[发明专利]一种用于p53蛋白的荧光检测剂及其制备方法和应用

摘要

本发明公开了一种用于p53蛋白的荧光检测剂，包括磁性纳米粒子、双链DNA、以及包覆在磁性纳米粒子表面用于与双链DNA连接的功能层；所述的双链DNA由DNA‑1单链和DNA‑2单链杂交得到；所述的DNA‑1为羧基寡核苷酸探针，序列为：COOH‑(CH₂)₆‑TTT TTT TCC GGG CAT GCC CGG CAT TGC‑3′；所述的DNA‑2为DNA‑1的部分互补序列，序列为：5′‑GGG CAT GCC C‑3′。本发明还公开了所述的荧光检测剂的制备方法和在检测野生型p53蛋白中的应用。该制剂的制备成本低，使用该制剂能够敏感、快速、精确的捕获p53蛋白，实现p53蛋白的超灵敏、高选择性、高准确度的检测，而且检测限低，能够定量分析检测正常细胞和癌细胞裂解液中的p53蛋白，可用于临床癌症诊断和癌症早期发现。

主权项

1.一种用于p53蛋白的荧光检测剂的应用，其特征在于，将所述的荧光检测剂用于野生型p53蛋白的检测：检测过程为：将待测试样与所述的荧光检测剂共同孵育、反应，随后加入荧光颜料标记的DNA‑3，进行交换反应，反应结束后测定荧光发射差值，定量待测试样中p53蛋白含量；所述的荧光检测剂包括磁性纳米粒子、双链DNA、以及包覆在磁性纳米粒子表面用于与双链DNA连接的功能层；所述的双链DNA由DNA‑1单链和DNA‑2单链杂交得到；所述的DNA‑1为羧基寡核苷酸探针，序列为：COOH‑(CH₂)₆‑TTT TTT TCC GGG CAT GCC CGG CAT TGC‑3′；所述的DNA‑2为DNA‑1的部分互补序列，序列为：5′‑GGG CAT GCC C‑3′；所述的DNA‑3为DNA‑1互补序列；DNA‑3序列为：Cy5‑5′‑GCA ATG CCG GGC ATG CCC GCA‑3′ 。