[发明专利]一种干燥综合征小鼠模型的造模方法

摘要

本发明公开了一种干燥综合征小鼠模型的造模方法，包括以下步骤：小鼠处死，取出双侧颌下腺，剥离包膜及结缔组织，用PBS洗净，按照每个颌下腺加入0.5ml PBS的量加入PBS，将颌下腺剪碎，在冰浴中充分匀浆，离心，取上清液，采用BCA蛋白定量法定量颌下腺抗原，用PBS将颌下腺抗原浓度调整至4mg/ml，加入等量FCA或FIA，浓度稀释至2mg/ml，反复吹打直至两液相互溶并呈乳白色状；将C57BL/6小鼠随机分组，将小鼠尾背部的毛剃掉；分别在第0天，第7天于小鼠的尾背部皮内多点注射FCA配制的2mg/ml小鼠颌下腺抗原，注射量为0.1ml/只；在第14天用同样的方法注射等量的FIA配制的颌下腺抗原；造模6周左右，检测指标，筛选造模成功的小鼠；本发明的造模方法成模率高，造模时间短。

主权项

一种干燥综合征小鼠模型的造模方法，其特征在于：包括以下步骤：步骤一，小鼠颌下腺抗原的制备：按需要取C57BL/6小鼠，脱颈椎处死，新洁尔灭消毒，无菌条件下取出双侧颌下腺，剥离包膜及结缔组织，用PBS洗净后放入无菌青霉素小瓶中，按照每个颌下腺加入0.5ml PBS的量，向无菌青霉素小瓶中加入PBS，将瓶内的颌下腺剪碎，在冰浴中充分匀浆，3000r/15min/4℃的条件离心，弃去上层脂质，取上清液，采用BCA蛋白定量法定量颌下腺抗原浓度，用PBS将颌下腺抗原浓度调整至4mg/ml，加入等量FCA弗氏完全佐剂或FIA弗氏不完全佐剂，将小鼠颌下腺抗原浓度稀释至2mg/ml，反复吹打直至两液相互溶并呈乳白色状，即制得注射用的2mg/ml小鼠颌下腺抗原；步骤二，将C57BL/6小鼠随机分组，保证各组的小鼠数量、体重、状态尽可能地相近；用剪刀或电动剃须刀将小鼠尾背部的毛剃掉以备注射抗原，正常对照组小鼠不作处理；步骤三，分别在第0天，第7天于小鼠的尾背部皮内多点注射步骤一制备的FCA配制的2mg/ml小鼠颌下腺抗原，注射量为0.1ml/只；在第14天用同样的方法注射等量的步骤一制备的FIA配制的颌下腺抗原；对照组小鼠用同样的方法注射等量的生理盐水；步骤四，造模6周左右，检测指标，筛选造模成功的小鼠。