[发明专利]一种细胞中内源性表达RNA聚合酶的核酸构建物有效
申请号: | 201710768550.1 | 申请日: | 2017-08-31 |
公开(公告)号: | CN109423496B | 公开(公告)日: | 2023-09-15 |
发明(设计)人: | 郭敏;代田纯;薛银鸽;李海洋;王海鹏;柴智;刘帅龙;于雪 | 申请(专利权)人: | 康码(上海)生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N15/81 | 分类号: | C12N15/81;C12N1/19;C12R1/645 |
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地址: | 201321 上海市*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: |
本发明提供了一种细胞中内源性表达RNA聚合酶的核酸构建物,具体地,发现了一种可大幅度增强蛋白质翻译效率的新型核酸构建物,本发明的核酸构建物由具有特定启动强度的启动子(如RNR2、ADH1、GAPDH、TEF1、PGK1、SED1等)和RNAP(如T7RNAP、T3RNAP、T4RNAP、T5RNAP等)蛋白的编码序列构成,在酵母体外蛋白质合成体系中应用本发明的核酸构建物,所合成的荧光素酶活性的相对光单位值(RLU)非常高,可达到与外源加入T7RNAP相同效果。可高达6.6×10 |
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搜索关键词: | 一种 细胞 内源 表达 rna 聚合 核酸 构建 | ||
【主权项】:
1.一种核酸构建物,其特征在于,所述的构建物具有从5’至3’的式I结构:Z1‑Z2 (I)式中,Z1、Z2分别为用于构成所述构建物的元件;各“‑”独立地为键或核苷酸连接序列;Z1为启动子元件,所述启动子元件选自下组:RNR2、ADH1、GAPDH、TEF1、PGK1、SED1、或其组合;Z2为RNP蛋白的编码序列;并且,所述Z1、Z2来源于酵母。
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