不定芽、愈伤组织及多余的底盘，进行生根培养，得到生根苗，再进行炼苗、移栽，获得大花萱草再生植株。该方法操作简单，缩短了诱导及繁育时间，诱导率高，诱导时间短，生根率高，移栽成活率高，获得的再生植株能够稳定保持母本优良性状，克服了通过愈伤组织途径中后代植株出现变异的弊端，实现大花萱草组培苗的直接再生，是大花萱草工厂化生产的有效途径。

主权项

1.一种通过诱导不定芽获得大花萱草再生植株的方法，包括以下步骤：1)外植体选择、预处理选取长度为1‑2cm的根茎幼芽作为外植体，去除根系及叶片，消毒，无菌水浸洗，吸干水分，除去基部老化组织；2)诱导不定芽将经过预处理的外植体，接种于诱导培养基中，诱导培养28‑35天，得到不定芽；其中，培养条件为：温度23‑27℃，湿度60‑80％，光照10‑12h/d，光照强度为1500‑2500LX；3)增殖培养将步骤2)中获得的不定芽切分为单株，切去多余的基部组织以及愈伤组织，接种至增殖培养基中，培养28‑35天，得到丛生芽；其中，培养条件为：温度23‑27℃，湿度60‑80％，光照10‑12h/d，光照强度为1500‑2500LX；4)生根培养将步骤3)中的丛生芽切分成单株，去除不定芽、愈伤组织及老化的基部，接种于生根培养基，进行生根培养，得到生根苗；培养条件为：温度23‑27℃，湿度60‑80％，光照10‑12h/d，光照强度为1500‑2500LX；5)炼苗、移栽将步骤4)中的生根苗取出，清洗，根系蘸杀菌剂，先在温室中弱光炼苗10～15天，温度20～25℃，再于自然光照下，炼苗10～20天，获得大花萱草再生植株。