[发明专利]一种测定大豆疫霉菌对抗病基因Rps1b毒性的分子方法有效
| 申请号： | 201610297980.5 | 申请日： | 2016-05-06 |
| 公开（公告）号： | CN105907863B | 公开（公告）日： | 2019-08-09 |
| 发明（设计）人： | 王源超;崔林开;王晓莉;董莎萌;郑小波 | 申请（专利权）人： | 南京农业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895 |
| 代理公司： | 洛阳公信知识产权事务所(普通合伙) 41120 | 代理人： | 张燕 |
| 地址： | 210000 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 一种测定大豆疫霉菌对抗病基因Rps1b毒性的分子方法，包括以下步骤：将待检测大豆疫霉菌接种于大豆叶片上，12小时后提取待检测大豆疫霉菌的总RNA；以提取的总RNA为模版进行逆转录，得到cDNA反应液；采用毒性检测引物AVR1BR2F/AVR1BR2R，以所得cDNA反应液为模版进行实时荧光定量PCR，如果在实时荧光定量PCR扩增过程中能够检测到无毒基因Avr1b‑1的转录，则对应的待检测大豆疫霉菌为无毒菌株，否则为毒性菌株。本发明能够快速准确的测定出待检测大豆疫霉菌对抗病基因Rps1b的毒性，并为大量、快速和准确鉴定大豆疫霉菌的生理小种或致病型提供有力支持。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 测定 大豆 霉菌 抗病 基因 rps1b 毒性 分子 方法 | ||
【主权项】：
1.一种测定大豆疫霉菌对抗病基因Rps1b毒性的分子方法，其特征在于：包括以下步骤：将待检测大豆疫霉菌接种于大豆叶片上，12小时后提取待检测大豆疫霉菌的总RNA；以提取的总RNA为模版进行逆转录，得到cDNA反应液；采用毒性检测引物AVR1BR2F/ AVR1BR2R，以所得cDNA反应液为模版进行实时荧光定量PCR，如果在实时荧光定量PCR扩增过程中能够检测到无毒基因Avr1b‑1的转录，则对应的待检测大豆疫霉菌为无毒菌株，否则为毒性菌株；所述毒性检测引物AVR1BR2F/ AVR1BR2R的核苷酸序列如下：AVR1BR2F：5ˊ‑GAGCTCATGAAGAGGACGAT‑3ˊ；AVR1BR2R：5ˊ‑TCTTATCCAGGCTGTACCCC‑3ˊ。
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