[发明专利]草甘膦抗性提高的葡萄EPSPS突变体的制备及其应用

摘要

本发明公开了一种采用DNA分子重排（DNA Shuffling）技术获得了草甘膦抗性增强的来源于葡萄的EPSP合酶多位点突变体及其编码基因与应用。所述突变体含有7个突变位点，其氨基酸序列如SEQ ID No.1所示，其编码的碱基序列如SEQ ID No.2所示。试验表明，本发明的来源于葡萄的EPSP合酶多位点突变体及其编码的基因，同时具有较高的草甘膦抗性和较强的与PEP亲和性，这些特性将为该基因用于抗草甘膦转基因作物的培育提供了可能。

主权项

1.一种来源于葡萄(Vitis vinifera)的EPSP合酶多位点突变体，其特征在于，所述多位点突变体含有下述7个突变位点：突变位点1：Q93R，即EPSP合酶氨基酸序列中第93位上的谷氨酰胺被替换为精氨酸；突变位点2：T113A，即第113位上的苏氨酸被替换为丙氨酸；突变位点3：P117L，即第117位的脯氨酸替换为亮氨酸；突变位点4：G126A，即第126位上的甘氨酸被替换为丙氨酸；突变位点5：C160Y，即第160位上的半胱氨酸被替换为酪氨酸；突变位点6：N239H，即第239位上的天冬酰胺被替换为组氨酸；突变位点7：V343A，即第343位上的缬氨酸被替换为丙氨酸；所述多位点突变体的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。