[发明专利]改造的转铁蛋白DNA结合域、重组DNA聚合酶及制备方法有效
| 申请号： | 201610345512.0 | 申请日： | 2016-05-23 |
| 公开（公告）号： | CN107304424B | 公开（公告）日： | 2019-05-10 |
| 发明（设计）人： | 刘华华 | 申请（专利权）人： | 成都福际生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/12 | 分类号： | C12N15/12;C12N9/12;C12Q1/6876 |
| 代理公司： | 北京方韬法业专利代理事务所(普通合伙) 11303 | 代理人： | 马丽莲 |
| 地址： | 610041 四川省成都市高新区科*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种改造的转铁蛋白DNA结合域，所述转铁蛋白为乳转铁蛋白LTF、血清铁传递蛋白TF、黑素转铁蛋白MTF或卵转铁蛋白OTF，所述各转铁蛋白的N端具有一段同源的DNA结合域，其中，DNA结合域的第10位、第20位分别为C；所述改造的转铁蛋白DNA结合域的氨基酸序列为：将第10位与第20位的C换为其他氨基酸，使其不能形成二硫键。本发明还公开了重组DNA聚合酶及其制备方法，采用上述改造的转铁蛋白DNA结合域与DNA聚合酶进行偶联，本发明还公开了一种含有上述重组DNA聚合酶的PCR检测试剂盒，本发明获得的重组DNA聚合酶不易受抑制剂抑制，可以实现直接PCR，同时可提高检测的灵敏度和稳定性。 | ||
| 搜索关键词： | 改造 铁蛋白 dna 结合 重组 聚合 制备 方法 | ||
【主权项】：
1.一种改造的转铁蛋白DNA结合域，其特征在于，所述转铁蛋白为乳转铁蛋白LTF、血清铁传递蛋白TF、黑素转铁蛋白MTF或卵转铁蛋白OTF，所述各转铁蛋白的N端具有一段同源的DNA结合域；所述乳转铁蛋白LTF的DNA结合域采用人源，如SEQ ID No.1所示，或采用鼠源，如SEQ ID No.2所示；所述血清铁传递蛋白TF的DNA结合域采用人源，如SEQ ID No.3所示，或采用鼠源，如SEQ ID No.4所示；所述黑素转铁蛋白MTF的DNA结合域采用人源，如SEQ ID No.5所示，或采用鼠源，如SEQ ID No.6所示；所述卵转铁蛋白OTF的DNA结合域采用鸡源，如SEQ ID No.7所示；所述改造的转铁蛋白DNA结合域的氨基酸序列为：将所述DNA结合域中第10位的C换为R，第20位的C换为A或者G，使其不能形成二硫键。
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