[发明专利]细胞色素P450、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸-细胞色素P450还原酶及其应用

摘要

本发明涉及细胞色素P450、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸‑细胞色素P450还原酶及其应用。本发明揭示了一组新的、在萜类化合物羟基化催化及灵芝三萜合成中发挥作用的细胞色素P450(P450 GP01和P450 GP02)，以及与之配合完成羟基化催化的一种烟酰胺腺嘌呤二核苷酸‑细胞色素P450还原酶(GLCPR)。更具体地，本发明的细胞色素P450 GP01能特异和高效地催化四环三萜化合物底物的C‑23位的羟基化；本发明的细胞色素P450 GP02羟基化灵芝酸DM和灵芝酸TR生成多种产物；本发明的GLCPR能够与细胞色素P450配对，协助细胞色素P450发挥羟基化活性。

主权项

1.一种催化四环三萜化合物的羟基化的方法，其特征在于，所述方法包括：利用细胞色素P450催化四环三萜化合物，获得羟基化的四环三萜化合物；其中，所述的细胞色素P450选自下组：(a)具有SEQ ID NO:18或SEQ ID NO:19所示氨基酸序列的多肽；(b)将(a)中任一多肽经过一个或多个氨基酸残基的取代、缺失或添加而形成的、并具有(a)多肽的活性的由(a)衍生的多肽；(c)氨基酸序列与(a)中任一多肽所示氨基酸序列的同源性≥85％，并具有(a)多肽的活性的衍生的多肽；(d)序列中含有(a)或(b)或(c)所述多肽序列的衍生多肽；(e)在(a)或(b)或(c)所述多肽序列中添加标签序列、信号序列或分泌信号序列后所形成的多肽。