[发明专利]一种多基因组装载体系统及其多基因组装方法

摘要

本发明公开了一种多基因组装载体系统及其多基因组装方法。该系统包括1类接受载体、2类供给载体、以及可选择使用的能发生筛选标记自删除的供给质粒。该系统利用Cre/loxP重组系统和两组突变型loxP的不可逆重组位点，在Cre酶作用下，以野生型loxP位点的重组来实现供给载体整合到接受载体中，然后其一组突变型loxP的不可逆重组自动删除供给载体的骨架，只留下目的基因在接受载体上；重复2类供给载体交替与接受载体的组装，就能实现多基因的快速组装。本发明是目前最简单高效的多基因载体系统。因此本发明对重要的、复杂生物合成途径和重要农艺性状的多基因遗传工程操作提供了可操作的技术平台，具有重要的应用价值。

主权项

一种多基因组装载体系统，其特征在于：命名为TGSII，包括1类接受载体、2类供给载体、以及可选择使用的能发生筛选标记自删除的供给质粒；2类供给载体分别命名为供给载体I和供给载体II；接受载体具有如SEQ ID NO.1所示的loxP/I‑Sce I/loxP1R核心元件DNA序列；供给载体I具有如SEQ ID NO.2所示的loxP/PI‑Sce I/loxP2R/MCS/loxP1L/I‑Sce I核心元件DNA序列：供给载体II具有如SEQ ID NO.3所示的loxP/I‑Sce I/loxP1R/MCS/loxP2L/PI‑Sce I核心元件DNA序列。