[发明专利]发酵生产咖啡碱的工程菌、其构建方法及应用有效
| 申请号： | 201610475914.2 | 申请日： | 2016-06-22 |
| 公开（公告）号： | CN105861408B | 公开（公告）日： | 2019-11-19 |
| 发明（设计）人： | 张正竹;李萌萌;邓威威;宁井铭;邓骋 | 申请（专利权）人： | 安徽农业大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/77;C12P17/18;C12R1/15 |
| 代理公司： | 11321 北京市京大律师事务所 | 代理人： | 刘向辉;王凝<国际申请>=<国际公布>= |
| 地址： | 230036 安徽*** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | 本发明提供一种发酵生产咖啡碱的工程菌，所述工程菌是通过将咖啡碱生物合成途径中的关键酶基因导入谷氨酸棒状杆菌(Corynebacterium glutamicum)构建而成的重组谷氨酸棒状杆菌。本发明通过过量表达咖啡碱合成途径中的关键酶基因，使谷氨酸棒状杆菌具备生产咖啡碱的能力，且产物咖啡碱能够大量分泌到胞外，分离纯化步骤少，咖啡碱的得率高，摇瓶发酵结果显示，咖啡碱的产量达3.75mg/L，表明该重组工程菌具有良好的工业应用前景，为利用谷氨酸棒状杆菌发酵生产食品安全级咖啡碱奠定了理论基础。 | ||
| 搜索关键词： | 发酵 生产 咖啡碱 工程 构建 方法 应用 | ||
【主权项】：
1.发酵生产咖啡碱的工程菌，其特征在于，所述工程菌是通过将咖啡碱生物合成途径中的关键酶基因导入谷氨酸棒状杆菌（Corynebacterium glutamicum）构建而成的重组谷氨酸棒状杆菌，所述关键酶基因为CaXMT基因、TCS1基因、TAMPD基因和TIDH基因；/n所述关键酶基因为来源于茶树的TCS1基因、TAMPD基因、TIDH基因和来源于咖啡果的CaXMT基因；/n所述工程菌包含优化的全部四个目的基因序列的表达盒，所述表达盒的序列如SEQ IDNO:1所示。/n
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