[发明专利]一种利用纳米管高度辅助控制细胞骨架改变的方法

摘要

本发明公开了一种利用纳米管高度辅助控制细胞骨架改变的方法，包括采用有机溶剂对纯钛金属或低模量双相钛金属进行阳极氧化；采用显微手段表征所述阳极氧化的产物显微结构；制备纳米孔和纳米管形貌的钛金属件；分离骨髓间充质干细胞，取三代细胞黏附在经表面修饰的金属件上孵育；通过MTT、DYPI细胞核染色、SEM观察细胞的黏附效果；将孵育细胞的金属测试件放于无菌弹性板的培养孔中，恒温状态下置于万能试验系统给予不同周期、频率和载荷压应力；在SEM电镜或光学显微镜观察、测试细胞形变，并检测细胞增殖、分化表现。本发明所述方法能够使得修饰后的钛基底表面的弹性形变信号被放大，从而影响附着其上的成骨细胞获得更大刺激，引起更大的细胞骨架改变。

主权项

1.一种利用纳米管高度辅助控制细胞骨架改变的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1、采用有机溶剂对纯钛金属或低模量双相钛金属进行阳极氧化；步骤2、采用显微手段表征所述阳极氧化的产物显微结构；步骤3、制备纳米孔和纳米管形貌的钛金属表面纳米化修饰测试件，所述纳米管的高度为100～1000nm；步骤4、分离骨髓间充质干细胞hMSCs，取三代细胞黏附在经表面纳米化修饰的金属测试件上孵育4～12小时；步骤5、通过MTT法、DYPI细胞核染色法、SEM观察细胞的黏附效果；步骤6、将孵育细胞的金属测试件放于无菌弹性板的培养孔中，恒温状态下置于万能试验系统给予所述金属测试件不同周期、频率和载荷压应力；步骤7、在SEM电镜或光学显微镜观察、测试细胞形变，并检测细胞增殖、分化表现。