[发明专利]iPS细胞分化成内胚层祖细胞的无血清诱导培养基及诱导方法

摘要

本发明公开了一种iPS细胞分化成内胚层祖细胞的无血清诱导培养基及诱导方法。该无血清诱导培养基包括第一阶段培养基、第二阶段培养基和第三阶段培养基。通过使用上述iPS细胞分化成内胚层祖细胞的无血清诱导培养基及诱导方法可以将iPS细胞定向诱导分化为内胚层祖细胞，从而为iPS诱导分化为成体的各个细胞提供了技术支持。同时该无血清诱导培养基及诱导方法均没有用到血清，从而有效地避免了动物源性病原体带来的风险，提高了临床应用的安全性。

主权项

1.一种用于诱导iPS细胞分化成内胚层祖细胞的试剂盒，其特征在于，包括第一阶段培养基、第二阶段培养基和第三阶段培养基，所述第一阶段培养基、所述第二阶段培养基以及所述第三阶段培养基均为无血清培养基；其中，所述第一阶段培养基为每500ml基础培养基中添加有终浓度为80‑160ng/ml的Activin A以及终浓度为5‑18ng/ml的HGF；所述第二阶段培养基为每500ml基础培养基中添加有终浓度为8‑25ng/ml的BMP‑4；所述第三阶段培养基为每500ml基础培养基中添加有终浓度为5‑18ng/ml的HGF以及终浓度为15‑28ng/ml的FGF‑2；所述基础培养基为每500ml DMEM/F12培养基中添加有终浓度为0.05‑0.2mmol/l的β巯基乙醇、终浓度为75‑180μg/ml的Wnt3a、终浓度为0.15‑0.7μg/ml的氢化可的松、终浓度为25‑100μg/ml的胰岛素、终浓度为5‑20ng/ml的亚硒酸钠以及终浓度为85‑180μg/ml的转铁蛋白。