[发明专利]莫能菌素预混剂的制备方法

摘要

本发明公开了一种莫能菌素预混剂的制备方法，具体为将肉桂地链霉菌菌种制备后先进行种子摇瓶培养和种子罐培养，当培养至种子龄为20～24h，培养液pH值为6.6～7.1，生物量为10％以上，镜检结果显示菌丝粗壮呈网状、舒展、染色深、无杂菌时，转为发酵培养。待残油量为0.7％以下，生物量在40％以上，菌丝浓度为40～50％，莫能菌素效价不低于40000u/mL时，发酵结束。最后采用一步喷雾干燥法进行莫能菌素的提取，所制得的莫能菌素成品含量为20％以上，颗粒率达75％以上。另外，该方法发酵工艺简单，能有效提高发酵单位，降低生产成本，同时避免了动物源性氮源以及化学有机溶剂的使用。

主权项

莫能菌素预混剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：a.种子培养将经过菌种制备得到的肉桂地链霉菌依次进行种子摇瓶培养和种子罐培养；所述种子摇瓶培养的培养条件为以220～260rpm的转速，在32±0.5℃条件下培养24～27h；所述种子罐培养的接种量为0.0035％种子液；所述种子罐培养的培养条件为在温度为32±0.5℃，罐压为0.02～0.05MPa条件下培养20～24h；所述种子摇瓶培养所需的培养基按质量百分浓度计由以下成分组成：黄豆饼粉1～1.5％，酵母粉0.1～0.3％，葡萄糖0.2～0.5％，糊精1.0～2.0％，碳酸钙0.05～0.1％，余量为水；培养基灭菌后pH值为6.9～7.1；所述种子罐培养的培养基按质量百分浓度计由以下成分组成：黄豆饼粉1.0～1.5％，酵母粉0.1～0.25％，葡萄糖1.5～2.5％，碳酸钙0.1～0.25％，消泡剂0.05～0.1％，余量为水；培养基灭菌后pH值为6.6～7.1；b.发酵培养将步骤a培养过后的含菌种的培养液转入发酵罐内进行发酵培养，发酵培养条件为：罐内温度34±1℃，溶氧量30％以上，罐压0.03～0.05MPa；发酵过程中通过添加氨水溶液、植物油和无菌水，以使发酵液pH值维持在6.5～6.6之间，植物油按质量百分浓度计不低于3％，溶氧量不低于30％，发酵过程结束前24～48小时停止加植物油；当发酵液pH值达6.6～7.0，残油量为0.7％以下，生物量在40％以上，莫能菌素效价不低于40000U/mL时，发酵结束；发酵培养基按质量百分浓度计由以下成分组成：葡萄糖2.0～3.8％，黄豆饼粉1.8～3.7％，植物油1.9～2.5％，油酸甲酯0.05～1.0％，碳酸钙0.15～0.35％，硫酸钠0.15～0.22％，硝酸钠0.15～0.22％，氯化锰0.01～0.03％，硫酸亚铁0.005～0.01％，抗坏血酸0.001～0.002％，硫酸铝0.05～0.07％，磷酸氢二钾0.005～0.01％，消泡剂0.01～0.02％，余量为水；c.提取发酵结束后，先将发酵液pH值调至10～11，然后再加热至63℃并保温3小时，分别加入无水硅酸钠和碳酸钙后，将发酵液pH值调至7～8并放置30分钟，最后喷雾干燥；所述无水硅酸钠加入量为发酵液重量的6％，所述碳酸钙加入量为发酵液重量的0～35％；所述喷雾干燥的条件为：进风温度140～160℃；干燥室内温度65～95℃，排风温度60～70℃，干燥器内压力‑280～‑380MPa。