[发明专利]一种催化木糖的比酶活提高的葡萄糖脱氢酶突变体有效
| 申请号： | 201611214798.5 | 申请日： | 2016-12-26 |
| 公开（公告）号： | CN106754776B | 公开（公告）日： | 2019-12-20 |
| 发明（设计）人： | 张荣珍;徐岩 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N9/04 | 分类号： | C12N9/04;C12N15/53;C12N15/70;C12N1/21 |
| 代理公司： | 23211 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 | 代理人： | 彭素琴 |
| 地址： | 214122 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种催化木糖的比酶活提高的葡萄糖脱氢酶突变体，属于基因工程技术领域。本发明成功构建含有目的基因的重组菌株E.coli BL21(DE3)/pET‑GDH(A258F)。重组菌E.coli BL21(DE3)/pET‑GDH(A258F)诱导表达出突变酶A258F，粗酶液经His‑Trap亲和层析纯化后得到纯酶A258F。通过优化酶活测定条件，A258F在pH7.0的磷酸钾缓冲液中于55℃中比酶活高达7.59U·mg | ||
| 搜索关键词： | 木糖 葡萄糖脱氢酶 酶活 基因工程技术 磷酸钾缓冲液 亲和层析纯化 不对称转化 底物特异性 基因工程法 酶活测定 目的基因 诱导表达 重组菌株 粗酶液 突变酶 突变体 重组菌 纯酶 底物 辅酶 构建 菌种 催化 优化 改造 成功 | ||
【主权项】：
1.一种葡萄糖脱氢酶突变体，其特征在于，所述突变体的氨基酸序列是在SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列的基础上将第258位的氨基酸进行突变，所述将第258位的氨基酸进行突变，是突变成苯丙氨酸、组氨酸、色氨酸或者酪氨酸。/n
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