[发明专利]一种高效快速的多糖蛋白结合疫苗纯化分析方法有效
| 申请号： | 201610827573.0 | 申请日： | 2016-10-13 |
| 公开（公告）号： | CN106397537B | 公开（公告）日： | 2020-01-07 |
| 发明（设计）人： | 李红臣;寇佳琳;黄前荣;张永强;任新刚;葛俊男 | 申请（专利权）人： | 李红臣 |
| 主分类号： | C07K1/34 | 分类号： | C07K1/34;C07K1/18;C07K14/34;A61K39/09;A61P31/04;G01N33/68;G01N33/535 |
| 代理公司： | 13128 石家庄轻拓知识产权代理事务所(普通合伙) | 代理人： | 郭明月 |
| 地址： | 050000 河北省石家庄*** | 国省代码： | 河北;13 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种高效快速的多糖蛋白结合疫苗纯化分析方法，首先利用超滤系统将多糖蛋白结合物中未结合的载体蛋白及其他小分子物质去除，得到多糖蛋白结合物和未参与结合的游离多糖，然后使超滤液经过阴离子交换树脂，游离的多糖穿过凝胶柱而多糖蛋白结合物吸附在凝胶基质上，洗脱并浓缩洗脱液即得纯化后的多糖蛋白结合物。本发明具有快速、高效、处理量大、设备要求简单、操作简便等诸多优点，解决了目前肺炎多糖结合疫苗试验室研究、中试开发及工业化生产中纯化时间长、效率低、成本高等诸多问题。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 高效 快速 多糖 蛋白 结合 疫苗 纯化 分析 方法 | ||
【主权项】：
1.一种高效快速的多糖蛋白结合疫苗纯化分析方法，在疫苗生产过程中用于多糖蛋白结合物的纯化制备，其特征在于：该方法首先利用超滤系统将多糖蛋白结合物中未结合的载体蛋白及其他小分子物质去除，得到多糖蛋白结合物和未参与结合的游离多糖，然后使超滤液经过阴离子交换树脂，游离的多糖穿过凝胶柱而多糖蛋白结合物吸附在凝胶基质上，洗脱并浓缩洗脱液即得纯化后的多糖蛋白结合物；/n该方法包括如下步骤：/nA、利用Minimate TFF超滤系统去除多糖蛋白结合物反应液中未反应的载体蛋白及小分子物质，所述Minimate TFF超滤系统的分子截留量设定为1000kDa；/nB、利用DEAE离子交换柱层析去除游离未结合的多糖，层析柱采用0.5M的NaCl溶液进行洗脱，收集洗脱液，经浓缩即得纯化后的多糖蛋白结合物，用于后续检测分析；/n所述多糖蛋白结合物为肺炎荚膜多糖CPS9V与CRM
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