[发明专利]一种通过固体动态发酵技术制备高活性人参皂苷的方法

摘要

本发明公开了一种通过固体动态发酵技术制备高活性人参皂苷的方法，尤其是一种以人参属植物的植株组织为固体培养基、接入经过筛分的能够产生人参皂苷水解酶的好氧型单一菌株，经过动态发酵，制备富含C‑K、F2的高活性参制品；该参制品经过提取、分离，可以制备C‑K、F2的混合皂苷或单体皂苷，也可以利用从高活性人参制品中提取的水解酶，进一步制备C‑K、Rh2、二醇类皂苷元的混合物或单体。该方法直接以人参属植物的植株组织为原料进行发酵，既不需要制备原二醇类皂苷PPD、也不需要专门制备人参皂苷糖苷酶，即可获得高活性的低糖基人参皂苷，工艺步骤少、生产成本低、无污染，适合工业化生产。

主权项

一种通过固体动态发酵技术制备高活性人参皂苷的方法，其特征在于，包括以下步骤：1)以人参属植物的植株组织为主要原料，并添加麦麸、麦草、谷物粉、稻壳中的至少一种，以及水和其他诱导物，充分搅拌、混匀后，迅速加热至100℃以上，并保持2～30分钟进行灭菌，然后迅速冷却至45℃以下；2)灭菌后，接入菌株，菌株为经过分离筛选的能够产生人参皂苷水解酶的单一菌株，接菌量为培养基总重量的0.001％～50％；通过转动发酵罐充分搅拌培养基，并通入无菌空气；先保温培养10～36h，待微生物繁殖产热后，再降温继续培养；发酵过程中，培养基根据菌株特性维持在最适温度范围内，即26～30℃；动态发酵培养3～15天后，发酵产物即为富含C‑K、F2的高活性参制品；3)上步获得的发酵产物内添加低级醇浸泡、提取，即得低糖基人参皂苷的提取液；提取液经分离纯化、真空减压浓缩、真空或喷雾干燥后，获得高活性的稀有人参皂苷C‑K、F2的混合物或单体；4)提取过后的滤渣，用水或缓冲液提取水解酶；5)利用第4步提取的水解酶，可以对第3步提取的人参皂苷进行转化，生成C‑K或(和)Rh2；也可以利用水解酶进一步水解C‑K、Rh2生成二醇类皂苷元；也可以水解原二醇类皂苷PPD制备低糖基皂苷、二醇类皂苷元。