[发明专利]一种冰法提取植物冰结构蛋白的方法

摘要

一种冰法提取植物冰结构蛋白的方法，涉及一种冰法提取植物冰结构蛋白的方法。本发明为了解决现有技术中冰结构蛋白提取原料有限、提取工艺复杂、成本较高、提取得到的冰结构蛋白浓度低和不能在冷冻食品与医学上广泛应用的问题。提取方法取干植物烘干，粉碎，或取新鲜植物，粉碎匀浆、离心过滤得到原料上清液备用；二、冰球的制备，三、冰结构蛋白提取液的制备；四、冰法提取；五、复提。本发明通过冰球直接吸附冰结构蛋白，并结合磷酸缓冲溶液法进行提取，增大提取液的浓度；可直接用于蛋白电泳检测其分子量和抗冻活性的检测，原料来源广，方便易得，成本低，适宜规模化生产。本发明方法适用于取植物冰结构蛋白的提取。

主权项

一种冰法提取植物冰结构蛋白的方法，其特征在于：该方法按以下步骤进行：一、原料制备取干植物，除掉植物中的杂质与灰尘并烘干，然后将烘干后的植物粉碎至粒度为60～120目颗粒原料备用；或取新鲜植物，除掉植物中的杂质与灰尘，粉碎匀浆后，离心过滤得到上清液原料备用；二、冰球的制备在硅胶冰格的每个冰孔位置放置玻璃球，向冰孔注蒸馏水，然后置于‑18℃的冰箱中冷冻，得到冰球；三、冰结构蛋白提取液的制备将步骤一制备的颗粒原料与磷酸盐缓冲溶液按料液比为1g:(5～30mL)混合得到混合液，或将步骤一制备的上清液原料与磷酸盐缓冲溶液按料液比为1mL:(5～30mL)混合得到混合液；将得到的混合液置于室温下，进行搅拌提取0.5～3.0h，然后将提取液置于离心机中，在离心机中离心10～15min得到上清液；四、冰法提取向上清液加入冰球，置于‑18℃冰箱中，提取2～5min，此时冰球吸附冰结构蛋白达到饱和，滤出冰球，冰球自然融化后，取出其中的玻璃球，得到冰结构蛋白提取液，滤出冰球后得到剩余的上清液；五、冰结构蛋白的复提向剩余的上清液中加入步骤二制备的冰球，重复步骤四2～4次，收集每次提取得到的冰结构蛋白溶液，即完成。