[发明专利]一种基于功能化金属有机框架材料的电致化学发光传感器

摘要

本发明公开了一种基于金属有机框架材料的电致化学发光传感器，利用Hg²⁺诱发三（2,2'‑联吡啶）钌功能化金属有机框架材料分解释放三（2,2'‑联吡啶）钌的ECL检测microRNA。RuMOFs可以被Hg²⁺选择性和敏感地分解，释放大量的Ru(bpy)₃²⁺，产生强大的ECL信号。此外，为了负载大量RuMOFs，目标回收过程不需要核酸酶的帮助，仅仅通过链置换过程就能实现。基于离子响应材料的分解和链置换过程，建立了一种用于检测microRNA的超敏ECL方法。所提出的方法在10 fmol/L~10μmol/L miRNA‑155的检测范围内，检测限为3 fmol/L。所提出的传感器具有灵敏度高，特异度高，稳定性好等良好的分析性能分，为临床应用中microRNA的敏感检测提供了前景。

主权项

1.一种基于功能化金属有机框架材料的电致化学发光传感器，其特征是，所述电致化学发光传感器用于microRNA的检测，其制备方法包括以下步骤：/n（1）利用电化学沉积方式在玻碳电极的表面沉积Au纳米粒子层；/n（2）发夹结构DNA-H1链固定在步骤（1）处理得到的电极表面，然后用封闭剂对电极进行封闭；/n（3）不同浓度的目标链microRNA和一定浓度的单链DNA-H2的混合液滴加到步骤（2）中得到的电极表面；/n（4）将链端羧基化的单链DNA-I修饰在氨基化的RuMOFs表面，滴加至步骤（3）得到电极表面，在一定条件下测量其ECL强度；/n（5）向步骤（4）体系中加入一定浓度的Hg²⁺，测定其ECL强度，对比步骤（4）与步骤（5）的ECL强度，建立不同浓度的目标microRNA与ECL信号强度关系；/nDNA-H1链、单链DNA-H2和单链DNA-I的核苷酸序列分别如序列表中序列1、序列3和序列4所示；/n所述的氨基化的RuMOFs材料制备的具体步骤如下：/n0.2 mmol腺嘌呤，0.4 mmol 4′4-联苯二甲酸，0.45 mmol六水合硝酸锌和0.35 mmol六水合三（2,2′-联吡啶）氯化钌（Ⅱ）分别加入到由2 mmol硝酸，20 mL二甲基甲酰胺和3 mL二次蒸馏水组成的混合溶液，搅拌均匀置于反应釜中，放入烘箱，110 ºC条件下放置12 h，室温下自然冷却，将获得的产物在转速1000 rpm下离心5 min，用二甲基甲酰胺和二次蒸馏水分别洗涤3次，放入烘箱中70 ºC干燥4 h，得到的纯净的RuMOFs，分散在2 mL乙醇中并用0.4mL的3-氨丙基三乙氧基硅烷处理，搅拌6 h，将悬浮液离心并用乙醇重复洗涤4次，得到氨基官能化的4 μmol/L RuMOFs。/n