[发明专利]一种稳定表达Cas9蛋白的猪肠道上皮细胞系在审
| 申请号： | 201610322402.2 | 申请日： | 2016-05-13 |
| 公开（公告）号： | CN105907721A | 公开（公告）日： | 2016-08-31 |
| 发明（设计）人： | 陈庄;刘文华;蒋宗勇;陈中健;朱翠;张群洁;朱庆锋;吴秀菊;张卫娜 | 申请（专利权）人： | 广东省农业科学院农业生物基因研究中心 |
| 主分类号： | C12N5/10 | 分类号： | C12N5/10;C12N15/867 |
| 代理公司： | 北京众合诚成知识产权代理有限公司 11246 | 代理人： | 龚燮英 |
| 地址： | 510000 广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种稳定表达Cas9蛋白的猪肠道上皮细胞系，是以新生仔猪非转化肠道上皮细胞系IPEC‑J2为宿主细胞，转染含Cas9的慢病毒表达载体，经过20μg/mL的Blasticidin筛选得到的能够稳定表达Cas9蛋白的转化体。其构建方法为：(1)含Cas9的慢病毒表达载体的构建；(2)转化HEK293T细胞；(3)转染IPEC‑J2细胞；(4)单克隆筛选。本发明的猪肠道上皮细胞系IPEC‑J2‑Cas9，能够稳定表达Cas9蛋白，生长曲线和未转化的IPEC‑J2细胞相同，细胞形态与IPEC‑J2细胞相同。本发明在研究仔猪肠道上皮细胞生长、分化以及应对外源物质刺激方面具有重要的应用价值。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 稳定 表达 cas9 蛋白 肠道 上皮 细胞系 | ||
【主权项】：
一种稳定表达Cas9蛋白的猪肠道上皮细胞系，其特征在于：是以新生仔猪非转化肠道上皮细胞系IPEC‑J2为宿主细胞，转染含Cas9的慢病毒表达载体，经过20μg/mL的杀稻瘟菌素(Blasticidin)筛选得到的能够稳定表达Cas9蛋白的转化体。
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