[发明专利]双顺反子表达载体、表达系统、制备方法及应用有效
申请号: | 201611024593.0 | 申请日: | 2016-11-17 |
公开(公告)号: | CN106520832B | 公开(公告)日: | 2020-02-18 |
发明(设计)人: | 王天云;贾岩龙;郭潇;王稳;陈思佳;王俐;张俊河;李琴;田政伟;徐丹华 | 申请(专利权)人: | 新乡医学院 |
主分类号: | C12N15/85 | 分类号: | C12N15/85;C12N15/65;C12N15/67;C12N15/66 |
代理公司: | 郑州睿信知识产权代理有限公司 41119 | 代理人: | 胡云飞 |
地址: | 453003*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | 本发明公开了一种双顺反子表达载体、表达系统、制备方法及应用,属于基因工程技术领域。该表达载体包含核基质结合区序列、内核糖体进入位点序列和筛选标记,通过在启动子与IRES序列之间插入目的基因,可构成目的基因‑IRES序列‑筛选标记基因依次连接的双顺反子序列。表达载体的结构为:MAR‑启动子‑目的基因‑IRES序列‑筛选标记‑PolyA‑MAR。该载体利用一个启动子实现目的基因和筛选标记的同时表达,可减少由于不同表达框存在导致的假阳性细胞克隆,提高阳性细胞克隆筛选率,并克服传统载体目的基因与筛选标记表达不均衡的问题;载体上包含MAR序列能克服转基因沉默,实现转基因在宿主细胞中的高效、长期表达。 | ||
搜索关键词: | 顺反子 表达 载体 系统 制备 方法 应用 | ||
【主权项】:
双顺反子表达载体,其特征在于:该载体包含在启动子上游和Poly A下游插入的核基质结合区序列以及IRES序列和筛选标记基因,其结构为:MAR‑启动子‑目的基因‑IRES序列‑筛选标记基因‑Poly A‑MAR。
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