[发明专利]2’-氯代喷司他丁和2’-氨基-2’-脱氧腺苷生物合成基因簇及其应用

摘要

本发明涉及马杜拉放线菌ATCC 39365产生的治疗白血病天然产物2’‑氯代喷司他丁和抗支原体病毒、麻疹病毒等RNA病毒天然产物2’‑氨基‑2’‑脱氧腺苷的生物合成基因簇的克隆、测序、分析、功能研究及其应用。整个基因簇共包含13个基因：5个与2’‑氯代喷司他丁合成相关的基因；4个与2’‑氨基‑2’‑脱氧腺苷合成相关的基因；4个与两者转运调节相关的基因。通过对上述生物合成基因的遗传操作可阻断或提高2’‑氯代喷司他丁和2’‑氨基‑2’‑脱氧腺苷的生物合成。本发明所提供的基因及其蛋白可用于该化合物的基因工程、蛋白表达、酶催化反应等,也可以用来寻找和发现可用于医药、工业或农业的化合物、基因、蛋白。

主权项

1.一种2’‑氯代喷司他丁和2’‑氨基‑2’‑脱氧腺苷的生物合成基因簇，其特征在于，所述的基因簇的核苷酸序列为SEQ ID NO: 1中第10898‑25249位所示，其中负责2’‑氯代喷司他丁生物合成的基因，即adaC，adaB，adaA，adaK，adaL共5个基因；负责2’‑氨基‑2’‑脱氧腺苷生物合成的基因，即adaF，adaG，adaJ，adaM共4个基因；负责2’‑氯代喷司他丁和2’‑氨基‑2’‑脱氧腺苷转运和调控的基因adaE，adaD，adaH，adaI共4个基因；具体为：adaE位于SEQ ID NO: 1中第10898‑12337碱基处，编码阳离子转运蛋白，氨基酸序列为SEQ ID NO.2；adaD位于SEQ ID NO: 1中第12392‑13600碱基处，编码MFS转运蛋白，氨基酸序列为SEQ ID NO.3；adaC位于SEQ ID NO: 1中第13672‑14559碱基处，编码ATP磷酸核糖转移酶，氨基酸序列为SEQ ID NO.4；adaB位于SEQ ID NO: 1中第14604‑15308碱基处，编码短链脱氢酶，氨基酸序列为SEQ ID NO.5；adaA位于SEQ ID NO: 1中第15295‑16014碱基处，编码SAICAR合成酶，氨基酸序列为SEQ ID NO.6；adaF位于SEQ ID NO: 1中第16239‑17516碱基处，编码转氨酶，氨基酸序列为SEQ ID NO.7；adaG位于SEQ ID NO: 1中第17509‑18564碱基处，编码脱氢酶，氨基酸序列为SEQ ID NO.8；adaH位于SEQ ID NO: 1中第18593‑20380碱基处，编码ABC转运蛋白，氨基酸序列为SEQ ID NO.9；adaI位于SEQ ID NO: 1中第20402‑22180碱基处，编码ABC转运蛋白，氨基酸序列为SEQ ID NO.10；adaJ位于SEQ ID NO: 1中第22177‑22662碱基处，编码NUDIX水解酶，氨基酸序列为SEQ ID NO.11；adaK位于SEQ ID NO: 1中第22659‑23396碱基处，编码磷酸核糖异构酶A，氨基酸序列为SEQ ID NO.12；adaL位于SEQ ID NO: 1中第23580‑24446碱基处，编码ATP磷酸核糖转移酶，氨基酸序列为SEQ ID NO.13；adaM位于SEQ ID NO: 1中第24455‑25249碱基处，编码磷酸水解酶，氨基酸序列为SEQ ID NO.14。