[发明专利]一种大花萱草叶片组织培养的方法

摘要

本发明涉及一种大花萱草叶片组织培养的方法，其具体步骤为，以大花萱草露地生长的幼嫩内层叶片为外植体，经过消毒处理，接种于诱导培养基中诱导形成愈伤组织，经愈伤组织分化增殖、芽诱导和生根诱导，形成大花萱草完整小苗，将大花萱草小苗移栽到基质中，长成正常的大花萱草植株。本发明应用萱草叶片进行组织培养，克服了萱草只能在花期采用花部器官进行组织培养扩繁的限制，可实现周年繁殖，有利于进行良种快繁，丰富园林应用中萱草的种类。

主权项

一种大花萱草叶片组织培养的方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：1)选择抽出新叶且叶龄小于12天、叶片数量较多的大花萱草单株，截取茎尖以上叶龄较一致的幼嫩叶片，作为外植体，对所述外植体进行消毒处理；2)愈伤组织的诱导：将消毒后的外植体接种到诱导培养基中，至形成愈伤组织，所述诱导培养基的配方为：MS培养基中添加0.1‑0.2mg/L NAA、1.0mg/L 6‑苄氨基嘌呤；3)芽诱导：将所述愈伤组织接种到幼芽培养基中，在温度25℃，光照强度2000‑3000lx，光照时间12h/d,培养至愈伤组织出芽，形成再生苗；所述幼芽培养基的配方为：MS培养基中添加0.1‑0.2mg/L NAA、1.0mg/L 6‑苄氨基嘌呤；4)生根培养：将所述再生苗转入生根培养基中，在温度25℃，光照强度2000‑3000lx，光照时间12h/d的条件下,培养至再生苗基部出现白色短根并长出完整根系，得到大花萱草小苗，所述生根培养基的配方为：1/2MS培养基中添加0.1mg/L萘乙酸、3％蔗糖、0.6％琼脂，所述1/2MS培养基为将MS培养基中的大量元素浓度减半；5)植株移栽：将所述大花萱草小苗栽到栽培基质中，温室炼苗，获得大花萱草幼苗。