[发明专利]一种用于检测人血清中AGEs含量的方法有效
| 申请号： | 201610894995.X | 申请日： | 2016-10-03 |
| 公开（公告）号： | CN106442974B | 公开（公告）日： | 2019-06-18 |
| 发明（设计）人： | 王贤俊;何丹 | 申请（专利权）人： | 王贤俊 |
| 主分类号： | G01N33/546 | 分类号： | G01N33/546 |
| 代理公司： | 温州名创知识产权代理有限公司 33258 | 代理人： | 陈加利 |
| 地址： | 325000 浙江省*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种用于检测人血清中AGEs含量的方法——胶乳免疫比浊法，该方法中提供的试剂包括碳酸盐缓冲液、稳定剂、偶联剂、防腐剂、抗人AGEs抗体的胶乳微球。该检测方法拓宽了检测的线性范围，并且该方法稳定性和线性好，特异性强，分析灵敏度高，操作简便等优点，可用于临床中常用的全自动生化分析仪。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 用于 检测 血清 ages 含量 方法 | ||
【主权项】：
1.一种检测AGEs含量方法所用的检测试剂，其特征包括试剂R1和试剂R2，试剂R1和试剂R2的体积比例为6∶1～4∶1，所述试剂R1和试剂R2的组成如下：试剂R1中含有![]()
试剂R2中含有![]()
抗人AGEs抗体的胶乳微球的制备步骤：(1)、每ml反应混合物加入下列各物：a.去离子水是最后容积为1.0mL；b.0.1mL的5x的贮备缓冲溶液，其pH值为6.0‑7.0，所述5x的贮备缓冲溶液采用0.5M MES缓冲溶液；胶乳微球最终浓度为5％(W/V)；c.按照二者呈现的0.2∶1～0.5∶1的比例范围加入50mg/ml的NHS去离子水溶液和19.2mg/mL的EDAC去离子水溶液；(2)、在室温将此混合物反应18min，不断搅拌；(3)、用上述的MES缓冲液，除去未反应的NHS和EDAC；(4)、重新将胶乳微球在去离子水中悬浮，使其浓度为5％(w/v)；(5)、将结合的蛋白质溶于MES缓冲溶液中，浓度为1mg/mL；(6)、立即加入蛋白质溶液；(7)、将混合物反应至少2h，轻轻搅拌；(8)、按1mL反应混合液加入2.5μL乙醇胺混合，搅拌反应10分钟；(9)、除去未结合的蛋白质和乙醇胺，贮于适宜的贮存缓冲溶液中。
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